Dw hover h3 2019 отзывы владельцев: Отзывы владельцев об автомобилях DW Hower H3 (ДВ Ховер Х3) на Авто.ру

Содержание

Недостатки Грейт Вол Ховер Н3

Все минусы Great Wall Hower h4

➖ Багажник (неровная площадка при сложенных задних сиденьях)
➖ Динамика


Плюсы

➕ Высокий клиренс
➕ Управляемость
➕ Проходимость

Достоинства и недостатки Грейт Вол Ховер h4 2018-2019 выявлены на основе отзывов реальных владельцев. Более детальные плюсы и минусы DW Hower h4 2.0 с механикой и полным приводом 4WD можно узнать из рассказов ниже:

Отзывы владельцев

ДВС – 4G63S4T – старый и хорошо известный двигатель, с ресурсом до 400 000 км, экономичный, мощный и простой в обслуживании. Хорошо тюнингуется. Расход топлива 8,5 литров по трассе 110 – 120 км\ч.

МКПП – шестиступка, с хорошо подобранными передачами, РК – с понижайкой до 2,45, превращает стоковые 150 лошадей в табун аж 300 голов. Не в каждом грузовике столько кобыл можно найти!

При сделанном грамотном лифте подвески и кузова, Ховер становится прекрасным проходимцем, если кто-то ставит эти качества на первое место.

Ховер при равных условиях и технических доработках уверенно обойдет своих конкурентов – Патриота и Соболя – и остановится намного дальше в любом болоте, чем доблестные автомобили нашего автопрома.

Замечу, что DW Hower с 2017 года стал выпускаться в России. Пока качество сборки достойное – нареканий нет. Замеры толщины ЛКП порадовал – 125-135 мк (на Тойотах всего – 75-90 мк). Пластмасса в салоне качественная, без запаха, прекрасная звукоизоляция, неплохая аудиосистема. В общем, пока Ховер только радует.

Николай, отзыв о новом DW Hower h4 2.0 (150 л.с.) МКПП 4WD 2018 года

Видео отзыв

Визуально Ховер вполне примечателен, многие знакомые признаются, что машина цепляет взгляд, особенно лифтованный и на МТ резине. Явных погрешностей самого дизайна я бы не выявил, даже рейлинги стоят на своем месте, не шумят и отлично справляются с тем же боксом!

Сборка: отдельная тема. Как издевается мой сосед по гаражу: «что может быть хуже китайской машины собранной в России?».

В этом есть доля правды! Сборка — это большая проблема: двери и фары мне пришлось регулировать самому…

Садиться внутрь лично мне удобно: дверные проемы широкие, крыша – высокая, двери открываются на большой угол. Внутри – просторно, светло, эргономика нормальная, но для «душ поэтов» раздолья хватает.

А вот сиденья – не очень… Мне категорически не хватает лифта сидения и боковых поддержек, хотя при длительных перегонах я бы не сказал, что испытывал дискомфорт вообще… Форма у сидений позволяет ехать весь день без очевидной усталости спины!

В движении и проходимость. Город — неторопливый автобус, но лично я катаюсь с огромным удовольствием. Трасса — корабль, на 100-110 км/ч спать охота! Едет ровно, как по рельсам, дорогу держит более чем хорошо, передняя независимая подвеска делает свое дело!

На 140-160 км/ч я бы не сказал, что напрягает, если на расход не смотреть… Многие ругают плохую информативность руля… Вот бред, ей Богу… Что на Опеле ездил, что на нем — разницы вообще не почувствовал!

Владелец ездит на Great Wall Hower h4 2. 0 (122 л.с.) MT 2013 г.в.

Ховер Н3 появился у меня в ноябре 2013 года. Купил в салоне Ирито. Езжу мало, за 3,5 года намотал чуть больше 43 000 км. Отношусь к автомобилю бережно.

По сути, за все время была только одна поломка – помер датчик раздаточной коробки. Его заменили по гарантии. После этого проблем с ним не возникало.

Салон до сих пор выглядит как новый. Пластик не грохочет и не дребезжит. Скрипы появляются разве что в морозы, но после прогрева исчезают. А вот задняя дверь требует постоянного внимания. Каждый месяц чищу уплотнитель и наношу новый силикон. Если этого не делать, то она будет жутко скрипеть.

С кузовщиной тоже не все так гладко. В арках стали появляться рыжики. К счастью, вовремя заметил. Да и вообще гараж у меня сырой, поэтому приходится постоянно следить за ЛКП. Подвеска больше подходит для пересеченной местности, чем для асфальта. Клиренса вполне хватает – даже на легком бездорожье.

Михайл, отзыв о Грейт Вол Ховер h4 2. 0 с механикой 2013 года

Имеем Great Wall h4 new, в комплектации Luxe. Места в салоне и багажнике — сносно. Сразу, как и у всех, пересевших с пузотерок на паркетники и джипы, чувствуется обзор! Сидишь высоко, обзор наотличнейший, габариты чувствуешь хорошо, зеркала огромные. Следующий момент — как же все-таки сказочно проходятся эти неровности, выбоины и трамвайные пути! Их просто не замечаешь!

Про зиму, морозы у нас стояли за -30. Вообще, машина стоит в гараже, но и погонять в жесткий минус приходилось. На мой взгляд, долго нагревается двигатель/салон.

Я уже и одеяло «Автотепло» положил (от Соляриса осталось), а в лютые морозы еще и решетку радиатора изолоном закрываю, но все равно очень долго стрелка на середину поднимается. В движении-то быстро, а вот по пробкам и на небольшие расстояния до 5 км — очень долго.

Отзыв про Ховер h4 2.0 (116 л.с.) MT 2014 г.в.

Покупкой доволен. Двигатель турбированный, приемистость как у седана, обгон на трассе без проблем. Проехал в июле 2016-го за три недели 7 500 км, масло не ест, только ест бензин и воду в омывателе.

Очень доволен на трассе круиз-контролем, просто едешь и отдыхаешь. Расход на трассе летом с кондиционером 9-10 л/100 км бензина Аи-92. Зимой до 14-15 с учетом прогрева двигателя.

Для меня (возраст и лень), роль автомобиля в городских условиях Ховер выполняет, на бордюры и неровности на дорогах не всегда обращаю внимание. Распутица, гололед и снегопад, колея — не проблема, подключаю полный привод и вперед! Нужно, включу и понижайку, все равно из автомобиля не выйду (лень). На рыбалку езжу, пока не было нареканий…

Также отмечу хороший внешний вид, особенно спереди. Хорошая внутренняя отделка (кожа в салоне мне нравится), пластик тоже хороший (сверчков нет). Богатый набор опций и функций. Хорошая шумоизоляция. Хороший свет. Удобен и комфортен в управлении, хорошие тормоза. Автомобили других производителей с такими же опциями и функциями стоят дороже раза в 1,5.

Для себя считаю недостатком, что задние сиденья раскладываются, а пол получается не ровный. Остальное считаю мелкими косяками, которые не влияют на мой комфорт и на мою безопасность.

Отзыв о машине Great Wall Hover h4 Super Luxe 2.0 MT 4WD 2014 г.в.

Hower h4 2021 фото и цена, характеристики

На мой взгляд очень даже хороший комфортный автомобиль (крутыми тачками я не испорчен). Управляю им с удовольствием. Особые его преимущества я оценил зимой после обильного снегопада, особенно когда дворовые улицы очищают от снега трактором и соответственно снег сосредотачивается у обочин с высотой бруствера 0.5 метра.

Проблем с парковкой не возникает. Обычным легковым машинам это становится не под силу. Что касается отопления и кондиционирования, то печка работает нормально, в машине тепло, да и летом кондиционер тоже справляется.

Из недостатков могу отметить только то, что, конечно, он слабоват в приеме. Стартует он по-пижонски медленно, и этот момент особенно заметен когда нужно обогнать впереди идущую автомашину или на перекрестке. Но зато после разгона этот недостаток компенсируется легким плавным и мягким движением.

И еще один недостаток — это не совсем хороший обзор из-за передней левой стойки. Пешеход переходящий проезжую часть слева от водителя попадает в слепую зону, но этот недостаток есть и на многих других марках.

Александр Чекунов, отзыв о Hower h4 2.0 (116 л.с.) на механике

Конкуренты DW Hower h4, DW Hower H5, Haval H5, Haval H9, Jeep Wrangler, Kia Mohave, Land Rover Defender 90, Land Rover Defender 110, Lexus GX, Mitsubishi Pajero, Mitsubishi Pajero Sport, SsangYong Rexton, Toyota Fortuner, Toyota Land Cruiser Prado, Volkswagen Touareg, UAZ Patriot

пять плюсов и четыре минуса китайского внедорожника

Хорошая новость для всех поклонников настоящих рамных внедорожников: Great Wall Hover H5 вернулся на российский рынок в новом обличье. Теперь эту модель собирают под Тулой на суперсовременном заводе Haval.

