Мерсы: «Мерседес-Бенц» — Новые Автомобили — Автомастерская "DIAG38" в Иркутске

Содержание

от E55 до G-Class в броне — Kolesa.kz || Почитать

Из 133 с лишним тысяч объявлений на Kolesa.kz около 11.3 тысячи приходится на автомобили Mercedes-Benz. Немалое число! Среди них как привычные глазу ешки и G-Class, так и весьма необычные модификации, которые на казахстанских дорогах встречаются крайне редко. Собрали пять интересных вариантов.

Mercedes-Benz CL 600 2007 года выпуска

Литерами CL в линейке немецкой марки до 2013 года обозначались купе S-Class.Этот автомобиль третьего поколения с топовым V12 под капотом был выпущен в 2007-м и далеко не так прост, как кажется на первый взгляд. Дело в том, что над ним поработали спецы из Brabus. В CL появились моноблоки, заменившие стандартные колёса, фирменная выхлопная система и ряд украшений в салоне. Объём 5.5-литрового агрегата увеличили до 6.3 литра, а отдачу — с 517 до 730 сил. Крутящий момент возрос с 830 до 1100 Нм. Естественно, под большую мощность доработали и тормозную систему.

Владелец купе уверяет, что это единственный экземпляр на постсоветском пространстве.

Эксплуатируется CL редко. На его одометре всего 12 тысяч километров. Цена составляет 45 млн тенге.

Mercedes-Benz G 500 2002 года выпуска

За этот 19-летнийG-Class просят 39 млн тенге, что заметно превышает среднюю стоимость немолодых G500 (11.3 млн тенге). Обычно за подобные деньги на рынке предлагают машины 2013 или 2014 года выпуска. Высокую цену данного экземпляра можно объяснить двумя факторами. Во-первых, пробег гелика всего 52 тысячи километров, а во-вторых, он далеко не простой. Перед нами бронированная версия, соответствующая спецификации B6. То есть ей не страшен обстрел из автоматических и снайперских винтовок калибра 7.62 мм.

Помимо брони и пуленепробиваемых стёкол подобные гелики отличаются подвеской и тормозной системой, доработанными под больший вес внедорожника.

Mercedes-Benz SL 55 AMG 2003 года выпуска

Купе SL с индексом R230 выпускалось с 2001 по 2011 год. Перед нами SL 55 AMG 2003 года выпуска, выглядит который совсем не так, как должна стандартная двухдверка.

Дело в том, что владелец установил на неё обвес от более мощного и агрессивного SL 65 AMG Black Series, который появился после второго рестайлинга модели. Вместе с кузовными панелями под замену пошла и четырёхглазая оптика SL. Бонусом добавлены 19-дюймовые диски Vossen и жёлтый цвет из линейки AMG GT-R. Салон был перешит кожей Nappa, а оригинальный руль уступил место баранке от Black Series.

Автор объявления отмечает, что процесс подбора деталей и сборки авто занял два года. Выручить за доработанный SL 55 AMG с 5.4-литровым500-сильным V8 (700 Нм) под капотом планируют 14 млн тенге.

Mercedes-Benz E 55 AMG 2004 года выпуска

За 12.7 млн тенге в Атырау предлагают приобрести E55 AMG третьего поколения, но не седан, коих в продаже есть больше десятка, а универсал. Таких на рынке лишь два. И этот может похвастаться не только более высокой ценой, но и пробегом менее 100 тысяч километров за 17 лет.

Владелец не особо распространяется об истории, но отмечает, что машина хранится в тёплом гараже, показания одометра корректны, а её состояние надо видеть. Отметим, на фото E55 AMG действительно смотрится отменно.

Под капотом E55 установлен 5.4-литровый V8 M113K c приводным компрессором, который выдаёт 476 сил. Все 700 Нм крутящего момента передаются на задние колёса через 5-ступенчатую автоматическую коробку.

Mercedes-Benz S 500 2002 года выпуска

Замыкает пятёрку ещё один броневик, но на этот раз речь идёт о седане S-Class в 220-м кузове с индексом S500 на крышке багажника. В отличие от гелика W220 имеет ещё меньший пробег (48 620 км) и защищён по классу B7. То есть автомобилю не страшен огонь не только из автоматических винтовок калибра 7.62, но и снайперских с бронебойными патронами (7.62×51).

Автор объявления отмечает, что машина также снабжена специальными бронированными покрышками Michelin и системой защиты от химических атак. Стоит седан с 5-литровым306-сильным V8 7.5 млн тенге, что практически вдвое больше средней цены обычных S500 2002 года выпуска.

Ла Мерсе — главный праздник Барселоны

Традиционно в последних числах сентября в каталонских городах празднуются дни святых покровителей. Эти праздники стали когда-то прямым продолжением старинных проводов лета. Патронессой Барселоны является Богоматерь Милосердия — Virgen de la Mercè, которой и посвящается полный интересных, ярких и познавательных событий фестиваль Ла Мерсе.

Согласно легенде, в конце 17 века Мерсе спасла Барселону от нашествия саранчи, и благодарные жители города решили избрать ее своей защитницей и покровительницей. До этого покровительницей Барселоны несколько веков считалась Святая великомученица Евлалия, поэтому сентябрьские дожди барселонцы считают слезами Евлалии, которая плачет от обиды на неверных горожан.

Фестиваль Ла Мерсе длится больше недели, кульминация наступает с 21 по 24 сентября. В эти дни вы непременно увидите все традиционные атрибуты каталонских праздников: шествия и танцы гигантов, башни из людей, огненные бега, танец сардану. На улицах города будет организовано множество концертов и театральных представлений. Кроме того, в программу включены всевозможные развлечения – например, лазерное шоу на фасаде здания мэрии и праздничные фейерверки. Не забудьте попробовать коку — специальный пирог, изготовляемый к каждому городскому празднику, его можно будет купить в любой кондитерской.

Основные события проходят в Готическом квартале, в Парке Цитадели (Parc de la Ciutadella) и в крепости Монтжуик

, а завершающее пиротехническое шоу — на площади Испании.

В этом году фестиваль Ла Мерсе будет проходить с 21 по 24 сентября. В эти дни все наши экскурсии по Барселоне могут включать в себя посещение тех или иных праздничных мероприятий.

Информация о фестивале Ла Мерсе 2018 на сайте мэрии Барселоны: https://www.barcelona.cat/lamerce/en

Фотографии праздника Ла Мерсе:

© BarcelonaSecret.com – ваш гид в Барселоне и Каталонии

Поделиться ссылкой:

Поиск дешёвых авиабилетов в Мерсу-Матрух

Уважаемые пассажиры, бронируйте авиабилеты по низкой стоимости на рейсы в Мерсу-Матрух. Укажите в форме бронирования пункт вылета и прилёта, количество пассажиров, а также планируемые даты. Система подберёт варианты перелёта различных авиакомпаний в Мерсу-Матрух. Удобная форма подбора дешевых авиабилетов дает возможность оперативно построить маршрут и купить билет на самолет. Мы предлагаем дешевые авиабилеты на прямые рейсы в Мерсу-Матрух а также удобные стыковки, сравнивая возможные варианты.

Общие данные о городе Мерса-Матрух

Город Мерса-Матрух расположен в Египта, регион Матрух. Международное название Мерсы-Матруха — Mersa Matruh. Население Мерсы-Матруха по статистическим данным, составляет примерно 62 042 человек. Географическое расположение Мерсы-Матруха: широта 31.35, долгота 27.24. Часовой пояс Africa/Cairo. Местное время: +2 GMT.

Код IATA (индивидуальный идентификатор)

Код IATA Мерсы-Матруха — MUH Воспользуйтесь трехбуквенным кодом IATA MUH при покупке недорогих авиабилетов на сайте Aerotur.

aero в форме поиска, система автоматически выдаст название города Мерса-Матрух в поисковой строке. Если Вы не нашли подходящие прямые рейсы или стыковочные рейсы в Мерсу-Матрух на сайте Aerotur.aero, поменяйте дату вылета при бронировании дешевых билетов или рассмотрите варианты вылетов из других ближайших аэропортов Египта.

Город Мерса-Матрух обслуживается 1 аэропортом

Важная информация при покупке авиабилетов в Мерсу-Матрух

При покупке авиабилетов на сайте Aerotur.aero мы гарантируем безопасность хранения Ваших личных данных. По условиям авиакомпаний, внесение изменений в ранее выписанные проездные документы, оплачивается отдельно. Внимательно проверяйте правильность внесения паспортных данных, бронируя авиабилеты в Египет. В случае необходимости внесения таких изменений, обратитесь в тех. поддержку сайта Aerotur.aero, написав на почту, [email protected], или задавайте вопросы в онлайн чатах Telegram и Whats App.

«Мерсы» снова попали под отзыв в России | Авто & Мото

Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт) объявило об отзыве 1 тыс. 697 автомобилей Mercedes-Benz Sprinter (тип: 907).