Максим Федоров

В паспорте этого внедорожника с непростой судьбой стоит уже не первый штамп с российской пропиской. Ведь Great Wall Hover H5, а по сути тот же Haval H5, но с другой «физиономией», собирали у нас с 2008 года — сначала на заводе в Гжели, а затем на предприятии под Липецком. Правда, после того как в Great Wall приняли решение вести самостоятельный бизнес в России, это предприятие сгинуло вместе с его владельцем — дистрибьютером китайского автоконцерна, компанией «Ирито».

Так россияне лишились популярного внедорожника, составившего сильную конкуренцию УАЗу и фактически пробившего дорогу на наш рынок для прочей продукции китайского автопрома. В 2016 году созданная на останках «Ирито» компания «Чайна Автомаркет» возобновила выпуск этого внедорожника на заводе в «Ставрополь-Авто» под маркой DW и с именем Hower (да, через W). Впрочем, через пару лет и этот проект потерпел фиаско…

И вот, наконец, с третьей попытки H5 вернулся на российский рынок — теперь уже под крылом материнского концерна Great Wall, организовавшего производство полного цикла на предприятии под Тулой. Так что теперь это всерьез и надолго.

Любопытно, что в самом Китае производство внедорожника уже свернули, а к нам почему-то приехал H5 c дорестайлинговым дизайном передка, который китайцы явно срисовали с Mazda BT-50. Мало того, что смотрится он, мягко говоря, своеобразно (BT-50 такой дизайн тоже не красил), так еще и выбивается из текущей линейки Haval. В принципе, китайцам ничего не стоило подправить внешность модели, учитывая, что производить ее у нас будут не год и не два. На фоне инвестиций в запуск российского завода фейслифт обошелся бы в сущие копейки. Но китайцы не стали заморачиваться. Как не стали заморачиваться и с вариантами трансмиссий. В России этот внедорожник доступен только с механикой, что сразу отметает часть покупателей и дает фору UAZ Patriot, который автомат как раз имеет.

Маркетологи Haval, в отличие от их коллег из Ульяновска, явно делали ставку на тех «консерваторов», кому нужен автомобиль для езды по бездорожью, и им автомат скорее мешает. И я их прекрасно понимаю. Действительно, для чего еще покупать рамный внедорожник? Однако, если бы они копнули чуть глубже, поняли бы, что у нас 99% внедорожников 99% времени ездят по дорогам с твердым покрытием, хотя и разной степени убитости. И рама с полным приводом для нашего человека — это как стальная дверь в дачном доме. Ни от чего не защищает, но зато дарит чувство спокойствия и уверенности. Да, полный привод здесь есть уже в «базе», но учитывая, что большинство покупателей не знают, чем Full Time отличается от Part Time, и то, что большую часть времени те самые внедорожники ездят исключительно на зад-нем приводе, я бы все же добавил сюда автомат. Тогда в очередь покупателей Haval H5 записывались бы не только охотники-рыболовы, а также дачники и прочие жители проселочного «Замкадья», но и мечтающий о брутальном авто офисный планктон.

 Кресло водителя в средней комплектации идет с электроприводом.
 Климат-контроль входит в стандартное оснащение.
 Незатейливые приборы радуют информативностью, чего не скажешь о бортовом компьютере.

Первые впечатления от знакомства с любым автомобилем — самые яркие и запоминающиеся. Но если вначале ты обычно оцениваешь дизайн и комфорт машины, то в случае с «китайцем» все начинается с запаха салона и звука аудиосистемы. Они четко и ясно дают понять, сэкономил производитель или нет. И здесь Haval H5 приятно удивил — нагревшийся на солнце салон из «кожи молодого дерматина» не источал никаких убийственных ароматов. Ну а когда я завел мотор и включил медиацентр — удивился еще больше: у этой машины есть «голос»! Причем с басом, альтом и сопрано — именно так прописано в эквалайзере. Кстати, медиацентр с 8‑дюймовым экраном здесь уже в «базе», как и климат-контроль. Ну а то, что руль регулируется только по высоте, а бортовой компьютер выдает кучу бесполезной информации, вроде температуры шин, но не показывает текущую скорость или средний расход топлива — это мелочи жизни.

Сзади не тесно.

Чтобы выехать на дорогу с парковки дилерского центра, пришлось немало покрутить баранку. Радиус поворота здесь неприлично большой, как и число оборотов руля. Штатный задний парктроник и камера с динамической разметкой делают подобные маневры не столь болезненными, но передний парктроник явно не помешал бы. Зато в потоке проблем ни с маневрами, ни с динамикой нет. Хотя производитель скромно умалчивает данные по разгону, благодаря отличной тяге 2,0‑литрового турбомотора Mitsubishi 4G63S4T (в форсированном варианте он ставился на Lancer Evo) для своих двух тонн ускоряется H5 отлично. Да, машина валкая, а «грузовая» подвеска считывает всю дорожную мелочь, вплоть до разметки, но ехать на ней вполне комфортно и в городе, и на трассе. Кстати, даже на скорости за сотню в салоне достаточно тихо, а штатный круиз-контроль позволяет расслабиться при длинных перегонах. Но вот в городе не расслабишься: чтобы не выпадать из потока, приходится постоянно работать «мешалкой» — мотор везет только после 2000 оборотов. Да и дисковых тормозов при динамичной езде в городе тоже не хватает.

Любопытно, что на бездорожье Haval H5 показался мне комфортнее, чем на асфальте. На малой скорости подвеска хорошо отрабатывает большие амплитуды ям и бугров, а надежная штатная стальная защита мотора и трансмиссии позволяет нырять в глубокие лужи, не опасаясь повредить жизненно важные механизмы о скрытые под слоем мутной воды камни. Единственное, что ехать тихой сапой не очень-то получается — мотор захлебывается от недостатка тяги. И как раз тут на помощь приходит раздатка Borg Warner 47–60 с понижающей передачей 2.48/1.00. При активации режима 4L мотор тянет в горку даже на холостых! Единственным фактором, ограничивающим проходимость модели, могут стать штатные шины, но этот вопрос легко решается установкой «зубастой» грязевой резины. А дальше — просторы фантазии для тюнинга, как шасси, так и мотора, ограничивают только ваши финансы. 

 Багажник радует вместимостью, хотя его объем китайцы держат в секрете.

Технические характеристики Haval H5

Габариты4650x1800x1745 мм
База2700 мм
Снаряженная масса1905 кг
Полная масса2305 кг
Клиренс196 мм
Объем топливного бака70 л
Двигательбензиновый, 4-цилиндровый, 1997 см3, 150/4200  л. с./мин-1, 250/2400–4200 Нм/мин-1
Трансмиссиямеханическая, 6-ступенчатая, привод полный
Размер шин235/65R17
Динамика8,7 с до 100 км/ч
Расход топлива (город/трасса/смешан.)

8,7 л на 100 км в смешанном цикле

КонкурентыFoton Sauvana 2. 0T, UAZ Patriot 2.7
  • Тяговитый турбомотор Mitsubishi, отличная проходимость,
    большой потенциал для тюнинга, богатое оснащение, качественная сборка.
  • Устаревший дизайн, нет автомата, жесткая подвеска,
    невысокий уровень безопасности.

Вождение

На бездорожье способен на многое. Неплохо ускоряется и управляется на асфальте, но ощущается валкость, а также нехватка тормозов.

Салон

Морально устарел, но не вызывает отторжения. Радует оснащением и отсутствием фенольных амбре.

Комфорт

Подвеска отнюдь не лимузинная, зато стерпит многое. Штатный «круиз» — приятный бонус, как и неплохая музыка. А вот АКП не хватает…

Безопасность

Рамные модели априори менее безопасны сородичей с несущим кузовом. Эйрбэгов максимум 4.

Автомобиль предоставлен компанией «Хавэйл Лахта».

Вердикт

Переосмысленный китайцами потомок Isuzu Axi­om все еще не потерял актуальности и является отличной альтернативой «Патриоту». На таком внедорожнике не страшно отправиться вдаль от цивилизации: проверенная временем конструкция и мотор с японскими корнями дают уверенность, что машина не подведет.

Хочу получать самые интересные статьи

DW Hower остались без дистрибьютора

Внедорожники DW Hower остались в России без дистрибьютора. Об этом можно судить по закрытому сайту компании «Чайна Автомаркет». Показательно, что права на домен заканчиваются только через 4 с небольшим месяца.

***

Официально подтвердить закрытие «Чайна Автомаркет» «Китайским автомобилям» не удалось. Пресс-службы у бренда нет уже более полугода. Однако наши источники утверждают: небольшая черкесская компания, по сути, давно не работала. Производство DW Hower на заводе «Ставрополь Авто» завершилось еще в октябре 2018 года. С того времени дилеры стали распродавать оставшиеся у них машины.

В 2019-м число регистраций от месяца к месяцу даже росло. По данным «Автостат Инфо», в январе в органах ГИБДД было зарегистрировано 23 внедорожника h4, в феврале – 32, в марте – 38, в апреле – 47. У Hower H5 результаты скромнее: 1, 2, 2 и 2 продажи соответственно. Сколько внедорожников еще остается у дилеров? Ранее сообщалось, что компания произвела в Ставрополе минимум 2 400 машин, максимум – 2 620. Всего на учет с 2017 года поставлено около 1 900 автомобилей. Если эти данные верны, то в продаже или на складах могут находиться до 500 внедорожников.

В продаже или на складах могут находиться до 500 внедорожников DW Hower. Но найти их в автосалонах было сложно еще полгода назад

Между тем найти новые «Ховеры» в продаже было сложно уже в ноябре 2018 года. Тогда коллеги с портала «Колеса» провели опрос дилеров компании. И выяснилось, что автомобили есть далеко не во всех автосалонах. Где-то их были готовы привезти лишь под заказ. Мы повторили эксперимент спустя полгода. Телефоны некоторых автосалонов уже не работают. Там же, где машинами еще торгуют, продолжают повторять старую легенду: владельцы бренда якобы ищут новую сборочную площадку. И как найдут — возобновят выпуск автомобилей. Это может произойти даже на заводе Haval под Тулой, чуть ли не шепотом рассказал нам один из менеджеров.

***

Впрочем, последний вариант, по нашей информации, абсолютно нереален. Представители Haval еще полтора года назад заявили «Китайским автомобилям» (и, может, оказались правы?): «Чайна Автомаркет» закроется, едва завод под Тулой будет запущен. Причина банальна: инвестировавшему в свое производство Great Wall не нужны репутационные риски. А при сотрудничестве с крохотной фирмой они неизбежны.

Хороший пример – взаимоотношение GWM и компании «Ирито», выпускавшей Hover (через V) до 2015 года. Этот проект завершился не просто конфликтом, а уголовным делом. Как говорится в его материалах, «незаконными умышленными преступными действиями» со стороны владельцев группы компаний «Ирито» китайскому автопроизводителю был причинен ущерб на общую сумму более $48,4 млн» (цитата по «Коммерсанту»).

Если вы нашли ошибку или хотите что-то сообщить редакции сайта, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter

SEC.gov | Превышен порог скорости запросов

Чтобы обеспечить равный доступ для всех пользователей, SEC оставляет за собой право ограничивать запросы, исходящие от необъявленных автоматизированных инструментов. Ваш запрос был идентифицирован как часть сети автоматизированных инструментов за пределами допустимой политики и будет обрабатываться до тех пор, пока не будут приняты меры по объявлению вашего трафика.

Укажите свой трафик, обновив свой пользовательский агент, включив в него информацию о компании.

Для лучших практик по эффективной загрузке информации из SEC.gov, включая последние документы EDGAR, посетите sec.gov/developer. Вы также можете подписаться на рассылку обновлений по электронной почте о программе открытых данных SEC, включая передовые методы, которые делают загрузку данных более эффективной, и улучшения SEC. gov, которые могут повлиять на процессы загрузки по сценарию. Для получения дополнительной информации обращайтесь по адресу [email protected]

Для получения дополнительной информации см. Политику конфиденциальности и безопасности веб-сайта SEC. Благодарим вас за интерес к Комиссии по ценным бумагам и биржам США.

Идентификатор ссылки: 0.67fd733e.1628295279.415d6018

Дополнительная информация

Политика безопасности в Интернете

Используя этот сайт, вы соглашаетесь на мониторинг и аудит безопасности. В целях безопасности и обеспечения того, чтобы общедоступная служба оставалась доступной для пользователей, эта правительственная компьютерная система использует программы для мониторинга сетевого трафика для выявления несанкционированных попыток загрузки или изменения информации или иного причинения ущерба, включая попытки отказать пользователям в обслуживании.

Несанкционированные попытки загрузить информацию и / или изменить информацию в любой части этого сайта строго запрещены и подлежат судебному преследованию в соответствии с Законом о компьютерном мошенничестве и злоупотреблениях 1986 года и Законом о защите национальной информационной инфраструктуры 1996 года (см. Раздел 18 U.S.C. §§ 1001 и 1030).

Чтобы обеспечить хорошую работу нашего веб-сайта для всех пользователей, SEC отслеживает частоту запросов на контент SEC.gov, чтобы гарантировать, что автоматический поиск не влияет на возможность доступа других лиц к контенту SEC.gov. Мы оставляем за собой право блокировать IP-адреса, которые отправляют чрезмерное количество запросов. Текущие правила ограничивают пользователей до 10 запросов в секунду, независимо от количества машин, используемых для отправки запросов.

Если пользователь или приложение отправляет более 10 запросов в секунду, дальнейшие запросы с IP-адреса (-ов) могут быть ограничены на короткий период.Как только количество запросов упадет ниже порогового значения на 10 минут, пользователь может возобновить доступ к контенту на SEC.gov. Эта практика SEC предназначена для ограничения чрезмерного автоматического поиска на SEC.gov и не предназначена и не ожидается, чтобы повлиять на людей, просматривающих веб-сайт SEC. gov.

Обратите внимание, что эта политика может измениться, поскольку SEC управляет SEC.gov, чтобы гарантировать, что веб-сайт работает эффективно и остается доступным для всех пользователей.

Примечание: Мы не предлагаем техническую поддержку для разработки или отладки процессов загрузки по сценарию.

Модели, полученные от пациентов, повторяют гетерогенность молекулярных сигнатур и лекарственного ответа в педиатрической глиоме высокой степени злокачественности

Полученные от пациентов ортотопические ксенотрансплантаты и клеточные линии pHGG представляют различные подтипы опухоли

Мы создали уникальный ресурс 21 pHGG PDOX путем имплантации диссоциированной опухоли клетки из хирургических или аутопсических образцов в мозг мышей с иммунодефицитом. Возраст пациентов на момент постановки диагноза варьировал от 4 до 19 лет, средний возраст — 12 лет, а средняя выживаемость — 12 месяцев (дополнительные данные 1).Эффективность приживления была выше для хирургических образцов (56%), чем для образцов аутопсии (33%), вероятно, из-за снижения жизнеспособности опухолевых клеток в посмертном материале. После первоначального приживления опухоли опухоли собирали, диссоциировали и пассировали путем внутричерепной имплантации дополнительным иммунодефицитным мышам-хозяевам, чтобы подтвердить, что PDOX можно надежно поддерживать, а также для размножения и накопления. Пассированные опухоли вскрывали и криоконсервировали как жизнеспособные клетки, мгновенно замораживали для последующих молекулярных анализов или обрабатывали для гистопатологической оценки.Большинство моделей PDOX трансдуцировали лентивирусом, экспрессирующим люциферазу-2a-YFP, для получения изображений in vivo. Время выживания мышей-хозяев для этой коллекции моделей PDOX варьировалось от 2 до 6 месяцев после внутричерепной имплантации (дополнительные данные 1). Для подмножества опухолей диссоциированные клетки были адаптированы для размножения in vitro в условиях нервных стволовых клеток, чтобы облегчить их использование в качестве моделей согласованных клеточных линий для высокопроизводительного скрининга лекарственных средств (рис. 1).

Фиг.1: Обзор создания PDOX и клеточных линий, характеристика и доклинические испытания, а также данные pHGG, доступные на портале Pediatric Brain Tumor Portal.

Образцы глиомы высокой степени злокачественности имплантировали непосредственно в мозг реципиента мыши и пассировали как модели PDOX. Клеточные линии были также созданы из подмножества моделей PDOX (слева). Каждую PDOX или клеточную линию и, при наличии, подходящую опухоль пациента оценивали на предмет гистопатологии, профилей метилома ДНК, полногеномного секвенирования и RNAseq.Секвенирование генома сопоставленного нормального эталона также доступно для большинства моделей PDOX. Тестирование химической чувствительности проводилось на клеточных линиях (справа). Все связанные данные доступны через интерактивный портал данных — Pediatric Brain Tumor Portal (pbtp.stjude.cloud).