В ведомстве уточнили, что сервисная кампания затрагивает машины, реализованные в период с июня 2018 года по февраль 2020 года.

Как пояснили в Росстандарте, причиной отзыва стали «тормозные шланги, которые могут соприкасаться с задней частью переднего подкрылка». «Это может вызвать потертости вплоть до сквозного протирания тормозных шлангов во время движения, что может привести к вытеканию тормозной жидкости. Если водитель не обратит внимания на соответствующий предупреждающий индикатор об уровне тормозной жидкости, то тормозной путь может увеличиться вследствие прогрессирующей потери тормозной жидкости, что может привести к повышенной опасности возникновения аварии», — предупредили в ведомстве.

Напомним также, что в начале августа Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии объявило о начале публичного обсуждения первого в стране стандарта по отзыву автомобилей.

Первая редакция проекта документа предполагает введение трех видов отзывов автомобиля в случае отзывных кампаний. В частности, добровольный отзыв инициирует изготовитель (поставщик или продавец) при получении информации о риске продукции, не превышающем допустимый уровень, он же полностью контролирует корректирующие мероприятия и предоставляет соответствующую информацию в орган надзора.

При этом оповещать автовладельцев об отзывной кампании рекомендуется всеми доступными способами. Кроме того, предлагается разрешить получать информацию о владельцах машин из систем государственной регистрации транспортных средств, технического осмотра и базы ОСАГО.

Еще в начале января стало известно, что Росстандарт собирается в этом году разработать и утвердить специальный ГОСТ по процедуре отзыва машин. Как указывали тогда в пресс-службе ведомства, «развитие системы отзывов продукции является важным механизмом в повышении конструктивной безопасности выпускаемых на российский рынок автомобилей».

В Росстандарте отмечали, что 1 ноября 2019 года появился интерактивный поиск, позволяющий по VIN-номеру транспортного средства определить, подпадает ли оно под отзыв. При этом, «помимо развития упомянутого сервиса интерактивного поиска, в этом году в ведомстве планируется утвердить специальный ГОСТ по критериям и механизмам отзыва автомобилей».

В агентстве также уточнили, что в минувшем году был согласован отзыв 649,6 тыс. транспортных средств всех сегментов в рамках 139 программ отзыва. Всего же с 2015 года, когда Росстандарт начал активно развивать механизмы отзыва автомобилей, под отзыв попали более 3,5 млн единиц транспортных средств.

Ulukmanapo – Мерсы x Бэшки (Mercedes and BMW) Lyrics

Мерсы x Бэшки (Mercedes and BMW) Lyrics

[Текст песни «Мерсы x Бэшки»]

[Интро]
Skkrt
Семдесят Пятый

[Припев]
Мои братья на мерсах, мои братья на бэшках
Мы здесь на своей волне, мы здесь на своей волне
Мои братья на мерсах, мои братья на бэшках
Мы здесь на своей волне, мы здесь на своей волне
Окей мерседесы и бэшки skkrt
Мерседесы и бэшки skkrt (x7)

[1-Куплет]
Окей рассекаю по трассе воу
Моя тачка прекрасна воу
Я вылетаю по встречке
Похуй то что опасно
Пару хапок на старте
Со мной пару сучек на связи
Колесим не спеша дальше
Прожигаем чёрную кассу
Этот бит на вкус как стейк
Задницы делают shake
Крутятся диски на мерсе
С колонок тот же bounce back
Этот бит на вкус как стейк
Задницы делают shake
Крутятся диски на бэшке
С колонок тот же bounce back

[2-куплет]
В новых кроссах в новых обвесах
Я и мои люди сияют
Сплетники за спиной обсуждают
Они наблюдают как мы исполняем
Мы лишь угораем над ними
Лишь угораем над ними
Нас девушки любят враги ненавидят
Девушки любят враги ненавидят
Делаю больше движа меньше слов
Больше денег на мой счёт
Я готов на все сто
Полный газ педаль в пол
Педаль в пол мы на немцах
Развиваем скорость до предела
С нами чиксы на кэблах
С нами чиксы на кэблах

Мерс

Mercs , называемый в Японии

Senjou no Ookami II (戦場の狼II), представляет собой аркадную стрелялку с видом сверху, разработанную Capcom, которая была перенесена на различные домашние консоли.

и компьютеры, включая Sega Mega Drive и Sega Master System. Это продолжение аркадной игры Commando ( Senjou no Ookami в Японии), за которой в 2008 году последовала игра Wolf of the Battlefield: Commando 3 .

Версия игры для Mega Drive была выпущена как часть службы виртуальной консоли Wii с официальным названием Wolf of the Battlefield: MERCS , чтобы правильно связать с Commando 3 .

Версия Mega Drive Mercs была запрещена к продаже в Германии ^[16] .

Геймплей

и стреляй. стреляет бомбой (есть в ограниченном количестве).

Версии

Локализованные имена

Также известен как
Язык	Локализованное имя	английский перевод
Английский	Мерс	Мерс
Английский (США)	Мерс	Мерс
Японский	戦場の狼II	Сендзё но Оками II

Производственные кредиты

Версия для мегадрайва

Планировщик: Кямура
Дизайнеры: LC, Rew, Majikko, Majimaji
Программисты: Mt Book, Proto 2, Markun
Аранжировщик звука: Milpo
Производитель: Осси
Особая благодарность: Марусан, Му, Така О, Топор, Закат, Отаку, Цуч, Томо
Представлено: Sega

Журнальные статьи

Основная статья: Mercs/Журнальные статьи.

Рекламный материал

Печатная реклама JP

Распечатать объявление в Beep! MegaDrive (JP) № 1991-09: «Сентябрь 1991» (1991-08-08)

Физическое сканирование

Версия для мегадрайва

{{{{{icon}}}\|L}}	Деление на ноль.
На основе 0 отзыв

Мега Драйв, JP
Крышка

Мега Драйв, США

Крышка

Тележка

Руководство

Мега Драйв, ЕС
Крышка

Мега Драйв, PT
Крышка

Мега Драйв, АС
Крышка

Мега Драйв, BR

Крышка

Тележка

Руководство

Мега Драйв, CA
Крышка

Версия основной системы

{{{{{icon}}}\|L}}	Деление на ноль.
На основе 0 отзыв

Основная система, ЕС

Крышка

Тележка

Руководство

Основная система, AU
Крышка
Тележка

Основная система, BR

Крышка

Тележка

Руководство

Техническая информация

Состояние дампа ПЗУ

Система

Хэш

Размер

Дата сборки

Источник

Комментарии

✔

CRC32	16113а72
МД5	4643f5da530463356ce56fae5c346ddc
ША-1	аб633 7325190ef13bd10f3ef5b06d3a9e28

1 МБ

1991-08

Картридж

CRC32	д7416б83
МД5	7d5696c3da0dbed04b35543f7bdbef40
ША-1	f2cfad96a116bde9aeb1ad520dc448fa20f

512кБ

Картридж (ЕС)

Внешние ссылки

Страницы виртуальной консоли Sega of Japan: Mega Drive
Страницы каталога Nintendo: США, Великобритания, Австралия