Мы выполнили профилирование ДНК-метилома для классификации всех 21 опухоли PDOX, 19 подходящих опухолей пациентов, из которых были установлены PDOX, и 8 совпадающих клеточных линий, созданных из PDOX (дополнительные данные 1b). Используя t -распределенное стохастическое встраивание соседей ( t -SNE), анализ профилей метилирования из этих образцов и контрольного набора, включающего образцы из различных подгрупп опухолей головного мозга 13 , все модели PDOX и клеточные линии четко сгруппированы по глиобластоме или глиоме. , в отличие от эмбриональных или эпендимных опухолей.(Рис. 2а). Расширенный вид глиобластомы и кластеров глиомы показывает, что 17 из 19 PDOXs и все 8 клеточных линий тесно сгруппированы с опухолью, из которой они произошли (Fig. 2b). Следуя установленной схеме классификации 13 , эта новая коллекция моделей PDOX включает 6 DMG-K27M, 2 плеоморфные ксантоастроцитомы (PXA), 10 глиобластом, IDH дикого типа, включая три мутанта h4.3 G34 (GBM G34), четыре подкласса средней линии (GBM Mid), один подкласс RTK II (pedRTKII) и два подкласса RTKIII (pedRTKIII).Три опухоли напрямую не соответствовали эталонным кластерам, но были наиболее близки к GBM Mid, pedRTKII или PXA (рис. 2 и дополнительные данные 1a, b). Для двух моделей, SJ-HGGX51 и SJ-HGGX78, диагностическая опухоль пациента, из которой был установлен PDOX, сгруппирована с эталонными образцами из контрольных воспалительных клеток (CONTR_INFLAM), что предполагает наличие больших участков некроза в хирургических образцах опухоли с обильным воспалительным процессом. инфильтрация, в то время как PDOX сгруппировался с подгруппой pedRTKII глиобластомы или очень близко к ней.Три модели PDOX, SJ-HGGX56, SJ-HGGX58 и SJ-HGGX59, которые были созданы на основе опухолей пациентов с дефицитом репарации несоответствий (MMRD), плотно сгруппированы с соответствующими опухолями пациента и расположены близко друг к другу вместе со срединными опухолями, несмотря на их корковое расположение у пациентов (рис. 2б). В дополнение к восьми клеточным линиям, созданным на основе этих моделей PDOX, мы также оценили профили метилирования шести ранее описанных клеточных линий DIPG 15 , используемых в наших доклинических тестовых экспериментах. Все мутантные опухоли h4K27M, включая опухоли пациентов, PDOX и клеточные линии, сгруппированы с подгруппой DMG-K27M, как и ожидалось (рис. 2a, b).

Рис. 2: Классификация метилирования ДНК опухолей пациентов сохраняется в соответствующих PDOX и клеточных линиях.

график t-SNE, показывающий подгруппы опухолей на основе профилей метилирования ДНК. Девятнадцать опухолей пациентов (кружки), 21 PDOX (квадраты) и 14 клеточных линий (ромбы) обведены черным контуром. Линии соединяют PDOX и клеточные линии с опухолями пациента, из которых они были получены.Классификация подгрупп опухолей обозначена цветом. Кружки без контуров — эталонные образцы из Capper et al. Пунктирный квадрат показывает область, содержащую все образцы HGG. Классификации: Эмбриональные опухоли: атипичные тератоидные рабдоидные опухоли (ATRT), эмбриональные опухоли с многослойными розетками (ETMR), нейроэпителиальная опухоль высокой степени злокачественности с изменением BCOR (HGNET_BCOR) и медуллобластома (MB). Эпендимальные опухоли: эпендимома (EPN), субэпендимома (SUBPEN), миксопапиллярная эпендимома (MPE), задняя ямка (PF), супратенториальная (ST).Глиобластома: диффузная срединная глиома (DMG) и глиобластома (GBM). Другая глиома: анапластическая пилоцитарная астроцитома (ANA_PA), нейроэпителиальная опухоль высокой степени злокачественности с изменением MN1 (HGNET_MN1), анапластическая плеоморфная ксантоастроцитома (PXA). Контрольная ткань, микроокружение воспалительной опухоли (CONTR_INFLAM). b Увеличенный вид области в рамке в a . Пунктирным овалом показаны опухоли пациентов с MMRD и производными моделями PDOX.

Гистопатология моделей PDOX показала типичные характеристики педиатрического HGG, включая высокую клеточность, различную степень дифференцировки астроцитов, очевидную митотическую активность, инфильтрацию паренхимы ЦНС, пролиферацию эндотелия сосудов и области некроза.Модели PDOX воспроизводили архитектурные и цитологические особенности, наблюдаемые в соответствующих опухолях пациентов, из которых они были получены (рис. 3).

Рис. 3: Гистопатология PDOX резюмирует характерные особенности опухоли пациента, из которой он был получен.

Окрашивание H&E HGG PDOX SJ-HGGX6 ( a ), показанное в качестве репрезентативного примера, воспроизводит гистологические особенности соответствующей первичной опухоли человека ( b ), включая инфильтрацию паренхимы ЦНС (стрелка), периваскулярную инвазию ( черный прямоугольный треугольник) и очевидная митотическая активность (звездочка).Ядерная иммунореактивность ATRX, хотя и сохраняется в захваченных нейронах, теряется в опухолевых клетках PDOX ( c ), как и в соответствующей первичной опухоли человека ( d ). N: захваченные нейроны коры головного мозга. Масштабная линейка: 50 мкм. Окрашивание H&E проводили для 21 модели PDOX, 20 из которых соответствовали опухоли пациента. ATRX IHC выполняли в шести парах PDOX / опухоль пациента, четырех с мутацией ATRX и двух без мутации ATRX. Потеря иммунореактивности ATRX соответствовала мутационному статусу во всех протестированных образцах.

PDOX и клеточные линии воспроизводят повторяющиеся мутации и сигнатуры экспрессии генов, характерные для pHGG

Для более полного обзора геномного ландшафта этих моделей мы выполнили полногеномное (WGS) или полное экзомное секвенирование (WES) для всех PDOX. , соответствовали опухолям пациентов и производным клеточным линиям. Соматические мутации и потенциально патогенные мутации зародышевой линии были идентифицированы для опухолей с совпадающими образцами зародышевой линии для линий 16/21, а потенциально патогенные немолчащие мутации были аннотированы для опухолей без доступной подобранной зародышевой линии (рис.4 и дополнительные данные 2). Как и ожидалось, было резко увеличено количество мутаций в PDOX с MMRD (SJ-HGGX56, 58 и 59) по сравнению с остальной частью когорты (медиана немолчащих SNV в экзоме — 19 336 по сравнению с 26). Повторяющиеся мутации, характерные для pHGG, были хорошо представлены в этой когорте опухолей, включая мутации горячих точек в гистоне h4, а также мутации в генах, участвующих в регуляции хроматина и транскрипции, таких как ATRX , BCOR и MYCN , повторяющиеся изменения. в пути рецепторная тирозинкиназа-RAS-PI3-киназа, включая миссенс-мутацию, амплификацию и слияние генов PDGFRA , изменения в путях TP53 и RB / клеточного цикла и активацию миссенс-мутации в ACVR1 (рис.4). Подавляющее большинство PDOX и клеточных линий сохраняли сигнатурные мутации и аномалии числа копий (CNA), обнаруженные в опухолях подобранных пациентов, включая крупномасштабные приросты и потери и очаговые амплификации во внехромосомной ДНК, хотя были некоторые примеры расхождения между пациентами. опухоль и производные модели (рис. 4 и дополнительные рисунки 1 и 2). Модели PDOX также поддерживали мутации генов сигнатурной глиомы на нескольких пассажах, как показано для пассажей 7 и 10 SJ-DIPGX7 и пассажей 3 и 4 SJ-DIPGX29 (рис.4).

Рис. 4: Геномные ландшафты PDOX и клеточных линий сохраняют изменения, присутствующие в подобранной опухоли пациента, и представляют множество подтипов pHGG.

Слева показаны изменения в генах, периодически мутировавших в pHGG. Пути указаны справа. В столбцах показаны образцы опухолей. PDOX и клеточные линии сгруппированы вместе с опухолями пациентов, из которых они были получены. Цифры — это идентификаторы идентификаторов PDOX вверху, идентификаторы файлов последовательности внизу.В строках показано расположение опухолей пациента, классификация ДНК-метиломов и тип образца опухоли. В некоторых случаях образцы опухоли пациента от рецидива или вскрытия включаются вместе с диагностическим образцом. Звездочка в типе образца опухоли указывает опухоль пациента, из которой был получен PDOX. Для 7 показаны отрывки 7 и 10 из SJ-DIPGX7, а для 29 показаны отрывки 3 и 4 из SJ-DIPGX29. PDOX * (темно-серый прямоугольник) указывает на ксенотрансплантат, полученный путем имплантации связанной клеточной линии. Мутации в сигнатурных генах, показанные строками, обозначены цветовым кодом типа мутации.G в блоке указывает на мутацию зародышевой линии.

Мы ранее показали, что pHGG, включая DIPG, обнаруживает гетерогенные сигнатуры экспрессии, воспроизводящие пронейральные, пролиферативные и мезенхимальные подгруппы глиомы 16,17 . Анализ этих сигнатур экспрессии во всей когорте пациентов с опухолями, PDOX и клеточными линиями показал, что модели PDOX представлены во всех трех подгруппах экспрессии. Однако пролиферативные сигнатуры в целом были намного сильнее в моделях PDOX и клеточных линий по сравнению с опухолями пациентов (рис.5). В соответствии с этим наблюдением, анализ генов, которые по-разному экспрессировались между PDOX и образцами пациентов во всей подобранной когорте (| logFC |> 1, прил. , p <0,05), показал повышенную регуляцию генов, связанных с прогрессированием клеточного цикла (прил. ). p <2,2e-16) и подавление генов, связанных с воспалительной реакцией (прил. p <2,2e-16) в PDOX (дополнительные данные 3). Мы удалили общие различия между PDOX и опухолями пациентов, чтобы лучше сравнить сходство сигнатур экспрессии между подобранными PDOX и опухолями пациентов, и обнаружили, что сигнатуры экспрессии PDOX сильно коррелировали с их подобранной опухолью пациента (дополнительный рис. 3). Репрезентативные модели PDOX сохранили точность сигнатур транскриптомов в течение нескольких пассажей (корреляция Пирсона 0,98, p <2,2e-16). Клеточные линии, которые представляют собой обширное пассирование в среде для роста нервных стволовых клеток, также продемонстрировали высокую точность с соответствующими моделями PDOX, из которых они были получены (корреляция Пирсона от 0,87 до 0,95, p <2,2e-16) (дополнительный рис. ).

Рис. 5: Сигнатуры экспрессии генов моделей PDOX повторяют подгруппы экспрессии глиомы.

Неконтролируемая иерархическая кластеризация количественной оценки последовательности РНК (log CPM) генов из трех сигнатур экспрессии, воспроизводящих пролиферативные, пронейральные и мезенхимальные подгруппы глиомы в опухолях, PDOX и клеточных линиях пациента.

Интерактивный онлайн-портал PDOX и характеристики клеточных линий

Чтобы максимально использовать эти хорошо изученные модели для сообщества исследователей рака, мы разработали онлайн-портал по изучению опухолей головного мозга у детей (https: // pbtp. stjude.cloud), который поддерживает интерактивное исследование всех молекулярных данных. На этом многофункциональном портале с открытым доступом можно просмотреть или загрузить подробную информацию по каждой отдельной модели, суммируя клинические, молекулярные и гистопатологические особенности (дополнительный рис. 5). Модели можно получить, заполнив форму запроса через портал. Кроме того, на этом портале будет размещена информация о других моделях PDOX детских опухолей головного мозга, созданных в Детской исследовательской больнице Св. Джуда 18 , и в будущем он будет постоянно обновляться новыми моделями.

Высокопроизводительный скрининг лекарственного ответа различных подтипов pHGG

Мы выбрали панель из 16 клеточных линий для оценки лекарственной чувствительности различных подгрупп pHGG: восемь линий клеток глиомы были созданы из PDOX, о которых сообщалось здесь, о шести ранее сообщалось о пациенте- производные линии клеток DIPG 19,20 (дополнительная таблица 1). В качестве контроля использовали два разных источника пролиферирующих нормальных человеческих астроцитов: астроциты, полученные из iPS-клеток (iAstro), и астроциты, выделенные из ствола мозга эмбриона человека (HABS) (дополнительная таблица 1).Вместе когорта включала 2 кортикальных HGG с мутацией h4.3 G34R, 2 HGG с гистоном h4 дикого типа и 10 DIPG; 7 с мутацией h4.3 K27M и 3 с мутацией h4.1 K27M. Мы оптимизировали все клетки для роста в 384-луночных планшетах для HTS и провели серию проверочных экспериментов для обеспечения воспроизводимости, включая кривые пролиферации клеток, условия культивирования и параметры автоматизации HTS. Мы показали, что клетки DIPG, посеянные в виде прикрепленных культур на матрице базальной мембраны, по сравнению с теми же клетками, выращенными в виде опухолевых сфер, аналогично реагировали на панель из 53 различных препаратов, представляющих диапазон механизмов действия (MOA), протестированных в формате доза-ответ (DR). (Дополнительный рис.6, корреляция Пирсона = 0,994; Дополнительные данные 4а, б). Таким образом, мы провели эксперименты HTS с прилипшими клетками, чтобы избежать вариабельности внутри и между культурами, внесенными различными размерами опухолевых сфер.

Лучшие результаты начального скрининга из 1134 одобренных FDA лекарств в одной концентрации в девяти клеточных линиях pHGG (дополнительные данные 4c) были дополнены недавно одобренными FDA онкологическими препаратами, эпигенетическими модуляторами, клиническими кандидатами и соответствующими химическими зондами для получения набор из 93 лекарственных средств, которые были проверены на полной панели из 16 клеточных линий в формате DR с использованием независимо приготовленных планшетов с соединениями.Для всех 16 клеточных линий значения z 21 , рассчитанные из 310 384-луночных аналитических планшетов, показали отличное отношение сигнал / шум (значения z ‘: медиана = 0,82, минимум = 0,56, максимум = 0,92) ( Дополнительный рис.7). Дополнительные 246 соединений, отобранные из более широкого диапазона MOA лекарственного средства, были подвергнуты скринингу в формате DR в четырех типовых моделях pHGG, представляющих различные подтипы гистонов. Результаты всех этапов этих исследований HTS представлены в дополнительных данных 4 и доступны онлайн для изучения на портале Pediatric Brain Tumor Portal (pbtp.stjude.cloud), где интерактивные функции позволяют пользователю запрашивать по классу препарата, конкретному названию соединения, подгруппе опухоли или линиям опухолевых клеток, а также визуализировать результаты в нескольких форматах, включая данные о диапазоне реакций на выбранные соединения, чувствительности к все протестированные препараты для выбранных клеточных линий и индивидуальные накладываемые кривые доза-ответ. Функция наведения указателя мыши также позволяет пользователю идентифицировать выбросы и просматривать информацию о соединении, значения доза-реакция и соответствующую кривую доза-реакция.

Результаты комплексного скрининга 93 соединений в 16 клеточных линиях суммированы на рис. 6. Чтобы выделить наиболее избирательно эффективное лекарство для каждой клеточной линии, мы вычислили площадь под кривой (AUC) от DR каждого лекарственного средства и вычитали среднюю AUC для этого препарата, рассчитанную по всем клеточным линиям (фиг. 6a). Примечательно, что распределение ответов на SUDIPG-XXI показало, что эти клетки были более чувствительны, чем другие линии, почти ко всем протестированным препаратам. Следовательно, мы отметили эту модель как выброс и удалили ее из последующих анализов.Несколько препаратов были определены как наиболее селективные для более чем одной модели pHGG: ингибитор NF-κB EVP4593 для SJ-DIPGX7c и SUDIPG-XIII, ингибитор HSP90 танеспимицин для SJ-DIPGX37c и SJ-HGGX39c и ингибитор MEK траметиниб для SJ. -DIPGX9c и SUDIPG-XIX. Ингибитор GSK3 LY20 был наиболее селективным препаратом как для контрольных клеток SUDIPG-IV, так и для HABS, тогда как ингибитор протеасом маризомиб был наиболее селективным для контрольных клеток SUDIPG-VI и iAstro.