Каталожные номера

↑ Файл: Mercs MD JP Box. jpg
↑ ^2.0 ^2.1 https://sega.jp/history/hard/megadrive/software.html (Wayback Machine: 20.07.2020, 09:51)
↑ Файл:Mercs SMS EU Box.jpg
↑ Звуковой сигнал! MegaDrive , «Сентябрь 1991 г.» (JP; 1991-08-08), стр. 7
↑ ^5.0 ^5.1 Видеоигры и компьютерные развлечения , «Декабрь 1991» (США; 1991-1x-xx), стр. 75
↑ ^6.0 ^6.1 MegaTech , «Июнь 1993» (Великобритания; 1993-05-20), стр. 92
↑ ^7.0 ^7.1 Компьютерные и видеоигры , «Декабрь 1991» (Великобритания; 15 ноября 1991 г.), стр. 18
↑ Суперигра , «Fevereiro 1992» (BR; 1992-02-xx), стр. 30
↑ ^9.0 ^9.1 ^9.2 Sega Power , «Февраль 1992» (Великобритания; 1992-01-02), стр. 12
↑ https://www.nintendo.co.jp/wii/vc/software/08.html (Wayback Machine: 06.03.2018, 23:35)
↑ http://vc. sega.jp:80/vc_senjo2 (Wayback Machine: 03 февраля 2009 г., 13:09)
↑ ^12.0 ^12.1 http://www.nintendolife.com/games/megadrive/wolf_of_the_battlefield_mercs (Wayback Machine: 09.06.2017, 03:24)
↑ https://www.nintendo.co.uk/Games/Virtual-Console-Wii-/Wolf-of-the-Battlefield-MERCS-280141.html (archive.today)
↑ ^14.0 ^14.1 http://www.nintendo.com/games/detail/xEzg9EmKxrvklt3OVu_Wit0IrKxzncQc (Wayback Machine: 22.11.2010, 22:50)
↑ http://www.nintendo.com.au/index.php?action=catalogue&prodcat_id=41&prod_id=19788&pageID=4 (Wayback Machine: 03 апреля 2012 г., 02:48)
↑ Файл:MD UK Box Back SonicEASDH Alt.jpg
↑ 1700 игр для Sega , «» (RU; 2003-xx-xx), стр. 128
↑ ACE , «Январь 1992 г.» (Великобритания; 1991-12-08), стр. 104
↑ Звуковой сигнал! MegaDrive , «Октябрь 1991» (JP; 1991-09-07), стр. 37
↑ Консоли + , «Ноябрь 1991 г. » (FR; 1991-11-07), стр. 56
↑ Консоль XS , «Июнь/июль 1992 г.» (Великобритания; 1992-04-23), стр. 132
↑ Cool Gamer , «9» (RU; 13 октября 2002 г.), стр. 31
↑ Компьютер + видео Giochi , «Gennaio 1992» (IT; 199x-xx-xx), стр. 82
↑ Mean Machines: The Essential Sega Guide , «» (Великобритания; 18 ноября 1993 г.), стр. 69
↑ Famitsu , «1991-10-04» (JP; 1991-09-20), стр. 39
↑ GamePro , «Ноябрь 1991» (США; 1991-xx-xx), стр. 54
↑ Games-X , «31 октября — 6 ноября 1991 г.» (Великобритания; 1991-10-31), стр. 32
↑ Game Informer , «Ноябрь/декабрь 1991» (США; 1991-xx-xx), стр. 33
↑ Game Zone , «Декабрь 1991» (Великобритания; 1991-11-22), стр. 35
↑ Hippon Super , «Октябрь 1991» (JP; 1991-09-04), стр. 90
↑ ^31.0 ^31.1 Hobby Consolas , «Февраль 1992» (ES; 1992-0x-xx), стр. 48
↑ Joypad , «Ноябрь 1991» (фр.; 1991-10-1x), стр. 54
↑ Джойстик , «Ноябрь 1991 г.» (фр.; 1991-1x-xx), стр. 142
↑ Sega Mega Drive Advanced Gaming , «Январь 1993» (Великобритания; 199x-xx-xx), стр. 93
↑ Вентилятор Mega Drive , «Декабрь 1991» (JP; 1991-11-08), стр. 91
↑ Mega , «Июнь 1993» (Великобритания; 1993-05-20), стр. 21
↑ Mega Force , «Ноябрь 1991» (фр.; 19 ноября 1991 г.), стр. 88.
↑ MegaTech , «Рождество 1991» (Великобритания; 06 декабря 1991), стр. 40
↑ Micromanía (segunda época) , «Февраль 1992» (ES; 1992-0x-xx), стр. 26
↑ Mean Machines , «Декабрь 1991» (Великобритания; 1991-11-28), стр. 78
↑ Mean Machines Sega , «Октябрь 1992» (Великобритания; 1992-09-xx), стр. 139
↑ Player One , «Феврье 1992» (фр.; 1992-xx-xx), стр. 87
↑ Play Time , «2/92» (Германия; 08 января 1992 г. ), стр. 94
↑ Power Play , «1/92» (Германия; 11 декабря 1991 г.), стр. 175
↑ Score , «Květen 1994» (Чехия; 1 мая 1994 г.), стр. 56
↑ Sega Power , «Январь 1992 г.» (Великобритания; 1991-12-05), стр. 39
↑ Sega Pro , «Декабрь 1991» (Великобритания; 1991-11-21), стр. 38
↑ Sega Pro , «Апрель 1993» (Великобритания; 11 марта 1993 г.), стр. 66.
↑ Sega Force , «Январь 1992 г.» (Великобритания; 12 декабря 1991 г.), стр. 76.
↑ Обзор Sega Mega Drive , «1» (RU; 03 апреля 1995 г.), стр. 94
↑ Sega Saturn Magazine , «Сентябрь 1995» (JP; 08.08.1995), стр. 85
↑ Совершенно секретно , «Luty 1995» (PL; 1995-xx-xx), стр. 57
↑ Трюки 16 бит , «Трюки Sega Gold 800 игр» (RU; 1998-xx-xx), стр. 113
↑ Видеоигры , «4/91» (Германия; 1991-12-06), стр. 25
↑ Консоль XS , «Июнь/июль 1992 г. » (Великобритания; 1992-04-23), стр. 142
↑ Mean Machines: The Essential Sega Guide , «» (Великобритания; 18 ноября 1993 г.), стр. 144
↑ Games-X , «28 ноября — 4 декабря 1991 г.» (Великобритания; 1991-11-28), стр. 28
↑ Joypad , «Янвье 1992» (FR; 1991-12-1x), стр. 58
↑ Джойстик , «Janvier 1992» (FR; 199x-xx-xx), стр. 154
↑ Mega Force , «Ноябрь 1991» (фр.; 19 ноября 1991 г.), стр. 89.
↑ Micromanía (segunda época) , «Marzo 1992» (ES; 1992-0x-xx), стр. 36
↑ Mean Machines , «Январь 1992 г.» (Великобритания; 1991-12-27), стр. 64.
↑ Mean Machines Sega , «Октябрь 1992» (Великобритания; 1992-09-xx), стр. 135
↑ Player One , «Декабрь 1991» (фр.; 1991-xx-xx), стр. 91
↑ Sega Power , «март 1992 г.» (Великобритания; 06 февраля 1992 г.), стр. 45.
↑ Sega Pro , «Рождество 1991» (Великобритания; 12 декабря 1991), стр. 58
↑ Sega Pro , «Апрель 1993» (Великобритания; 11 марта 1993 г.), стр. 71

границ | MERC.Новый помощник нейротрансмиссии?

Введение

Синаптическая передача — это сложный процесс коммуникации между нейронами и клетками-мишенями (Meriney and Fanselow, 2019). Многие мембранные структуры и органеллы участвуют в синаптической передаче, включая синаптическую плазматическую мембрану и рецепторы, синаптические везикулы, структуры синаптических шипов, митохондрии, эндоплазматический ретикулум (ЭР) и аутофагосомы (Vos et al., 2010; Liang, 2019). В последнее десятилетие стало очевидным, что благодаря своей типичной вытянутой структуре митохондрии и ЭР могут образовывать контакты с другими органеллами, модулируя тем самым широкий спектр внутриклеточных процессов (Bravo-Sagua et al., 2014). Исследования демонстрируют существование физической и функциональной связи между ЭР и митохондриями через соединения, называемые митохондриально-эндоплазматическими контактами (MERC), или, в случае изолированной части этих контактов, митохондриально-ассоциированными мембранами (MAM) (Giorgi et al. , 2015). МАМ являются продуктом биохимического обогащения связанных друг с другом мембран митохондрий и ЭР и включают множество белков и липидов, формирующих MERC (Janikiewicz et al., 2018). Как и в ненейрональных клетках, MERC были охарактеризованы в клетках центральной нервной системы, в основном в нейронах (Gómez-Suaga et al., 2019), в то время как по астроцитам (Goebel et al., 2019) данных мало, и имеются лишь косвенные доказательства наличия MERC в микроглии (Xie et al., 2017) и олигодендроцитах (Simpson et al. , 1997). В связи с их распределением и выполняемыми функциями возникает вопрос, могут ли MERC играть существенную роль в синаптической передаче и служить важным звеном, связывающим механизмы в патогенезе нейродегенеративных заболеваний, выступая, таким образом, в качестве перспективной терапевтической мишени.Тем не менее, среди всех мембранных структур, потенциально участвующих в обеспечении нейротрансмиссии, комплекс MERC остается наименее изученным.

Следовательно, целью этого обзора является определение возможной роли MERC в поддержке активной нейротрансмиссии в нормальных условиях и описание того, как измененная функция MERC может способствовать развитию нарушения нейротрансмиссии при нейродегенеративных заболеваниях. Вопрос, вынесенный на обсуждение, заключается в том, можно ли считать MERC важным помощником нейротрансмиссии.

Структура и функции MERC в нейрональных клетках

Структура

Несмотря на то, что показано, что MERCs присутствуют во многих частях нейрона (Lee et al., 2018), точные характеристики этих контактных участков остаются предметом обсуждения.