Рис. 6. Анализ результатов скрининга 93 соединений на 14 моделях pHGG и двух нормальных линиях астроцитов.

a Распределение нормализованной AUC лекарства (AUC лекарства в этой клеточной модели минус медиана AUC для этого лекарства во всех моделях для контроля присущей эффективности лекарства). Каждая точка представляет собой один препарат, наиболее селективный препарат для каждой модели показан синим цветом. Клеточные модели имеют цветовую маркировку в зависимости от статуса мутации гистонов. n = 93 значения AUC лекарственного средства, полученные в результате одного или нескольких независимых экспериментов. b Распределение AUC для избранных препаратов, которые были оценены в клинических испытаниях или участвовали в качестве многообещающих агентов в доклинических исследованиях глиомы.Каждая точка представляет AUC лекарственного средства в одной модели и имеет цветовую кодировку в зависимости от статуса мутации гистона в модели. n = 15 значений AUC препарата, полученных из одного или нескольких независимых экспериментов, за исключением TMZ, где n = 4. В a , b данные представлены в виде прямоугольных диаграмм, где средняя линия — это медиана, нижняя и верхние шарниры соответствуют первому и третьему квартилям, верхние усы простираются от шарнира до наибольшего значения не дальше, чем в 1,5 раза превышающем межквартильный интервал (IQR) от шарнира, а нижний ус простирается от шарнира до наименьшего значения не более 1 . 5 × IQR петли. Все точки данных нанесены индивидуально. c Выберите кривые доза-реакция для препаратов, выделенных в b . Нормальные ссылки показаны черными пунктирными линиями (iAstro) и черными сплошными линиями (HABS). Модели pHGG окрашены в серый цвет или по статусу гистоновых мутаций для указанных моделей. d Неконтролируемая иерархическая кластеризация лекарственного средства AUC z — баллы для 25% наиболее активных соединений из 93 протестированных. Метки столбцов и столбцов имеют цветовую маркировку в зависимости от статуса мутации гистонов.Кластеры 1 и 2 (серые прямоугольники) выделяют кластеры соединений, показывающие различные профили активности в протестированных моделях. Цветовой код статуса мутации гистона: h4-wt (красный), h4.3 G34R (синий), h4.1 K27M (бирюзовый) и h4.3 K27M (зеленый). Линии контрольных клеток (iAstro и HABS) черные. Цветовой код механизма действия показан справа и аннотирован в цветовых блоках строки тепловой карты слева в d .

Мы сравнили распределение значений AUC траметиниба, одобренного FDA препарата, по всем 15 моделям с AUC для других препаратов в наборе, которые были оценены в клинических испытаниях или использовались в качестве многообещающих агентов в доклинических исследованиях глиомы у взрослых или детей. (Рис.6b, c и дополнительный рис. 8a). THZ1, который нацелен на CDK7 (ref. 22 ), был наиболее активным лекарством (самая высокая медиана AUC) в этой подгруппе и был более селективным для моделей pHGG по сравнению с iAstro и HABS. Ингибитор CDK9 CDK9-IN-2 (ссылка 23 ) имел более низкие значения AUC по сравнению с THZ1, но также показал селективность для большинства моделей pHGG по сравнению с контрольными клеточными линиями. CDK7 и CDK9 являются ключевыми регуляторами инициации и удлинения транскрипции, соответственно, подтверждая концепцию нацеливания на транскрипционные зависимости в опухолевых клетках 24 .Напротив, ингибитор pan-BET JQ1 (ссылка 25,26 ), который также влияет на регуляцию транскрипции, был намного слабее, чем ингибиторы CDK7 и CDK9, и был в равной или большей степени цитотоксичен по отношению к линиям контрольных клеток (рис. 6b). . Антиметаболит GMX-1778, который нарушает регенерацию NAD + через NAMPT, показал высокую эффективность, что согласуется с предыдущим отчетом 27 . Однако мы не наблюдали повышенной чувствительности в линии с мутацией PPM1D (SJ-DIPGX37c), как предсказывалось в предыдущем исследовании 27 .В соответствии с предыдущими сообщениями, в которых оценивались ингибиторы HDAC широкого спектра действия 15,19,28,29 , панобиностат показал высокую эффективность in vitro. Однако CUDC-907, ингибитор двойного действия класса I PI3K и HDAC 30 , имел более высокую медианную AUC и был немного более селективным для моделей pHGG. Ингибитор протеасом маризомиб оценивается в исследовании комбинации I фазы с панобиностатом в DIPG (NCT04341311) 15 . Этот препарат имел самый большой межквартильный диапазон значений AUC в подгруппе и вызывал значительную цитотоксичность в клетках iAstro (рис.6b и дополнительный рис. 8a).

Ингибиторы PI3K / mTOR (омипалисиб) и MEK (траметиниб) были селективными для тех же трех моделей DIPG pHGG по сравнению с другими клеточными линиями (рис. 6c). Однако траметиниб, как правило, был намного менее активен в группе, о чем свидетельствует его значительно более низкая медиана AUC (рис. 6b). Оценка активации транскрипционного пути MAPK (MPAS) была ранее разработана на основе экспрессии избранного набора генов, которые коррелируют с чувствительностью к ингибиторам пути MAPK в клеточных линиях некоторых, но не всех типов опухолей 31 .Мы определили MPAS в 14 клеточных линиях, оцененных в нашем скрининге лекарств, но не обнаружили корреляции между MPAS и ответом на траметиниб (корреляция Пирсона -0,34) (дополнительный рис. 8b), что свидетельствует о значительной гетерогенности в ответе pHGG без простой связи с экспрессией генов. подписи.

Ингибитор WEE1 MK-1775 (адавосертиб), который оценивается клинически с лучевой терапией в pHGG (NCT01922076), показал низкую эффективность в нашей панели. Аналогичным образом, алкилирующий агент темозоломид (TMZ), стандарт лечения глиом у взрослых, был неэффективен в наших моделях опухолей, что согласуется с отсутствием клинического ответа на TMZ в pHGG 32 . Мы также протестировали два других алкилирующих агента, стрептозоцин и нимустин 33 , и оба оказались неэффективными в наших моделях pHGG (дополнительные данные 4c, e).

Наконец, чтобы лучше изучить паттерны лекарственной чувствительности по клеточным линиям в нашей панели, мы выполнили неконтролируемую кластеризацию клеточных линий (столбцы) и соединений (строки) со всеми 93 соединениями (дополнительный рис. 8c) или с использованием верхних 25%. наиболее активные препараты из 93 оцененных (рис. 6d). Примечательно, что модели опухолей не группировались по подтипу гистонов на основе их ответов на лекарства.Мы наблюдали два кластера соединений, которые были обогащены молекулами, действующими с одной и той же MOA, что указывает на некоторую избирательную чувствительность в ответ на ингибирование определенных процессов. Кластер 1 содержал четыре ингибитора протеосом (маризомиб, ONX-0914, иксазомиб и бортезомиб), а кластер 2 содержал четыре соединения, нацеленных на транскрипционные зависимости (THZ1, CDK9-IN-2, панобиностат и CUDC-907) и два соединения с двойной активностью, включая ингибирование PI3K. (CUDC-907 и омипалисиб). Кластер 2 характеризовался значительным отсутствием эффективности в отношении контрольной клеточной линии iAstro, следовательно, демонстрируя некоторую селективность в отношении HGG.

Ингибирование передачи сигналов PI3K / mTOR и MEK демонстрирует селективные эффекты по отдельности и в комбинации в pHGG in vitro и in vivo.

Мы стремились определить, транслируются ли различия в чувствительности между линиями опухолевых клеток, обнаруженных с помощью HTS, в эффекты in vivo в ортотопических опухолях головного мозга. Для этих исследований мы выбрали ингибиторы пути PI3K / mTOR и MEK, потому что ответы в разных линиях pHGG различались, и взаимодействие с мишенью можно надежно обнаружить в опухолевой ткани. Результаты HTS показали, что ингибитор PI3K / mTOR омипалисиб был активен в большинстве моделей pHGG, но различалась по эффективности.Напротив, ингибитор MEK траметиниб показал слабую активность во многих опухолевых клетках (фиг. 6 и дополнительные данные 4f). Хотя эти пути являются неотразимыми мишенями для лечения, учитывая известные генетические аберрации в обоих путях в pHGG 2,5 , оба соединения являются известными субстратами АТФ-зависимых насосов оттока P-gp и BCRP, ограничивая их воздействие на мозг 34,35 . Поэтому мы выбрали паксалисиб (GDC0084) и мирдаметиниб (PD0325901), которые нацелены на PI3K / mTOR и MEK, соответственно, и обладают лучшим проникновением через гематоэнцефалический барьер и воздействием 34,36,37 , чтобы подтвердить эффекты ингибирования пути для in vitro / сравнения in vivo.

Многочисленные исследования показали обширную перекрестную связь между этими путями и обещают повысить эффективность комбинированных подходов к ингибированию. 38,39 . Мы провели количественные анализы синергизма in vitro в семи клеточных линиях и проанализировали результаты с использованием модели поверхности реакции двумерного ответа на аддитивно взаимодействующие дозы (BRAID) 40 . BRAID κ обозначает тип взаимодействия ( κ <0 - антагонистический; κ = 0 — аддитивный, и κ > 0 — синергетический), тогда как BRAID IAE 50 вычисляет степень, в которой достигается комбинация минимальная эффективность в пределах определенного диапазона концентраций (в этом исследовании снижение жизнеспособности клеток на 50% для концентраций ≤1 мкМ).Более высокое значение IAE 50 означает, что комбинация более эффективна. Комбинация паксалисиба и мирдаметиниба проявляла синергетическое ингибирование роста ( κ > 0) в трех клеточных линиях pHGG (SJ-DIPGX29c, SJ-DIPGX37c и SJ-HGGX6c) и контроле iAstro, но не в SJ-DIPGX7c, SJ-DIPGX7c, SJ-DIPGX7c. , SJ-HGGX6c или HA-bs контроль (рис. 7). При рассмотрении эффективности комбинации (IAE 50 ) синергия внесла большой вклад в случае SJ-DIPGX37c и SJ-DIPGX29c, на что указывает кривизна 50% (черный) и 90% (белый) клеток. изоболы жизнеспособности.Напротив, значение IAE 50 для SJ-DIPGX7c определялось исключительно паксалисибом: изоболы 50% и 90% работают параллельно оси y , потому что мирдаметиниб сам по себе обладает небольшой цитотоксичностью и не может усиливать активность паксалисиб. Хотя синергизм наиболее высок у iAstro ( κ = 8,8), о чем свидетельствует четкий сдвиг в 50% -ном изоболе с увеличением концентрации мирдаметиниба, оба препарата сами по себе слабо цитотоксичны, и их взаимодействия недостаточно, чтобы вызвать высокую комбинированную эффективность ( IAE 50 = 1.0).

Фиг. 7: Паксалисиб и мирдаметиниб вызывают синергическое ингибирование роста в подгруппе клеточных линий pHGG.

Модель BRAID представляет синергетические эффекты паксалисиба (pax) и мирдаметиниба (mir) после 7-дневной обработки на 7-клеточных линиях: h4.3 K27M DIPGs; SJ-DIPGX37c, SJ-DIPGX29c, SJ-DIPGX7c, h4.3 G34R pHGG; SJ-HGGX42c, SJ-HGGX6c и астроциты контролируют HABS и iAstro. Параметр κ измеряет тип взаимодействия: κ <0 подразумевает антагонизм, κ = 0 подразумевает аддитивность, а κ > 0 подразумевает синергию).Индекс достижимой эффективности (IAE) количественно определяет степень, в которой комбинация лекарств достигает минимального уровня эффективности в пределах определенного диапазона концентраций. Более высокое значение IAE означает, что комбинация была более эффективной. В этом эксперименте это было определено как снижение жизнеспособности клеток на 50% (черная линия) при концентрациях ≤ 1 мкМ (пунктирные линии). Изобола снижения жизнеспособности на 90% (белая линия) включена для справки.

Мы выбрали две модели DIPG PDOX с мутантом h4.3 K27M, SJ-DIPGX37 и SJ-DIPGX7, чтобы проверить, предсказывают ли результаты HTS in vitro ответ in vivo.Обе содержат мутации, нацеленные на пути PI3K и TP53, связанные с (фиг. 4), и их соответствующие клеточные линии (SJ-DIPX7c и SJ-DIPGX37c) продемонстрировали различные ответы in vitro. Обе клеточные линии показали одинаковую чувствительность к паксалисибу (EC 50 = 0,32 мкМ для SJ-DIPGX37c против 0,22 мкМ для SJ-DIPGX7c), тогда как мирдаметиниб вызывал более сильный ответ (EC 50 = 1 мкМ) у DIPGX37c, который имел PIK3R1 и PPM1D и мало повлияли на SJ-DIPGX7c, который имеет мутации PIK3CA и TP53 (рис. 4 и 7). Аналогичные ответы наблюдались с траметинибом (дополнительные данные 4f).

Мы оценили ингибирование путей PI3K и MEK на моделях внутричерепного PDOX, сопоставленных с этими клеточными линиями, путем оценки уровней p-AKT S473 и p-ERK T202 / Y204, соответственно (фиг. 8 и дополнительный фиг. 9). Интересно, что в то время как уровни активности пути PI3K, по оценке p-AKT, были одинаковыми для обоих PDOX, SJ-DIPGX7 показал заметно более низкие уровни p-ERK, что указывает на более низкую активацию пути MEK (рис.8а). В соответствии со сниженной зависимостью от передачи сигналов MEK мирдаметиниб не оказывал значительного влияния на выживаемость или пролиферацию клеток в SJ-DIPGX7, что оценивалось по активной каспазе-3 и фосфогистону h4 соответственно. Лечение только паксалисибом вызывало тенденцию к повышенной гибели клеток, а в сочетании с мирдаметинибом значительно увеличивало гибель клеток (рис. 8а). SJ-DIPGX37 показал значительное снижение пролиферации опухолевых клеток in vivo при лечении паксалисибом и более значительный эффект при лечении мирдаметинибом, при этом ни один из них не вызывал значительной гибели опухолевых клеток. Поразительно, но комбинация паксалисиба и мирдаметиниба значительно увеличивала гибель опухолевых клеток in vivo по сравнению с уровнями, индуцированными каждым агентом по отдельности (рис. 8b). В соответствии с исследованиями синергии in vitro, комбинация оказала гораздо более значительное влияние на гибель клеток в SJ-DIPGX37.

Рис. 8: Паксалисиб и мирдаметиниб проявляют селективное действие на выживаемость и пролиферацию клеток in vivo.

a Слева: одиночный вестерн-блоттинг лизатов внутричерепного PDOX SJ-DIPGX37 (необработанный, дорожка 1) и SJ-DIPGX7 (дорожки 2–9), обработанных носителем (veh), паксалисибом (pax, 12 мг / кг). ), мирдаметиниб (мир, 17 мг / кг) или комбинация паксалисиба и мирдаметиниба (pax + mir), как указано; антитела указаны справа.Количественное определение ИГХ в срезах опухолей SJ-DIPGX7, обработанных агентами, показано вдоль оси x- для активной каспазы-3 (в центре) и фосфогистона h4 (справа), n = 3 опухоли для veh, mir и n = 4 опухоли для pax и pax + mir. Значения p для сравнения активного окрашивания каспазой-3: veh против mir 0,9454, veh против pax 0,0964, veh против pax + mir 0,0032, mir против pax 0,0383, mir против pax + mir 0,0014 и pax по сравнению с pax + mir 0.1474. Значения p для сравнения окрашивания p-h4 представляют собой veh vs.mir 0,7418, veh против pax 0,1733, veh против pax + mir 0,0258, mir против pax 0,6600, mir против pax + mir 0,1435 и pax против pax + mir 0,5747. b Слева: IHC для pAKT Ser473 и pERK в опухолях SJ-DIPGX37 в репрезентативных опухолях, обработанных veh, pax, mir или pax + mir, как указано. Количественная оценка окрашивания ИГХ на срезах опухолей SJ-DIPGX37, обработанных агентами, показана вдоль оси x- для активной каспазы-3 (в центре) и фосфогистона h4 (справа), n = 3 опухоли для каждого лечения.Значения p для сравнения активного окрашивания каспазой-3: veh против mir 0,9628, veh против pax 0,9405, veh против pax + mir 0,0003, mir против pax 0,9997, mir против pax + mir 0,0005 и pax по сравнению с pax + mir 0,0006. Значения p для сравнения окрашивания p-h4: veh против mir <0,0001, veh против pax 0,0110, veh против pax + mir <0,0001, mir против pax 0,0043, mir против pax + mir 0,3352 и pax против pax + mir 0,0006. NS не имеет значения; * p <0,05; ** p <0.01; *** p <0,001, **** p <0,0001 с использованием обычного одностороннего дисперсионного анализа с апостериорным тестом Тьюки. Столбики ошибок показывают среднее значение ± стандартное отклонение. Масштабная линейка в b , левая панель = 100 мкм.