В общем, MERCs включают набор химических связей, многие из которых находятся как в ER, так и в митохондриях. Другие белки локализуются на мембране только одной органеллы, но все же концентрируются именно в месте контакта.Огромное разнообразие белков (>1000), обнаруженное при фракционировании (Poston et al., 2013) МАМ, можно объяснить несовершенством техники, которая не позволяет выделить белки только в области взаимодействия. Однако считается, что основным связующим звеном MERCs является тройной комплекс, транспортирующий ионы кальция (Ca ²⁺ ) и состоящий из рецептора инозитол-1,4,5-трифосфата (IP3R) на мембране ЭР. подробнее о структуре канала см. (Серышева, 2014), потенциалзависимый анионный канал 1 (VDAC1) на внешней мембране митохондрий и соединительный цитозольный шаперон глюкозорегулируемого белка 75 (GRP75; член теплового шока). семейство белков, 70 кДа) (Honrath et al., 2017). Среди других функциональных белковых комплексов MERC выделяют гомо- и гетеродимеры митофузина (Mfn1-Mfn2) (функция: модуляция митохондриальной подвижности, ауто- и митофагия) (de Brito, Scorrano, 2008; Filadi et al., 2015), комплекс ER белок VAPB (ассоциированный с везикулами белок, ассоциированный с мембраной B/C) и митохондриальный PTPIP51 (протеин 51, взаимодействующий с тирозинфосфатазой) [функция: молекулярный каркас между ЭР и митохондриями, связанный с Ca ²⁺ -обменом (Liu and Zhu, 2017; Paillusson et al., 2017), аутофагия (Gomez-Suaga et al., 2017)], комплекс шаперонного белка ER BAP31 (белок 31, ассоциированный с рецептором B-клеток) и белка деления митохондрий FIS1 (Fission 1) (функция: передача апоптотических сигналов от митохондрий до ЭР) также выделяют среди функциональных комплексов MERC (Iwasawa et al. , 2011; Krols et al., 2016), а также многих других белков (Raturi, Simmen, 2013).

Ширина расщелины является одной из ключевых характеристик, позволяющих оценить статус и функциональную роль MERC.Согласно гипотезе, MERC с шириной щели 10 нм осуществляют перенос липидов между органеллами, ширина щели ≈20 нм меняет свою функцию на обмен Са ²⁺. Тем не менее, есть и «неактивные» MERC, готовые к активации, как только две мембраны окажутся достаточно близко друг к другу. Точно так же MERC с расщелиной 30 нм могут быть либо Ca ²⁺ -MERC, либо неактивными фагоцитарными MERC. Таким образом, динамика контактной структуры будет играть ключевую роль в регуляции активности MERC, несмотря на сложное распределение различных типов контактов митохондрий-ER.В настоящее время еще не ясно, существует ли единый механизм, регулирующий динамику всех контактов митохондрий с ЭР, или же MERC изначально имеют различную организацию (Giacomello, Pellegrini, 2016).

Еще одной важной структурной характеристикой MERC является их длина. Несмотря на то, что протеом МАМ довольно консервативен в разных типах клеток (Wang X. et al., 2018), длина контактов митохондрии-ER может различаться в зависимости от конкретного типа клеток (Giacomello, Pellegrini, 2016).Например, в культурах клеток фибробластов мыши 2,25 % митохондриальной мембраны находится в тесном контакте (<20 нм) с ЭР (Cosson et al., 2012), в клетках HeLa – 5–20 % (Rizzuto et al., 1998), около 7% в культурах нейронов (Martino Adami et al., 2019) и около 10% в клетках лимфомы (Csordás et al., 2006). Исследователи наблюдали, как ЭР полностью покрывает митохондрию вокруг области ее деления (Friedman et al., 2011). Хотя молекулярные пути, участвующие в изменении длины MERC, еще не выяснены, это свойство MERC меняется при патологических состояниях (Leal et al., 2016). Например, в условиях экспрессии мутантного α-синуклеина уменьшение длины MERC приводит к нарушению гомеостаза Ca ²⁺ (Paillusson et al., 2017). Увеличение контактной поверхности может привести к значительным метаболическим изменениям (Bray, 2018). Было показано, что такое увеличение повышает содержание митохондриального Ca ²⁺ и продукцию АТФ, способствуя восстановлению поврежденных аксонов (Lee et al., 2019).

Функции

Во время активной синаптической передачи крайне важно снабжать синапс достаточно высоким уровнем энергии (Harris et al., 2012), поддерживают локальный баланс Ca ²⁺ и обеспечивают синтез липидов для обеспечения текучести мембран, обновления и модификации синаптических структур, таких как везикулы, каналы и дендритные шипики (Rodríguez-Berdini and Caputto, 2019). ). Поскольку к основным функциям MERC относятся влияние на подвижность и морфологию митохондрий (Tagaya, Arasaki, 2017; Giacomello et al., 2020), обмен кальция (Marchi et al., 2017; Müller et al., 2018; Cherubini et al., al., 2020) и липидов (Vance, 2014; Hanada, 2017) между органеллами, участие в процессах аутофагии (Hamasaki et al., 2013; Гарофало и др., 2016; Tagaya, Arasaki, 2017) и апоптоз (Liu et al., 2014; Perkins, Ellisman, 2016; рис. 1), эти внутриклеточные контакты, локализованные в нейронах и астроцитах, оказываются незаменимым помощником нейротрансмиссии.

Рис. 1. Основные биохимические связи MERC (контакты митохондрия–эндоплазматический ретикулум), их функции. ER-IP3R взаимодействует с митохондриальным каналом VDAC1 вместе с шапероном GRP75, основная функция — транспорт кальция.ER-VAPB взаимодействует с митохондриальным PTPIP51, образуя молекулярный каркас между ER и митохондриями, связанный с Ca ²⁺ -обменом. ER-резидентный белок BAP31 взаимодействует с митохондриальным белком FIS1. Вместе с PACS-2 этот комплекс регулирует инициацию апоптоза. Митофузиновые мостики (образованные Mfn1 и Mfn2) могут быть гомодимерами и гетеродимерами, меняющими митохондриальную динамику: подвижность, слияние и деление.

Митохондриальное деление и подвижность

Митохондриальный транспорт и распределение особенно важны для нейронов.Их специфическая структура с вытянутыми аксонами и дендритами требует больших затрат энергии на значительных расстояниях от тела клетки, в частности, в синапсах (Palikaras, Tavernarakis, 2020). Для выполнения нейронами таких функций, как интеграция и передача сигналов, необходимо наличие достаточного количества функционально активных митохондрий (Sheng, 2017).

Благодаря наличию митофузинов (Mfn1, Mfn2) (Bernard-Marissal et al., 2015) MERC участвуют в таких физиологических процессах, как митохондриальное деление и подвижность внутри клетки, ауто- и митофагия.Однако точный механизм влияния митофузинов на функционирование и структуру MERC остается не до конца понятым (Filadi et al., 2015) и ставится под сомнение многими авторами (Cosson et al., 2012; Filadi et al., 2015). ; Ван и др., 2015). Нокдаун Mfn-2 увеличивает длину контактов ER-митохондрий, не влияя на их количество (Leal et al., 2016). Недавно была обнаружена прямая корреляция между формой митохондрий и количеством/длиной MERC (Nagashima et al., 2019), и было высказано предположение, что это внутриклеточное взаимодействие необходимо для поддержания сложной формы митохондрий.

Гомеостаз кальция

Широко известно, что Ca ²⁺ считается незаменимым участником механизмов поддержания синаптической пластичности (Mateos-Aparicio, Rodríguez-Moreno, 2020). В клетках осуществляется обмен ЭР-митохондрии Ca ²⁺ с белком MERCs GRP75, который способствует открытию кальциевых каналов IP3R в ЭР в непосредственной близости от VDAC на внешней митохондриальной мембране (Honrath et al., 2017). Также было показано, что поддержание этой функции поддерживается комплексом VAPB-PTPIP51 (Paillusson et al., 2017) и белок PDZD8 (Hirabayashi et al., 2017).

Нарушение передачи кальция и другие стрессовые факторы впоследствии приводят к накоплению белков с нарушенной структурой, что запускает реакцию развернутых белков (UPR), процесс, в основном направленный на подавление трансляции, индукцию деградации неправильно свернутых белков и стимуляцию образования шапероны, связанные со складыванием. Однако, если причину нельзя устранить, UPR инициирует апоптоз. Это доказано в многочисленных экспериментах по истощению таких белков МАМ, как Mfn2, SIGMA1R и PACS-2 (фосфофуриновый кислый кластерный сортирующий белок 2), а также по экспрессии мутантной формы VAPB, все из которых индуцировали UPR. Симмен и др., 2005, 2010; Лангу и др., 2010; Муньос и др., 2013 г.; Прауз и др., 2013; Бернар-Мариссаль и др., 2015).

Липидный гомеостаз

Липиды составляют неотъемлемую часть синаптической передачи, обеспечивая образование новых мембранных структур, таких как синаптические везикулы (Sudhof, 2004), модифицируя функцию ионных каналов (Carta et al., 2014), и распространение сигнала по аксонам (Korinek). и др., 2020). Функции биохимических связей, образованных MERC, включают ремоделирование фосфолипидов, биосинтез холестерина, синтез фосфатидилсерина.Внутриклеточная конверсия свободного холестерина создает динамическое равновесие между мембраносвязанным и цитоплазматическим холестерином. Несмотря на то, что молекулярные механизмы, регулирующие динамику ассоциации между митохондриями и эндоплазматическим ретикулумом, остаются пока неизвестными (Nagashima et al., 2019), исследователи (Fujimoto et al., 2012) обнаружили увеличение мембранной ассоциации этих органеллы с использованием метил-β-циклодекстрина (MβC) (удаляет холестерин из мембран). Следовательно, в нормальных условиях холестерин выполняет ограничительную роль в структурной организации MERC (Fujimoto et al., 2012).

Синаптическая аутофагия

Известно, что аутофагия регулирует нейротрансмиссию в пресинапсе за счет устранения дефектных везикул, а в постсинапсе — за счет разрушения структурных белков (Lieberman and Sulzer, 2020). Несмотря на то, что на сегодняшний день данных мало, похоже, что MERC связаны с аутофагией во время синаптической передачи. Во-первых, известно, что мембранные липиды, которые синтезируются и модифицируются в МАМ, необходимы для образования аутофагосом (Nagashima et al., 2019). Во-вторых, при стимуляции нейронов для синаптической пластичности требуется высокий уровень аутофагии (Glatigny et al., 2019). Хотя стоит отметить, что в теле клетки и синапсах могут присутствовать разные формы аутофагии (Vijayan, Verstreken, 2017). Точные механизмы участия белков MERC в синаптической аутофагии пока неизвестны, однако при снижении экспрессии PACS-2 или Mfn-2 наблюдалась потеря MERC и нарушение образования аутофагосом. Напротив, нокдаун VAPB и PTPIP51 также приводил к потере MERC, но в этом случае стимулировалась аутофагия (Hamasaki et al., 2013; Gomez-Suaga et al., 2017).

Тем не менее, еще предстоит выяснить, имеют ли функциональные и морфологические типы MERC разные биохимические связи и взаимодействия. Вполне вероятно, что митохондриальные контакты с шероховатым или гладким ЭР могут образовывать отдельные субдомены с уникальными специализированными функциями, и только часть этих функций в настоящее время изучается с использованием стандартного метода пробоподготовки.

MERC в Synaptic Transmission

Синаптический контакт, или синапс, представляет собой взаимодействие между двумя нейронами в центральной нервной системе. Тем не менее, согласно современным представлениям, синапс состоит из трех основных частей: пресинаптического терминала, постсинаптического терминала и астроцитарного отростка вблизи синаптической щели (Perea et al., 2009). MERC присутствуют в пре- и постсинаптической частях (Gómez-Suaga et al. , 2019), модуляция этой связи в астроцитах изменяет их активность (Stephen et al., 2014), следовательно, MERC, по-видимому, также влияют на весь синапс (рис. 2). Индивидуальные синапсы имеют разные свойства, физиологию и морфологию, а митохондриальные свойства в синапсах могут значительно различаться даже между нейронами в пределах одного и того же пути (Hollenbeck, 2005). Далее рассмотрим роль MERC в синапсах, где митохондрии присутствуют в пре- или постсинаптической части. Характеристики безмитохондриальных синапсов, которые могут осуществлять нейротрансмиссию, используя в качестве источника энергии гликолиз (Jang et al., 2016; Ashrafi et al., 2017), в данном обзоре не обсуждаются.

Рисунок 2. MERC поддерживают синаптическую активность с трех сторон: пресинаптической, постсинаптической и астроцитарной. Участие MERC в поддержке активной нейротрансмиссии связано с изменениями кальциевого и липидного гомеостаза, митохондриальной динамики в пре- и постсинапсах за счет эффектов SIGMA1R (обозначен синей звездочкой) на ионные токи и мембранные рецепторы. Дофаминовые D1-рецепторы – D1R, малой проводимости Ca ²⁺ -активированные калиевые каналы – СК, NMDA-рецепторы – NMDAR.

Большинство возбуждающих аксонов контактирует с дендритными шипиками, тогда как тормозные аксоны устанавливают контакты преимущественно непосредственно с дендритами. Как известно, митохондрии крайне редко способны попасть в шипики дендритов (Kasthuri et al., 2015). Поэтому наиболее вероятно, что MERCs не оказывают прямого влияния на все типы синаптических контактов или, скорее, не влияют одинаково. Данные ультраструктурного анализа подтверждают наличие контактов между ЭР и митохондриями в разных участках нейронов (Wu et al., 2017; Hirabayashi et al., 2018) и астроциты (Proulx and Borgmann, 2020). Известно, что митохондрии в различных частях нейронов имеют разную популяцию: в частности, в телах клеток и дендритах это сложные митохондриальные сети, а в аксонах присутствуют дискретные митохондрии (Попов и др., 2005). Следовательно, функциональная роль MERC в разных участках нейронов может существенно различаться.

В настоящее время углубленных исследований локализации MERC и их характеристик в пределах отдельных типов клеток головного мозга или в различных отделах центральной нервной системы не проводилось.Различные типы тканей, их специфическое метаболическое состояние характеризуются определенным количеством внутриклеточных контактов. Более того, количество MERC меняется в процессе нейродегенерации (Leal et al., 2016) и старения (Calvo-Rodríguez et al., 2016).

Пресинаптическая поддержка

Митохондрии в аксоне существуют в виде двух популяций: подвижной и стабильной. Высокая близость митохондрий к синапсам необходима из-за высоких энергетических потребностей при нейротрансмиссии, поэтому существуют механизмы удержания митохондрий вблизи активных синапсов (Миронов, Симончук, 2006).Так, известно, что митохондрии при функциональной работе синапсов являются основными источниками энергии (Harris et al., 2012). Различные исследования демонстрируют различное количество митохондрий аксонов вблизи синапса: 36% (Chang et al. , 2006) или 50% зачатков аксонов могут содержать митохондрии (Lewis et al., 2016), поскольку подвижность митохондрий регулируется механизмами структурной и функциональная пластичность аксонов и синапсов (Cai et al., 2011). Примечательно, что одним из компонентов MERC является Drp1 (Friedman et al., 2011), что косвенно влияет на нейротрансмиссию. Drp1 участвует в делении митохондрий (Friedman et al., 2011), способствует формированию пула синаптических везикул в развивающихся синапсах (Li et al., 2008), участвует в поддержании биоэнергетики астроглиальных клеток (Motori et al., 2013). ). Как известно, пресинаптические митохондрии, количество которых связано с активностью Drp1, регулируют кратковременное увеличение выброса нейротрансмиттеров в период частой синаптической активности (Jonas, 2006) и регулируют пополнение везикул (Verstreken et al., 2005). Мутации Drp1 приводят к нарушению митохондриальной динамики и, как следствие, к нехватке энергии для синаптической нейротрансмиссии при длительной стимуляции. Кроме того, подвижность митохондрий влияет на локальный синтез белка и, следовательно, на ремоделирование синапсов в целом. Однако, принимая во внимание исключительную роль митохондрий в синаптической передаче, до настоящего времени остается неясной причина отсутствия митохондрий в некоторых синапсах (Devine, Kittler, 2018).

Вдоль аксона располагается эндоплазматический ретикулум (Wu et al., 2017), обеспечивая внутриклеточный транспорт (Droz et al., 1975) и регуляцию кинетики кальция (Luarte et al., 2018). Роль MERCs имеет решающее значение для регуляции кальция на локальном субклеточном уровне (Krols et al., 2016). В недавнем исследовании (de Juan-Sanz et al., 2017) обсуждалась возможность обратной связи между активностью нейронов и энергетическим статусом целой клетки. Авторы сделали несколько замечательных выводов. Во-первых, активность нейронов приводит к притоку Ca ²⁺ в ЭР аксонов, а не к оттоку.Во-вторых, аксональный ER-кальций не влияет на цитозольные уровни Ca ²⁺ вблизи синапса, за исключением случаев, когда он находится в условиях длительной синаптической активности. Наконец, снижение содержания аксонального ЭР-кальция приводит к активации температурозависимого механизма, модулирующего высвобождение нейротрансмиттера, и этот процесс полностью зависит от STIM (кальциевый сенсор — молекула взаимодействия стромы), интегрального белка нейромедиатора. ЭПР и плазматические мембраны. Поскольку одной из функций MERC является перенос Ca ²⁺ из ER в митохондрии через тройной белковый комплекс, представляется возможным контролировать высвобождение нейротрансмиттера, воздействуя на этот внутриклеточный контакт (Yang et al., 2010).

Недавнее исследование подчеркивает роль мембранного холестерина в синаптической передаче; в частности, в распространении потенциала действия по аксону, в модуляции спонтанного высвобождения глутамата в пресинапсе и регуляции открытия и локализации NMDA-рецепторов в постсинапсе (Korinek et al., 2020). Ранее было показано, что холестерин увеличивает количество везикул, находящихся в пресинаптической терминали, и вероятность их высвобождения, что приводит к общей стимуляции пресинаптической функции (Dason et al. , 2014). Также представляется очевидным, что перенос холестерина через МАМ от ER к митохондриальной мембране необходим для стероидогенеза, правильной организации мтДНК и обеспечения внутримитохондриальной антиоксидантной защиты (Arenas et al., 2017). Общее снижение холестерина приводит к уменьшению его количества в МАМ, что изменяет аутофагию, а также текучесть мембран и, как следствие, изменение соотношения амилоидогенного/неамилоидогенного процессинга АРР (Arenas et al., 2017).

Постсинаптическая поддержка

В постсинаптической части, на уровне дендритов или дендритных шипиков, влияние MERC на синаптическую передачу может модулироваться по-разному. В аксо-дендритных синапсах MERC расположены близко к окончаниям. В дендритах была продемонстрирована важная роль связывающего ER-митохондрии белка PDZD8 в поддержании локального гомеостаза Ca ²⁺ (Hirabayashi et al., 2017). Напротив, в аксо-шиповых синапсах наблюдается иная ситуация, так как митохондрии крайне редко входят в дендритные шипики (von Bohlen Und Halbach, 2009), но в то же время ЭР обнаруживается во многих шипиках (Toresson, Grant, 2005).

Показано, что такие консервативные белки MERC, как PSS1 (фосфатидилсеринсинтаза-1), PACS-2, IP3R3, SIGMA1R, Mfn2 и VDAC1 повсеместно локализованы в этих контактных участках в телах клеток, отростках и синапсах нейронов (Hedskog и др., 2013). MERC участвуют в поддержке активной нейротрансмиссии с белком SIGMA1R. Снижение концентрации Ca ²⁺ в ЭР вызывает диссоциацию SIGMA1R от BiP (связывающего белка иммуноглобулина), что позволяет активировать шаперонную активность рецептора.Кроме того, SIGMA1R стабилизирует IP3R3 для осуществления обмена Ca ²⁺ между органеллами, поддерживая биоэнергетику клетки (Hayashi et al., 2009). Комплекс IP3R-VDAC, стабилизированный SIGMA1R, имеет особое значение, так как контролируется обеими органеллами, оповещая о своем состоянии (Goetz et al., 2007). Согласно современным представлениям (Kourrich et al., 2012), в процессе развития неврологических нарушений происходит транслокация SIGMA1R из MERC в другие части клетки, в результате чего SIGMA1R связывается с различными ионными каналами, рецепторами или киназами. (транспортер NMDA, Src, D1R, PLC, DA) и модулирует их активность.Транслокация SIGMA1R запускает множество реакций этого рецептора с различными ионными каналами (Schmidt, Kruse, 2019). Взаимодействие SIGMA1R-NMDAR связано с обучением и памятью. Влияние на функцию NMDAR происходит за счет прямой модуляции Ca ²⁺ -активируемых калиевых каналов малой проводимости (Kourrich et al., 2012). SIGMA1R также способен подавлять функции NMDAR, например, в нейронах сетчатки, предположительно по пути PLC-PKC, который зависит от концентрации Ca ²⁺ (Zhang et al., 2011). Свободный SIGMA1R оказывает существенное влияние на синаптическую пластичность и процесс нейродегенерации. Показано, что SIGMA1R стимулирует индуцированную BDNF активацию фосфолипазы C (PLC)-gamma и высвобождение глутамата (Gómez-Suaga et al., 2018).

Астроцитарная поддержка

Третьей частью синапса является мембрана глиального отростка, хотя не все синапсы связаны с наличием глии как своей функциональной частью, например, в неокортексе таких синаптических контактов всего 50% (Kasthuri et al. , 2015). Трехмерная реконструкция доказывает наличие митохондриально-эндоплазматических контактов в отростках астроцитов (Goebel et al., 2019). Однако при определении роли в модуляции синаптической передачи MERC, расположенных в глиальных отростках, следует учитывать не только процент синапсов с глиальными отростками в их составе, но и клеточное, молекулярное и функциональное разнообразие самих астроцитов в мозг взрослого человека (John Lin et al., 2017).Остается до конца не выясненным, как различаются внутриклеточные контакты в этих субпопуляциях астроцитов. Кроме того, активность самих синапсов влияет и на морфологию астроцитарных отростков (Morel et al., 2014). Важность связи между МАМ-ассоциированными белками и глией во время синаптической передачи подтверждается нокдауном SIGMA1R или PACS-2 с использованием siRNA в нейрон-глиальных сетях in vitro , что вызывало дегенерацию отростков как в нейронах, так и в астроцитах (Hedskog et al. ., 2013).

Контакты митохондрий и эндоплазматического ретикулума в астроцитах регулируют подвижность митохондрий (Filadi et al. , 2015). Митохондрии в астроцитарных отростках подвижны (Lovatt et al., 2007; Lavialle et al., 2011) и задерживаются в местах повышенной синаптической активности, поскольку в них имеется большое количество транспортеров глутамата (Jackson et al., 2014). Причем подвижность митохондрий опосредована микротрубочками, но в основном регулируется актиновыми филаментами с изменением концентрации цитозольного кальция (Кремнева и др., 2013).

Как известно, некоторые астроцитарные функции запускаются в зависимости от определенных концентраций цитозольного Ca ²⁺ (Bernardinelli et al., 2014). Среди этих функций выделяют высвобождение глиотрансмиттеров (Papouin et al., 2017; Sherwood et al., 2017), быстрое удаление нейротрансмиттеров из синаптической щели (например, глутамата, вызывающего эксайтотоксичность в высоких концентрациях), митофагию нейрональных дефектных митохондрий , устранение синапсов (Allen and Eroglu, 2017).По последним данным, астроциты способны переносить новые митохондрии на аксоны (Hayakawa et al. , 2016). Кроме того, считается, что астроциты являются наиболее эффективными местами синтеза холестерина в головном мозге (Nieweg et al., 2009). Астроциты влияют на клетки-предшественники олигодендроцитов и, соответственно, на их жизнеспособность (Varela-Echevarría et al., 2017). Поскольку на все перечисленные функции прямо или косвенно влияет определенное содержание Ca ²⁺ в цитозоле, роль MERC как места переноса Ca ²⁺ между органеллами весьма значительна.Таким образом, повышение уровня белка GRP78 (BiP), участвующего в передаче кальция между органеллами, использовалось для защиты митохондрий и способствовало выживанию астроцитов при острой ишемии и других патологических состояниях, к которым относятся дисфункции митохондрий и ЭР. Оуян и др., 2011).

Как упоминалось выше, одной из основных функций MERC является поддержание липидного гомеостаза (Vance, 2014). У мышей со сниженным синтезом липидов, особенно в астроцитах, также наблюдается снижение высвобождения холестерина из астроцитов и нарушение развития синапсов с меньшим количеством пресинаптических пузырьков и дефектами синаптической пластичности (van Deijk et al. , 2017). МАМ-ассоциированные ферменты обеспечивают синтез и перенос фосфолипидов, холестерина и церамидов. При истощении запасов холестерина увеличивается связь между двумя органеллами (Fujimoto et al., 2012). Однако в настоящее время точный механизм переноса холестерина из ЭР на наружные мембраны митохондрий не установлен, и роль МАМ в этом транспортном процессе требует дальнейшего изучения, в частности, в астроцитах (Vance, 2014).

Реактивная активность астроцитов после травмы приводит к образованию глиальных рубцов, которые препятствуют росту аксонов, образуя физический и биохимический барьер (Chen et al., 2002; Варела-Эчеварриа и др., 2017). Однако сверхэкспрессия митофузинов (одного из компонентов МАМ) запускает апоптоз в астроцитах (Liu et al., 2014) и других типах клеток (Wang W. et al., 2018). Таким образом, MERC можно рассматривать как потенциальную терапевтическую мишень для защиты нервной системы от астроглиоза, нарушающего процессы регенерации и препятствующего синаптической передаче (Liu et al. , 2018). Сверхэкспрессия Mfn2 изменяет соотношение Bcl-2/Bax (Wang W. et al., 2018).Bcl-2 регулирует IP3R и, соответственно, запасание Ca ²⁺ в ЭР (García-Sáez, 2012), Mfn2 может активировать Bax и ингибировать экспрессию Bcl-2. Таким образом, Mfn2 запускает ингибирование антиапоптотического белка и активацию проапоптотического белка.

Согласно другой современной концепции (Дитятев, Шахнер, 2003), синапсом принято считать четырехчастную структуру, которая дополнительно состоит из незаменимого компонента для обеспечения нейротрансмиссии – внеклеточного матрикса.Однако нет данных о прямой связи между внутриклеточными MERC и внеклеточным матриксом, связанным с нейротрансмиссией.

Новая роль MERC в поддержке нейротрансмиссии во время развития нейродегенерации

Нейротрансмиссия существенно изменяется в процессе нейродегенерации (Bae and Kim, 2017). Синапсы и механизмы, обеспечивающие поддержание их функции, особенно уязвимы к хроническим стрессовым факторам, наблюдаемым при нейродегенеративных патологиях. Принимая во внимание количество клеточных функций, выполняемых с помощью MERC, кажется естественным, что мутантные формы или измененные функции нескольких резидентных белков вовлечены в течение неврологических патологий (Veeresh et al., 2019). К таким патологиям относятся протеинопатии (Poston et al., 2013; Paillusson et al., 2016) и метаболические нарушения при синдроме Вольфрама (Wiley et al., 2013; Delprat et al., 2018) и GM1-ганглиозидозе (Sano et al., 2009). Аномалии в структуре генов, кодирующих локализованные в MERCs функциональные белковые комплексы, по-видимому, являются важной частью нейродегенерации.Напр., нокдаун SIGMA1R и PACS2 приводит к дегенерации нейронов в культурах мышиного гиппокампа, что демонстрирует важную роль белков MERCs в отношении интегративных свойств нейронов (Hedskog et al., 2013). Следовательно, белки MERCs потенциально могут быть использованы в качестве молекулярных мишеней при создании нового нейропротекторного подхода. Принимая это во внимание, связи между функциями MERC и патогенезом таких нейродегенеративных патологий, как болезни Альцгеймера, Паркинсона и Хантингтона, в последнее время уделяется большое внимание благодаря новым наблюдениям (De Mario et al. , 2017; Молтедо и др., 2019 г.; Magalhães Rebelo et al., 2020).

Болезнь Альцгеймера

Патогенез болезни Альцгеймера (БА) служит хорошим примером новой роли белков MERCs в поддержке синаптической передачи во время развития нейродегенерации. Потеря синапсов коррелирует с когнитивными нарушениями у пациентов с БА и считается предшествующим механизмом потери нейронов в пораженных областях мозга (Tönnies and Trushina, 2017). В целом, БА характеризуется образованием β-амилоидных (Aβ) бляшек и накоплением в головном мозге нейрофибриллярных клубков, состоящих из гиперфосфорилированного тау-белка.Количество локализованного в синапсе олигомерного Aβ коррелирует с потерей возбуждающего синапса (Koffie et al., 2009). Важно отметить, что наиболее синаптотоксичной считается олигомерная форма Aβ (Kayed, Lasagna-Reeves, 2013). Предшественником Aβ является трансмембранный белок APP (Amyloid precursor protein) (Мальцев и др., 2014).

Новая гипотеза патогенеза AD предполагает, что MERCs участвуют в начальной фазе заболевания, а их измененные функции способствуют дисфункции клеточного метаболизма. В подтверждение этого MERC считаются внутриклеточным участком активности γ-секретазы (фермент расщепления APP) и пресенилинов (субъединичные белки γ-секретазы), генные мутации которых связаны с патогенезом БА (Area-Gomez et al., 2009). ; Area-Gomez and Schon, 2016). Потеря пресенилинов, в свою очередь, нарушает глутаматергическую нейротрансмиссию с пресинаптической стороны (Zhang et al., 2009).

Кроме того, Pera et al. (2017), что помимо γ-секретазы в МАМ локализован также один из фрагментов расщепления АРР, С99 (β-С-концевой фрагмент).В соответствии с этим накопление нерасщепленного С99 приводило к физической и функциональной стимуляции образования MERC, увеличению сфингомиелиназной активности в MERC и, как следствие, повышению содержания церамидов. Церамид, в свою очередь, известен как проапоптотическая молекула и ингибитор митохондриального дыхания (Pera et al., 2017). Фермент, необходимый для расщепления APP до Aβ и C99, ACAT (ацил-КоА: холестеринацилтрансфераза) (Puglielli et al. , 2004), присутствует в MAM (Area-Gomez et al., 2018). Таким образом, предполагается, что MERCs являются сайтом расщепления APP.Мутации в генах пресенилинов и нарушение активности γ-секретазы могут приводить к накоплению С99 в MERC, которые находятся в прямом контакте с митохондриями и могут влиять на функциональное состояние органелл и косвенно на межклеточную передачу сигналов через синапсы (Picone et al., 2014; Шрайнер и др., 2015).

Ранний вклад MERC в прогрессирование AD также подтверждается анализом протеома. Многие МАМ-локализованные белки связаны с БА (Völgyi et al., 2018), хотя данные об изменении их содержания и распределения в головном мозге кажутся противоречивыми.Анализ уровней SIGMA1R и PACS2 у мышей с мутациями APP _Swe/Lon показал, что уровни обоих белков повышены в гиппокампе до образования бляшек Aβ, а также повышены в мозжечке и коре, но в данном случае после образования бляшек. Хедског и др., 2013). Напротив, в посмертной ткани коры больных БА было показано повышение уровня PACS2, но снижение уровня SIGMA1R (Hedskog et al. , 2013). Кроме того, уже на ранней стадии заболевания показано снижение распределения SIGMA1R в течение жизни в коре головного мозга больных БА (Mishina et al., 2008). Согласно недавним данным (Lau et al., 2020), в корковых пирамидных нейронах пораженного БА головного мозга выявлено нарушение комплекса VAPB-PTPIP51, что вместе с предыдущими данными может наметить события, приводящие к изменению Са ²⁺ перенос, синтез АТФ и, как следствие, нарушение функции синаптической передачи (Gómez-Suaga et al., 2019). Усиление реакций окислительного стресса наблюдалось наряду с нарушенными уровнями МАМ-локализованных белков в коре головного мозга мышиных моделей БА (Völgyi et al., 2018), что также отражает возможную связь между функциями MERC и нарушением нейротрансмиссии, поскольку повышенная продукция активных форм кислорода напрямую влияет на синаптическую активность в нейронах (Ahmad et al., 2017).

Болезнь Паркинсона

Болезнь Паркинсона (БП) — нейродегенеративное заболевание, связанное с прогрессирующей дегенерацией дофаминергических нейронов в компактной части черной субстанции и образованием внутриклеточных белковых включений — телец Леви, а также нейритов Леви — нейрональных отростков, характеризующихся дистрофией, при значительной роли белка α-синуклеина. Пациенты с БП страдают двигательными расстройствами, такими как брадикинезия, тремор, мышечная ригидность и постуральная нестабильность (Gómez-Suaga et al., 2018).

Присутствие α-синуклеина наблюдалось в МАМ (Guardia-Laguarta et al., 2014), в то время как нейроны, лишенные α-синуклеина, демонстрировали уменьшенное количество MERC и увеличенное расстояние ER-митохондрии (Faustini et al., 2019) . Доказательства того, что митохондриальная морфология, уровень экспрессии Mfn1 и способность к дыханию были изменены в кортикальных нейронах мышей, лишенных α-синуклеина, подтверждают гипотезу о физиологическом взаимодействии между этим белком и функцией митохондрий (Faustini et al., 2019). Кроме того, олигомеризация α-синуклеина вызывает митохондриальную токсичность, деление, энергетический стресс и митофагию, демонстрируя роль α-синуклеина в качестве терапевтической мишени для будущих исследований (Ryan et al., 2015). Многие наблюдения показывают, что накопление α-синуклеина в пресинаптических окончаниях нарушает функционирование синаптических белков, синаптическую пластичность и нейротрансмиссию, тем самым вызывая повреждение аксонов (Ben Gedalya et al. , 2009; Cheng et al., 2011; Anichtchik et al. , 2013), которые могут индуцироваться непосредственно действием α-синуклеина или опосредованно с помощью белков МАМ, являющихся промежуточными звеньями.С одной стороны, Кали и соавт. (2012) показали, что α-synuclein поддерживает взаимодействие ER-митохондрий и, таким образом, необходим для сохранения митохондриального гомеостаза Ca ²⁺, в то время как мутантный белок негативно влияет на перенос Ca ²⁺ в митохондрии. С другой стороны, по данным Paillusson et al. (2017), сверхэкспрессия как дикого типа, так и мутантного α-синуклеина уменьшала количество связей ER-митохондрий. Более того, способность мутантного α-синуклеина взаимодействовать с VAPB, разрушая комплекс VAPB-PTPIP51, была связана с негативной регуляцией взаимодействия митохондрий с ЭР (Paillusson et al., 2017). Наряду с предыдущими данными, продемонстрированная способность α-синуклеина взаимодействовать, блокировать и транслоцировать митохондриальные VDAC через наружную мембрану органеллы может приводить к нарушению обмена Ca ²⁺ через МАМ (Ростовцева и др. , 2015). Принимая во внимание, что множественные механизмы с участием α-синуклеина в конечном итоге приводят к нарушению регуляции обмена Са ²⁺, связанного с MERC, экспрессия мутантного белка при БП может сильно влиять на нейротрансмиссию в митохондриально-ассоциированных пресинапсах, поскольку митохондриальный Са ^{Поглощение 2+} стимулирует выработку АТФ, что имеет решающее значение для удовлетворения локальных потребностей в энергии во время активной синаптической передачи (Harris et al., 2012).

Контакты митохондрий и эндоплазматического ретикулума могут не поддерживать нейротрансмиссию при БП не только из-за мутаций α-синуклеина, но и из-за локального присутствия мутантных белков с нарушенными функциями. Действительно, связанные с БП мутации в Miro1 (митохондриальная Rho GTPase 1), локализованном в MERCs белке (Modi et al., 2019), приводят к снижению митохондриального транспорта в нейронах, усилению связывания ER-митохондрий и неблагоприятному эффекту в отношении регуляции. митофагии и гомеостаза Ca ²⁺ (Berenguer-Escuder et al., 2020). Важно отметить, что Miro1 участвует в постсинаптическом позиционировании митохондрий в ответ на активацию рецепторов NMDA (Macaskill et al., 2009). Что касается значимой роли в обмене Са ²⁺ между ЭР и митохондриями, то был отмечен также белок DJ-1, который может индуцировать образование MERC, дисфункция которых связана с развитием БП. Согласно недавнему исследованию (Liu et al., 2019), DJ-1, по-видимому, является важным компонентом, поддерживающим комплекс IP3R-GRP75-VDAC, обеспечивающим целостность и функцию соединения ER-митохондрий.Супрессия DJ-1 приводила к негативной регуляции обмена Ca ²⁺ между органеллами (Ottolini et al., 2013) и нарушала ассоциацию ER-митохондрий, связанную с взаимодействием с комплексом IP3R-GRP75-VDAC (Liu et al. , 2019). Наконец, как упоминалось выше, SIGMA1R может двунаправленно модулировать состояние NMDA-рецепторов, оказывая влияние на синаптическую пластичность. Как экспериментальные (Wilson et al., 2020), так и теоретические (Yang et al., 2019) исследования показывают связь между SIGMA1R и нейротрансмиссией при БП.

Болезнь Гентингтона

Болезнь Хантингтона (БХ) — аутосомно-доминантное наследственное нейродегенеративное заболевание с манифестацией в возрасте 35–50 лет и симптомами, включающими моторные нарушения и прогрессирующую деменцию. Патогенез БХ связан с накоплением CAG-повторов в экзоне 1 гена белка гентингтина (Htt) и образованием мутантного гентингтина (mHtt), содержащего полиглутаминовый тракт (PolyQ) на N-конце. При прогрессировании БХ наблюдается накопление агрегатов mHtt в ядре нейрона и, в меньшей степени, в цитоплазме, дендритах и окончаниях аксонов (Ghosh, Tabrizi, 2018).Несмотря на то, что Htt и mHtt повсеместно экспрессируются в головном мозге, развитие БХ связано преимущественно с нарушением синаптической передачи (Smith-Dijak et al., 2019), избирательной потерей стриарных нейронов и менее заметно с потерей гиппокампальных и субталамических нейронов. . На поздней стадии БХ также поражается кора головного мозга (Reddy et al., 2009).

Так же, как при БА и БП, при прогрессировании БГ изменяется содержание MERCs-локализованных белков. Было показано, что на ранних и средних стадиях БХ IP3R3 и GRP75 снижаются в стриатуме, тогда как Mfn2 снижается только в скорлупе (Cherubini et al., 2020). Предполагаемое участие MERC в патогенезе БХ связано также с влиянием, которое mHtt оказывает на механизмы обмена Са ²⁺ ЭР-митохондрий, емкость Са ²⁺ и поддержание гомеостаза Са ²⁺ в клетки мозга. В коре и стриатуме мышиных моделей HD было показано нарушение взаимодействия между IP3R1 и GRP78 (BiP) (Higo et al., 2010). wtHtt вместе с HAP-1 (гентингтин-ассоциированный белок 1) или отдельно Htt может образовывать комплекс с С-концом IP3R1, что приводит к его сенсибилизации к IP3 и способствует высвобождению Ca ²⁺ из ER (Tang и другие., 2003). Истощение запасов кальция в ER, в свою очередь, может стимулировать открытие CRAC (каналов, активируемых высвобождением кальция) и, впоследствии, депо-управляемое поступление кальция (Prakriya and Lewis, 2015), которое было индуцировано у трансгенных мышей HD (Vigont et al. , 2014, 2015). Локализация Htt и mHtt в клетках полосатого тела связана с наружной митохондриальной мембраной (Choo et al., 2004). Соответственно, емкость Ca ²⁺, количество Ca ²⁺ , которое митохондрии могут запасать до открытия пор перехода митохондриальной проницаемости и выброса проапоптотических факторов в цитоплазму, значительно снижалась после PolyQ (Panov et al., 2002) и укороченный N-концевой mHtt (Choo et al., 2004). Наконец, в условиях нарушения гомеостаза Ca ²⁺ наблюдается патологическая фрагментация митохондрий (Shirendeb et al., 2012) при взаимодействии mHtt и Drp1 (Costa et al., 2010). Доказательства, предоставленные Cherubini et al. (2020) поддерживает гипотезу о том, что повышенная фрагментация митохондрий и снижение ассоциации ER-митохондрий в стриатуме HD взаимосвязаны. Более того, показана возможная связь между нарушением динамики митохондрий, снижением синаптической активности и белками MERCs при БХ (Manczak, Reddy, 2015).Интересно, что лечение Mdivi1 (ингибитором митохондриального деления 1) восстанавливало аномально активированные гены связанных с MERCs белков деления (Drp1, Fis1), подавляющие экспрессию генов слияния (Mfn1, Mfn2), которые не только впоследствии нормализовали функцию митохондрий. но также приводило к активизации синаптических генов в mHtt-нейронах (Manczak and Reddy, 2015). Таким образом, согласно упомянутым выше данным, нарушение функции нескольких белков MERCs может способствовать митохондриальной дисфункции, а также уязвимости и потере нейронов, наблюдаемым при БХ.Однако данные, представленные на сегодняшний день, ограничены; следовательно, роль MERC в изменении нейротрансмиссии при БХ требует дальнейшего изучения.

Обсуждение

В последние несколько лет были проведены многочисленные исследования взаимодействий митохондрий и эндоплазматического ретикулума в нейрональных клетках, и были получены ценные данные, разъясняющие роль и функции MERC, связанные с синаптической передачей (Gómez-Suaga et al., 2019; Dematteis). и др., 2020 г.; Ляо и др., 2020 г.; Перроне и др., 2020). Многочисленные данные подтверждают участие MERC в регуляции таких клеточных функций, как кальциевый и липидный гомеостаз, деление и подвижность митохондрий, аутофагия, инициация апоптоза, в частности, в нейрональных клетках. Данные в целом отражают потенциальное участие MERC в поддержке активной нейротрансмиссии, указывая на роль этих внутриклеточных контактов как помощников нейротрансмиссии. Несмотря на то, что MERC могут присутствовать внутри подавляющего большинства нейрональных клеток и в разных частях синапса, их роль в нейротрансмиссии может недооцениваться или не учитываться.

Анализ литературы по теме выявил ряд вопросов, связанных с изучением MERC в нейронно-глиальных сетях. Данных недостаточно не только для разделения функции белков внутриклеточных контактов и свободных мембран, но и для характеристики различий MERC в различных частях нейрона, типах глиальных клеток и областях мозга. До сих пор не хватает элегантных экспериментов, выясняющих роль MERC именно в синаптической передаче. Несмотря на проведенные многочисленные исследования, остается еще ряд вопросов, на которые еще предстоит ответить.Например, есть ли только один тип MERC, которые могут быть функционально модифицированы, или MERC с разной шириной щели выполняют определенные функции с самого начала без возможности реструктуризации? Также пока неизвестно, локализованы ли некоторые из описанных белков непосредственно в МАМ или их присутствие во фракции МАМ является просто следствием несовершенных методов фракционирования. Требуются новые методы, такие как split-BioID (Kwak et al., 2020), которые могут обнаруживать регуляторные белки МАМ и выявлять протеом синаптических внутриклеточных контактов.Наконец, остается плохо понятым, являются ли измененные функции MERC первичными или вторичными по отношению к развитию нейродегенерации. Роль MERC помощника нейротрансмиссии подтверждена, но все еще требует дальнейшего изучения.

Вклад авторов

OS разработал исследование. OS и PP собрали и проанализировали данные, написали и отредактировали рукопись. И. М. руководил исследованием и разработал идею. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

Финансирование

Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 18-34-00877.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Ссылки

Ахмад Ф., Сингх К., Дас Д., Говаикар Р., Шоу Э., Рамачандран А. и др. (2017). Потеря синаптической передачи сигналов Akt1, опосредованная реактивными формами кислорода, приводит к недостаточной трансляции белка, зависящей от активности, на ранних стадиях болезни Альцгеймера. Антиоксидант. Окислительно-восстановительный сигнал. 27, 1269–1280. doi: 10.1089/ars.2016.6860