Мы расширили эти многообещающие результаты на SJ-DIPGX37, чтобы оценить влияние на выживаемость мышей с опухолями. Мы снизили дозы паксалисиба до 8 мг / кг и мирдаметиниба до 14 мг / кг в контрольной группе монотерапии и в комбинации для длительного лечения из-за значительной потери веса при более высоких дозировках.Эти дозы по-прежнему эффективно подавляли оба пути в головном мозге, при этом комбинация показывала слегка усиленное подавление p-ERK1 / 2 по сравнению с одним мирдаметинибом (дополнительный рисунок 9c). Мы случайным образом распределили 24 мышей, несущих SJ-DIPGX37 PDOX, в четыре группы: (1) носитель, (2) паксалисиб, (3) мирдаметиниб или (4) комбинация и обнаружили, что комбинация паксалисиба и мирдаметиниба, но не одно лекарство по отдельности, значительно увеличила выживаемость мышей с внутричерепными опухолями SJ-DIPGX37 (рис.9, p = 0,0056, логранговый критерий Мантела – Кокса). Мы исследовали фармакокинетику мирдаметиниба и паксалисиба в плазме и головном мозге у нормальных мышей, чтобы оценить возможность того, что усиленные комбинаторные эффекты были вызваны лекарственным взаимодействием. В то время как оба агента имели немного повышенные AUC в плазме в комбинации (дополнительный рис. 10 и дополнительные данные 5), различия были в пределах вариабельности и менее чем двукратной величины, обычно принятый порог для идентификации лекарственного взаимодействия 41 .Таким образом, повышенная эффективность комбинированного лечения, вероятно, была связана с ингибированием комбинированного пути.

Рис. 9: Комбинированное лечение паксалисибом и мирдаметинибом значительно увеличивает выживаемость мышей, несущих SJ-DIPGX37.

Мыши были рандомизированы через 50 дней после имплантации в четыре лечебные группы (по 6 мышей в каждой руке) и получали носитель (черный), паксалисиб (8 мг / кг) (красный), мирдаметиниб (14 мг / кг) (синий) или паксалисиб + мирдаметиниб ежедневно (зеленый), 5 дней ВКЛЮЧЕНО и 2/3 дня ВЫКЛЮЧЕНО. Паксалисиб + мирдаметиниб vs.транспортное средство, р = 0,0056; мирдаметиниб по сравнению с носителем, p = 0,16; паксалисиб в сравнении с носителем, p = 0,48 (логранговый тест Мантела – Кокса). Стрелка показывает момент времени для рандомизации и начала лечения. Анализ выживаемости Каплана – Мейера.

Улетел, но вернулся: тест-драйв DW Hower h4

FineAuto

Автомобилей из Китая существует такой мощный пул поклонников, как некоторые, возможно, даже не самые популярные марки. Вот и Hover вряд ли может похвастаться тем, что армия энтузиастов считает его лучшим внедорожником на планете и готова отстаивать это мнение в любой форумной битве. За плечами внедорожника Great Wall не десятилетия славной истории, ставший легендой. Но когда в 2015 году выяснилось, что компания «ИРИТО» прекращает сборку пикапов и внедорожников на Great Wall и на «Гжельском заводе Электроизолятор», а также на новом объекте в поселке Красное Липецкой области, многие причины были для разочарования. Потому что за годы присутствия на рынке Great Wall Hover зарекомендовали себя как прочные и неприхотливые автомобили, идеально отвечающие условиям существования в тогдашней провинции и сочетающие в себе разумный уровень комфорта с достойными внедорожными качествами и финансовой доступностью.

  • «За 18 лет имею опыт эксплуатации 8 машин, все иномарки, и б / у и новые, последней тройки сборки. Hover h4 произвел наихудшее впечатление ».
  • «Отличная машина за свои деньги, работает и работает!»
  • «Их машина стоит денег, отличная машина для условий Хакасии. Если вы не проезжаете больше 120, все в порядке. Зять «Патриот» новый сел-трактор ».
  • «Ужасная машина, еле избавился в недоумении».
  • «Достойный агрегат на раме за приличные деньги! Автомобиль для тех, кому не нужно спешить и с кем и куда ехать. Вместимость, обзор, трафик, стоимость обслуживания, комфорт водителя и пассажиров ».
  • «Довольно комфортная машина. Брал путешествовать. Он проехал весь от Крыма до Красноярска, ни разу не провалился! »
  • «До этого 2 года катался на УАЗ Патриот, поменял и не жалею. Ховер выглядит намного эффективнее и безопаснее, хотя и дороже ».

Эта цитата бесконечна, и хотя все эти слова относятся к Great Wall Hover, DW Hower — это та же машина, и писать о ней будет то же самое. Кому-то ему придется «последовать его примеру», и его ожидания наверняка будут обмануты. Но это не важно. Имеет значение, если Hower в текущих финансовых условиях будет играть роль «цена нового автомобиля». Из-за суммы от 1 до 1,2 миллиона рублей можно найти довольно живые и не слишком убогие экземпляры Suzuki Grand Vitara и Mitsubishi Pajero Sport 2012-2014 года, не говоря уже о Mitsubishi L200 и Toyota Hilux. Но такие решения должны быть собственными, основанными на их представлениях о жизни и о том, «что хорошо, а что плохо». Потому что он в столицах, этот внедорожник купят на охоту, рыбалку и путешествия, и то только потому, что я не могу позволить себе покупать «японца». Но для жителей Мезени, Карпогор или Верхней Тоймы новый солидный на вид внедорожник, даже китайский и собранный в Ставропольском крае, — настоящий символ престижа и финансового успеха.

сейчас хаваль, кузов старый и только бензин

Производство известных россиян внедорожников налажено на заводе в Тульской области.По предварительным данным, продажи начнутся весной.

О том, что Great Wall Hover H5 может вернуться на наш рынок, Kolesa.ru сообщал еще в октябре 2019 года. Теперь в базе Росстандарта появилось утверждение типа транспортного средства (ФНС) на внедорожник: модель будет продаваться под брендом HAVAL (принадлежит Great Wall), а завод «Хавале Мотор Мануэкчуринг Рус» указан как производственная площадка, расположенная в Тульской области (также выпускает Haval F7 / F7X и флагманский вездеход H9. ).

Напомним, в Китае Great Wall Hover появился в 2005 году, интервалом для него стал внедорожник ISUZU Axiom. Позже «Just» Hover превратился в Hover h4, за ним последовал Hover H5 с другим украшением передней части и салона. В России Hover тоже дебютировал лет пятнадцать назад, впоследствии у нас появилась и «Тройка», и «пятерка». До 2015 года дистрибьютором Great Wall в РФ была компания Irito (она же проводила сборку), но затем китайская и российская фирма прекратили сотрудничество. В 2017 году было объявлено о возвращении в Россию h4 и H5, уже под брендом DW HOWER, сборка автомобилей освоена на заводе Ставрополь-Авто (на уровне учредителя была связь с компанией «Дервей») . Однако этот проект просуществовал недолго — к концу 2018 года получилось. И вот третья попытка.

Haval H5 для России

Кстати, H5 до сих пор доступен в Поднебесной, также под брендом HAVAL. Но вот что любопытно: если DW HOWER H5 был актуальной версией модели, которая продается в Китае, то теперь российский Haval H5 — это дореформенный внедорожник с «нуля». Снимки нынешней «пятерки», предназначенной для Российской Федерации, опубликованы на сайте Haval-Clubs.

По данным ФНС, длина возвращенного H5 составляет 4650 мм, что на 5 мм больше, чем у представленной сегодня модели в КНР. Высота — 1745 мм против 1775 мм у китайской версии. Ширина и колесная база у машин совпадают — 1800 и 2700 мм соответственно. Передняя подвеска — независимая торсионная, задняя — зависимая рессорная.

Haval H5 для России

В России ни дизеля (в Китае это двухлитровый GW4D20D с отдачей 150 л.с.), ни базовой заднеприводной версии не будет.Для нашего Haval H5 установлен бензиновый «турбонаддув» Mitsubishi 2. 0 (Заводской индекс 4G63S4T) мощностью 150 или 177 л.с. (Максимальный крутящий момент у обеих версий — 250 Нм), работающий в паре с «шестиступенчатой». механика ». Мотор «питает» топливо АИ-92. Привод подключен только полный.

В списке оборудования российского H5: «кожаный» салон, система экстренного оповещения Эра-Глонасс, пара подушек безопасности, кондиционер, парктроник, мультимедийная система, камеры спереди и сзади, датчики дождя и света, круиз-контроль. .

Актуальный Haval H5 для Китая, а российский DW HOWER H5 выглядел как

Фактический Haval H5 для Китая, а российский DW HOWER H5 выглядел как

Фактический Haval H5 для Китая, а российский DW HOWER H5 выглядел как

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *