Серебристая лада гранта: LADA Granta седан 2021 года: фото, цены, комплектации, характеристики

Содержание

LADA Granta седан - Официальный сайт LADA

• Подушка безопасности водителя
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Аудиоподготовка

• 14'' стальные диски
• Запасное полноразмерное стальное колесо 14''

• Подушка безопасности водителя
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка

• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Аудиоподготовка

• 14'' стальные диски
• Колпаки колес декоративные
• Запасное полноразмерное стальное колесо 14''

• Подушка безопасности водителя
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Обогрев наружных зеркал
• Кондиционер
• Аудиоподготовка

• 14'' стальные диски
• Колпаки колес декоративные

• Запасное полноразмерное стальное колесо 14''

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Кондиционер
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова

• Молдинги боковых дверей
• 14'' стальные диски
• Колпаки колес декоративные
• Запасное полноразмерное стальное колесо 14''

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Датчики парковки задние

• Кондиционер
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота черного цвета
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски оригинальные
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей

• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Кондиционер
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Молдинги боковых дверей
• 14'' стальные диски
• Колпаки колес декоративные
• Запасное полноразмерное стальное колесо 14''

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления

• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Датчики парковки задние
• Кондиционер
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота черного цвета
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски оригинальные
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Охранная сигнализация
• Дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер

• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Климатическая система
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира

• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Охранная сигнализация
• Дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла

• Климатическая система
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Охранная сигнализация
• Дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)
• Система электронного контроля устойчивости (ESC)
• Противобуксовочная система (TCS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом

• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Датчики парковки задние
• Датчики дождя и света
• Климатическая система
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX

• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Кондиционер
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Молдинги боковых дверей
• 14'' стальные диски
• Колпаки колес декоративные
• Запасное полноразмерное стальное колесо 14''

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Охранная сигнализация
• Дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Климатическая система
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
• Наружные ручки дверей в цвет кузова
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

Lada Granta Седан 2021 обзор, комплектации и цены, характеристики

Обзор Granta Седан

Держит слово

Моя сила не в блеске внешних украшений и вещей. Не в достижениях виртуальной жизни. Моя сила в том, что я выполняю обещания. Не меняю мировоззрение раз в полгода, а иду к цели и помогаю другим достичь ее.

Новое в знакомом

А ведь правда, мы становимся лучше, умнее, опытнее, сильнее. Мы радуемся, открывая что-то новое в себе и рядом с собой. Замечаем, когда меняется действительно что-то важное – стиль, комфорт, возможности любимого автомобиля.

  • Новые диски 15''
    Легкосплавные диски оригинального дизайна с чередующимися двухразмерными спицами и полированной поверхностью
  • Форсунки омывателя
    перенесены с капота на облицовку ветрового окна - стильное и практичное решение
  • Современная форма кузова
    Улучшенная аэродинамика автомобиля
  • Легкое открытие багажника
    Наружная электрокнопка отпирания багажника — неотъемлемый атрибут современного комфорта и стиля
  • Большие зеркала
    Гарантия отличной обзорности
  • Настройка сиденья водителя
    Регулировка в диапазоне 40 мм

Забота о каждом

Что может сравниться с той радостью, когда дарят подарок, который ты давно хотел? Только радость человека, которому даришь то, о чем он давно мечтал. Но потребности даже близких людей иногда понять непросто. Хорошо, что есть машина, умеющая учитывать самые разные запросы.

  • Комфорт пассажиров
    Перчаточный ящик с полочкой, два подстаканника и две ниши на облицовке тоннеля пола для мелких вещей и держателем для авторучки
  • Освещение салона
    Функция задержки освещения салона после закрытия двери: освещение гаснет через 25 секунд или сразу после включения зажигания
  • «Проводи меня домой»
    Функция задержки выключения света фар: забота о водителе и пассажирах даже после того, как они покидают машину
  • Акустический комфорт
    Дополнительная шумоизоляция улучшает виброакустику салона: мягкие подкрылки в арках колес – из специального материала, эффективно гасит «пескоструй» и удары гравия
  • Датчик дождя
    Незаменимая опция, когда ваш автомобиль окатят мутной водой из соседней лужи и при мелком дожде в долгой поездке
  • Просторный 5-местный салон
    Удобно и практично: задний диван легко складывается в пропорции 2/3. Ограничители двери с функцией инерционного доводчика

Жизнь, приправленная мощностью

Гамма двигателей мощностью 87, 98 и 106 л.с. позволяет выбрать автомобиль в соответствии со своим стилем вождения.

Все моторы оснащены облегченной шатунно-поршневой группой, что улучшает характеристики и повышает ресурс.

  • Рабочий объем
    1596 см
  • Мощность
    87 л.с. (64 кВт) при 5100 об/мин
  • Момент крутящий
    140 Нм при 3800 об/мин
  • Топливо
    Бензин, min 95
  • Рабочий объем
    1596 см
  • Мощность
    98 л.с. (72 кВт) при 5600 об/мин
  • Момент крутящий
    145 Нм при 4000 об/мин
  • Топливо
    Бензин, min 95
  • Рабочий объем
    1596 см
  • Мощность
    106 л.с. (78 кВт) при 5800 об/мин
  • Момент крутящий
    148 Нм при 4200 об/мин
  • Топливо
    Бензин, min 95

Ответственность и безопасность

Мир скоростей требует повышенного внимания. И повышенной отдачи: я слежу не только за собой, но и помогаю близким. А технологии помогают мне – ощутимо и эффективно! Особенно когда это комплекс электронных помощников водителя.

Благодаря проработанной силовой структуре кузова и современным системам безопасности LADA Granta седан выполняет российские и европейские требования по защите водителя, пассажиров и пешеходов.

  • Подушки безопасности
    Две фронтальные подушки безопасности – необходимая защита водителя и пассажира
  • ЭРА-ГЛОНАСС
    Система экстренного оповещения работает даже в случае отключения аккумулятора
  • Задние датчики парковки
    Более надежная страховка при маневрировании задним ходом
  • Система торможения (ABS+BAS)
    Антиблокировочная система с усилителем экстренного торможения: сохранение устойчивости и управляемости автомобиля
  • Курсовая устойчивость (ESC)
    Предотвращает занос автомобиля
  • Помощник на подъеме
    Система HSA помогает при старте на подъёме. Ощущение уверенности при подъеме (доступно для комплектаций с АМТ)

Вождение с азартом

LADA Granta предлагает выбрать принципиально разные варианты трансмиссии. Для мегаполиса – «автомат». Для поселка – «механика».

Для абсолютно любых условий – автоматизированная трансмиссия (АМТ).

Механическая коробка передач

Надежность и четкость переключений. В LADA Granta применяется МТ с тросовым приводом: это улучшает виброкомфорт автомобиля. Благодаря немецкому механизму переключения передач четкость и информативность выведены на уровень европейских аналогов. В механической коробке передач для 8-клапанного мотора внедрено новое передаточное число главной пары: 3,9 вместо 3,7. Новая трансмиссия повышает динамику автомобиля и обеспечивает уверенное ускорение.

Автоматизированная механическая трансмиссия

Две коробки по цене одной. С АМТ возможно двигаться как в полностью автоматическом, так и в ручном режимах. АМТ получила обновленные настройки, а также сокращенное время переключения передач. «Городской» режим позволяет легко двигаться в пробках. Функция зимнего режима обеспечивает комфортное трогание на скользких покрытиях. Спортивный режим – для уверенного и динамичного старта.

Автоматическая коробка передач

Обеспечивает классический функционал АТ, максимально комфортное переключение передач и движение в городском потоке.

Комплектации и цены

 Подушка безопасности водителя
 Крепления для детских сидений ISOFIX
 Блокировка задних дверей от открывания детьми
 Иммобилайзер
 Дневные ходовые огни
 Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
 Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
 Система вспомогательного торможения (BAS)
 Подголовники задних сидений 2 шт.
 Подушка безопасности переднего пассажира
 Подголовники задних сидений 3 шт.
 Охранная сигнализация
 Противотуманные фары
 Система электронного контроля устойчивости (ESC) (в Comfort только для АТ)
 Противобуксовочная система (TCS) (в Comfort только для AT)
 Система помощи при трогании на подъеме (HSА) (только для АТ и АМТ)
 Розетка 12V
 Бортовой компьютер
 Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
 Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
 Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
 Воздушный фильтр салона
 Легкая тонировка стекол
 Аудиоподготовка
 Электроусилитель рулевого управления
 Регулируемая по высоте рулевая колонка
 Центральный замок
 Электростеклоподъемники передних дверей
 Обогрев наружных зеркал
 Кондиционер
 Подогрев передних сидений
 Электропривод и обогрев наружных зеркал
 Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика
 Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
 Сиденье водителя с регулировкой по высоте
 Центральный замок с дистанционным управлением
 Электростеклоподъемники задних дверей
 Обогрев ветрового стекла
 Климатическая система
 Датчики парковки задние
 Датчики дождя и света
 14'' стальные диски
 Запасное полноразмерное стальное колесо 14''
 Колпаки колес декоративные
 Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в цвет кузова
 Наружные ручки дверей в цвет кузова
 Молдинги боковых дверей
 15'' легкосплавные диски
 Запасное стальное колесо временного использования 14''

Характеристики

Расположение двигателя
Длина / ширина / высота, мм
База, мм
Объем багажного отделения в пассажирском / грузовом...
Колесная формула / ведущие...
Тип кузова / количество...
Количество мест
Колея передних / задних колес,...
Дорожный просвет под силовым агрегатом (полная...
Тип двигателя
Система питания
Рабочий объем, куб. см
Код двигателя
Количество, расположение...
Максимальная мощность, кВт (л.с.) / об....
Максимальный крутящий момент, Нм / об....
Рекомендуемое топливо
Максимальная скорость, км/ч
Время разгона 0-100 км/ч, с
Городской цикл, л/100 км
Загородный цикл, л/100 км
Смешанный цикл, л/100 км
Снаряженная масса, кг
Объем топливного бака, л
Технически допустимая максимальная масса,...
Максимальная масса прицепа без тормозной системы /...
Тип трансмиссии
Передаточное число главной...
Передняя
Задняя
Рулевой механизм

Фотографии

Экстерьер

Интерьер

LADA Granta в кузове седан – современный маневренный автомобиль, имеющий 4 двери и более просторный багажник, чем в лифт- и хэтчбек версиях. Стоимость базовой комплектации самая низкая, от 419 900р. По этим и другим причинам седан принимают за возможного фаворита линейки, купить и протестировать автомобиль покупатели могут уже с октября 2018 года в салонах дилера.

Внешний вид

Седан Лада Гранта после рестайлинга смотрится совершенно иначе: новой стала передняя часть, капот, рельеф багажника, молдинги в отдельных комплектациях. Появилась возможность заказать встраиваемые в зеркала повторители поворотов и ручки дверей в тон кузова. Обращая внимание на изменения в передней части:

  • Перерисованная решетка радиатора с серебристой каймой
  • Огни дневного света вписаны в ее верхние края
  • Форсунки с омывающей жидкостью перенесены на фартук лобового стекла
  • Зеркала стали шире и удобнее для обзора
  • Диски получили новый дизайн звезды с двойными лучами разной ширины

Салон автомобиля

В зависимости от комплектации, выбирается интерьер нового седана. Базовой функцией стала поддержка головы с помощью анатомических подголовников и спины, за счет боковых валиков. Водитель может отрегулировать сиденье по высоте. Свет в салоне гаснет с 25-секундной задержкой.

Центральная панель LADA Granta 2018 уютная и наглядная, все кнопки упорядочены, как и информация на многополосном дисплее. Имеется кнопка открытия багажника, вызова экстренных служб, с повышением комплектации добавляются переключатели, такие как климат-контроль или подогрев передних сидений.

Двигатели и комплектации

Представлены моторы, уже знакомые водителям по ранним комплектациям: 1.6 объем для 87-сильного, 98-сильного и самого мощного двигателя в линейке со 106 л.с. Обновленные поршни с выемками под клапаны позволяют работать тише и надежнее, избегая загиба при разрыве ГРМ. Двигатели демонстрируют резвость на низких оборотах, при этом их шум сглаживается за счет хорошей изоляции салона.

Седан представлен в пяти комплектациях: Standard, Classic, Comfort, Luxe и Prestige. В младшей из них доступен только двигатель 87 л.с. и механическая коробка передач, старшая предоставляет широкий выбор комфортных опций: гибридную коробку передач, более мощный мотор, подушку безопасности для переднего пассажира, ассистент парковки и старта на подъеме, а также другие опции из длинного списка.

Руководства по эксплуатации

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 26.10.20

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 16.07.20

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 24.03.20

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 09.01.20

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 29.10.19

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 10.10.19

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 04.09.19

 Дополнение к руководству по эксплуатации LADA Granta Drive Active от 01.07.19

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 13.03.19

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 05.10.18

 Руководство по эксплуатации LADA Granta от 20.08.18

Пятидверка Lada Granta получилась красивее седана — ДРАЙВ

Серийный выпуск хэтчбека Lada Granta на заводе «Иж-Авто» стартует уже в нынешнем месяце, но в продажу машина попадёт не раньше лета. Новинка построена на основе седана. Изменения коснулись не одной только переделки задней части кузова. Поменялись бамперы, и задние двери тут оригинальные. Молдинги в цвет кузова, светодиодные повторители указателей поворота на зеркалах (в топовых версиях), поднимающаяся подоконная линия и плавно ниспадающая крыша сделали машину и элегантнее, и дороже на вид, чем четырёхдверка.

Чёрное обрамление противотуманок и иная форма воздухозаборников... Образ получился агрессивнее, чем у «собрата»-седана.

У хэтчбека на бампере появился светодиодный противотуманный фонарь, а номерной знак переехал с бампера на пятую дверцу. Дворник на ней, к слову, будет присутствовать во всех версиях, кроме начальной.

Интерьер пятидверки в целом будет похож на салон седана, но в средних и старших версиях появится серебристая окантовка дефлекторов вентиляции и ручек дверей. Кроме того, сообщают в АвтоВАЗе, новинка будет отличаться оригинальной рукояткой коробки передач и иным кроем обивки сидений с дополнительной декоративной прострочкой.

Длина — 4247 мм (на 13 мм меньше, чем у седана), другие размеры идентичны. По предварительным данным, объём багажника новой Гранты — 440/760 л.

Гамма моторов и коробок передач у пятидверки будет идентична набору агрегатов у седана. Это «четвёрки» 1.6 мощностью 87–106 л.с. и «механика» на пять передач (как опция — четырёхступенчатый «автомат»). Впрочем, АвтоВАЗ ещё не опубликовал полные характеристики хэтчбека. Есть предварительные данные о комплектациях: «Стандарт», «Норма» и «Люкс». В «базу» войдут одна подушка безопасности, центральный замок и регулируемая по углу наклона рулевая колонка, а в «Люксе» «климат», «мультимедийку» с семидюймовым сенсорным дисплеем и полный электропакет ещё можно будет дополнить навигацией, парктроником, датчиками света и дождя. Цен пока нет. Скорее всего, пятидверка окажется несколько дороже седана.

Как узнать цвет автомобиля

У наших клиентов, желающих приобрести окрашенные детали для автомобилей Лада, часто возникает вопрос: как узнать точное наименование цвета? К примеру, у Лады Гранта существует 4 оттенка черного цвета.

Итак, для выяснения точного наименования цвета автомобиля Лада понадобится сервисная книжка автомобиля или гарантийный талон.

В свидетельство о регистрации смотреть не нужно, там МРЭО указывает цвет на свой вкус.

Наименование цвета кузова автомобилей Лада состоит из 3 цифр и названия цвета.

В сервисной книжке это выглядит так:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

В гарантийном талоне вот так:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Название цвета после его цифрового обозначения может отличаться от заводского наименования цвета. К примеру, может быть указан цвет "691 серебристый". Заводское наименование этого цвета "691 Платина". Таким образом, при заказе деталей в цвет кузова вам нужно ориентироваться именно на цифровой код цвета.

Для автомобилей Датсун (Datsun) обозначение цветов отличается, на настоящий момент таблица соответствия цветов такова:

Наименование цвета АвтоВАЗ Наименование цвета Datsun
240 Белое Облако C04 или C04G (белый)
413 Ледяной C03 или C03G (серо-голубой)
610 Рислинг C02 или C02G (серебристый металлик)
672 Пантера C05 или C05G (черный)
790 Кориандр C01 или C01G (коричневый)

Если у вас нет гарантийного талона или сервисной книжки на автомобиль, определить цвет возможно по дате выдачи паспорта транспортного средства (согласно плана покраски АвтоВАЗ).

Для определения цвета по дате выдачи паспорта транспортного средства надо перейти по ссылке http://avtosreda.ru/colorplans/2016/03.php , выбрать год и месяц выдачи ПТС, в таблице плана покраски выбрать модель автомобиля, и подобрать цвет. План покраски действителен только для автомобилей, собранных в г. Тольятти. По автомобилям, собранным в Ижевске, рекомендуем обращаться в систему обратной связи АвтоВАЗ.

Если у вас дубликат ПТС или цвет автомобиля не подобрать по плану покраски, вы можете задать вопрос о цвете автомобиля через систему обратной связи ПАО "АвтоВАЗ", указав VIN-номер автомобиля. Чтобы задать вопрос, перейдите по ссылке https://www.lada.ru/feedback/message.html

 

LADA Granta Cross – Обзор модели, фото – Первый Лада Центр, Краснодар.

1.6 л 8-кл. (87 л.с.), 5МТ / Classic (21941-A1-X30)

• Подушка безопасности водителя
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Центральный замок
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Климатическая система
• Аудиоподготовка

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в черном цвете
• Рейлинги
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

1.6 л 8-кл. (87 л.с.), 5МТ / Comfort (21941-A1-X31)

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Охранная сигнализация
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Климатическая система
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в черном цвете
• Рейлинги
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

1.6 л 16-кл. (106 л.с.), 5МТ / Comfort (21947-A1-X30)

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Охранная сигнализация
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Климатическая система
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в черном цвете
• Рейлинги
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

1.6 л 16-кл. (106 л.с.), 5АМТ / Comfort (21947-A1-XR0)

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 2 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Охранная сигнализация
• Дневные ходовые огни
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Климатическая система
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в черном цвете
• Рейлинги
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

1.6 л 16-кл. (106 л.с.), 5МТ / Luxe (21947-A2-X30)

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 3 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Охранная сигнализация
• Дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Подсказчик переключения передач в комбинации приборов (только для МТ)
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Датчики парковки задние
• Датчики дождя и света
• Климатическая система
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в черном цвете
• Рейлинги
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

1.6 л 16-кл. (106 л.с.), 5АМТ / Luxe (21947-A2-XR0)

• Подушка безопасности водителя
• Подушка безопасности переднего пассажира
• Подголовники задних сидений 3 шт.
• Крепления для детских сидений ISOFIX
• Блокировка задних дверей от открывания детьми
• Иммобилайзер
• Охранная сигнализация
• Дневные ходовые огни
• Противотуманные фары
• Система экстренного оповещения ЭРА-ГЛОНАСС
• Антиблокировочная система с электронным распределением тормозных сил (ABS, EBD)
• Система вспомогательного торможения (BAS)

• Бортовой компьютер
• Заднее сиденье с раскладкой в пропорции 60/40
• Обивка сидений комбинированная ткань/экокожа. Цвет (по выбору) оранжевый/серый
• Противосолнечный козырек пассажира с зеркалом
• Розетка 12V

• Электроусилитель рулевого управления
• Регулируемая по высоте рулевая колонка
• Регулировка ремней безопасности передних сидений по высоте
• Сиденье водителя с регулировкой по высоте
• Воздушный фильтр салона
• Легкая тонировка стекол
• Складной ключ
• Центральный замок с дистанционным управлением
• Электростеклоподъемники передних дверей
• Электростеклоподъемники задних дверей
• Подогрев передних сидений
• Электропривод и обогрев наружных зеркал
• Обогрев ветрового стекла
• Датчики парковки задние
• Датчики дождя и света
• Климатическая система
• Круиз-контроль и ограничитель скорости
• Аудиосистема (FM, USB, SD-карта, Bluetooth, Hands free), 4 динамика

• Наружные зеркала с боковыми указателями поворота в черном цвете
• Рейлинги
• Молдинги боковых дверей
• 15'' легкосплавные диски
• Запасное стальное колесо временного использования 14''

►Как узнать номер цвета автомобиля ВАЗ. Цвета ЛАДА Гранта, Приора, Калина. Код цвета кузова автомобиля ВАЗ. КодКраски.РФ

Белая040 классическая белая
Триумф100 Мвишневый металлик
Красная1015 красный
Абрикос102 Мсеребристо-светло оранжевый.
Лотос1021 блекло-желтый
Желтая1035 желтая
Калина104 Мярко-красный металлик
Офелия105 грязновато-белый
Франкония105 М
Баклажановая107 темно-фиолетовый
Лилия108 бледно-желтый
Casablanca white daewoo10L белый УзДЭУ
Рубин110 красный не металлик
Синяя1115 синяя
Феерия gm115 Мвишневый металик
Коралл116 Мяркий красно-сиреневый металлик.
Кармен118 в зависимости от освещения красно-вишневый или красно-малиновый неметаллик.
Гоби120 розово-сиреневый металлик
Майя120 Мрозово-сиреневый металлик
Оранжевая121 красный металлик.
Реклама 121121 красный металлик.
Антарес125 Мтемно-вишневый металлик
Вишневая 02127 темно-красный неметаллик.
Искра128 Мкрасно-вишневый металлик
Виктория129 Мярко-красный металлик
Cardo white daewoo12U белый
Вишневый сад132 Мтемно-серебристо-красный неметаллик
Магия133 Мтемно-фиолетовый металлик
Яшма140 темно-красно-сиреневый, черешня
Аметист145 Мсиреневый металлик
Дефиле150 Мсеребристо-серо-коричневый
Паприка152 Мтемно-красный
Коррида165 темная красно-оранжевая
Торнадо170 красный неметаллик.
Гранатовая180 темно-красный неметаллик с легким фиолетовым оттенком.
Романс182 темновато-красный неметаллик
Калифорнийский мак190 Мзолотисто-красный металли
Портвейн192 Мтемный красно-фиалетовый
Белая201 чисто белый не металлик, ярко-белый
Белая202 белая
Талая вода206 Мбело-зеленый металлик
Охра золотистая208 темновато-желтый
Кремовая210 блекло-желтый неметаллик
Слоновая кость214 бежевый
Желтовато-белая/сафари215 светло-серый
Миндаль217 Мбежево-розовый металлик
Rouge toreador renault21B Мтемно-вишневый металлик
Нарцисс223 яркий, насыщенный желтый не металлик
Светло-желтая225 светло-желтая
Чайная роза228 светлый бежево-розовыйнеметаллик
Жемчуг230 Мсеребристо-бело-молочный
Серо-белая/белая233 серо-белый неметаллик.
Бледно-бежевая235 бежевый не металлик
Бежевая 236 / светлая серо-бежевая236 светло-бежевый
Невада239 М
Белое облако240 белый не металлик, ярко-белый
Moondust silver ford2431C М
Золотая нива245 Мпронзительный золотисто-лимонный металлик
Звездная пыль257 Мбежево-сиреневый металлик
Бронзовый век262 Мтемно-серый металлик
Нефертити270 Мблекло-зелено-бежевый
Приз276 Мметаллик цвета платины
Антилопа277 Мзолотисто-бежевый металлик.
Апельсин иж-2828 оранжевый
Мираж280 Мсеребристый металлик с легким бледно-желтым или голубым оттенком в зависимости от освещения.
Кристалл281 Мсеребристо-желтый металлик
Джем285 Моранжево-коричневый металлик
Panther black ford2851-CM-1 М
Золотисто-желтая 286286 металлик цвета охры
Опатия 286286 Мметаллик цвета охры
Южный крест290 Мкремово-серый красивый металлик
Оранжевая295 бежево-белый не металлик
Сливочно-белая295 бежево-белый неметаллик
Такси299 желтый насыщенный
Ива серебристая301 Мсветло-бежевый неметаллик
Лиана 302302 зеленый неметаллик
Бергамот302 Мголубовато-зеленый загадочный металлик
Защитная / хаки303 зеленый хаки
Green metalic chevrolet3049 М
Аспарагус305 Мсеребристо-зеленый металлик
Зеленый сад307 темно-зеленый не металлик, близкий по цвету еловой хвое
Осока308 Мсветло-мятный металлик
Гренадер309 красный немного розоватый неметаллик
Валюта310 Мсветло-серый металлик, имеющий слабо выраженный зеленый оттенок или "долларовый" металлик
Игуана311 Мзеленый металлик цвета бутылочного стекла
Водолей313 Млатунь металлик
Сальвия320 бледно-зеленый, светло-оливковый
Колумбийская зелень322 Мзолотисто-оливковый металлик.
Светло-зеленая325 светло-зеленая
Ярко-зеленая329 яркий зеленый
Золотой лист331 Мзолотистый темно-зеленый металлик
Оливковая340 оливковый неметаллик
Золото инков347 Мзолотистый темно-зеленый металлик
Кедр352 серо-зеленый неметаллик
Бальзам353 зеленый
Сочи360 Мсеро-светло-зеленый металлик
Цунами363 Мглубокий сине-зеленый металлик
Blanc glacier renault369 белый белый
Корсика370 Мсеро-зеленый металлик
Амулет371 Мтемно-зеленый
Серовато-зеленая373 серовато-зеленая
Мурена377 темный сине-зеленый не металлик
Ниагара383 Млегкий бежево-бледно-голубоватый оттенок
Изумруд385 Мтемно-зеленый металлик
Папирус387 Мсерый металлик с легким желтым оттенком
Табак399 Мзелено-коричневый металлик.
Tango ford3rse Мкрасный с розоватым оттенком металлик
Босфор400 светло-синий
Ирис402 светло-голубой
Монте-карло403 ярко-синий неметаллик
Петергоф404 голубой с примесью
Арахис405 бледно-золотистый
Чароит407 Мсеро-светло-сиреневый оттенок
Магеллан410 темно-голубой
Сенеж410 светло-голубой
Регата412 Мтемно-голубой красивый металлик
Электрон415 Мтемно-серый металлик
Фея416 Мголубой металлик с легким сиреневым оттенком.
Пицунда417 зелено-голубой неметаллик.
Опал419 Мсеребристый металлик слабого голубого оттенка
Красная42 насыщенно-красный
Балтика420 синезеленый неметаллик с характерным глубоким оттенком.
Афалина421 Мсветло-зеленый металлик бирюзового оттенка.
Гейзер423 М
Голубая/адриатика425 голубой неметаллик
Серовато-голубая427 серо-голубой
Медео428 голубой неметаллик
Атлантика440 светло-синий
Сапфир446 Мсиний металлик
Синяя полночь447 сине-фиолетовый неметаллик
Рапсодия448 Мсине-фиолетовый металлик.
Океан449 сине-фиолетовый неметаллик
Калипсо450 сине-фиолетовый
Боровница451 Мсеребристо-темно серый металлик.
Капри453 Мтемно-сине-зеленый металлик
Темно-синяя456 темно-синий
Мулен-руж458 ярко-фиолетовый неметаллик
Синяя/валентина464 серо-фиолетовый неметаллик.
Слива478 М
Бриз480 светло-зеленый неметаллик бирюзового оттенка.
Ярко-голубая481 одним словом неметаллик
Сириус483 М
Лагуна487 Мсине-голубой металлик.
Canterbury green daewoo48L Мбледно-салатовый серебристый металлик
Астероид490 Мтемно-сине-зеленый металлик.
Лунный свет495 М
Васильковая497 светло-голубой
Лазурно-синий498 Ма по существу - сине-черный металлик.
Deep navy blue ford4cwa Мтемно темно-синий
Deep rosso red ford4sve Мсветло-бордовый
Белая 1* 
Белая иж1* 
Белый газ* белый
Мальва* темно-красный неметаллик
Порту* красный насыщенный
Белая 2* белый
Апельсин камаз* оранжевый
Бежевая* бежевый
Морская волна* сине-зеленый как море)
Айсберг газ* белый
Ангара* голубой
Светло-голубая* светло-голубой
Белая иж2* белый
Белая ночь* белый
Светло-дымчатая* светло-серый
Светло-серая газ* светло-серый
Серая* серый
Палевая* темно-бежево-желтоватый
Песочная* темно-охровый
Светло-бежевая* светло-бежевый
Дыня502 Мсеребристо-желтый
Лаванда* светло-фиолетовый
Серо-голубая* серо-голубой
Юниор* фиолетово-голубой
Флора* зеленый
Лоза* темновато-зеленый
Синевато-зеленая* синевато-зеленый
Парма* темно-зеленый
Морская пучина* темно-зеленый с синевой
Солярис* темный сиреневый
Аустер gm* М
Аккорд503 Мсеребристо-коричневый металлик
Морано газ* М
Адрия газ* М
Ангара газ* М
Антика* М
Олимпия gm* М
Blue metalic chevrolet* М
Буран газ* М
Дельфин газ* М
Лас вегас газ* М
Наутилус газ* М
Озеро тахо газ* М
Омега газ* М
Панакота газ* М
Посейдон газ* М
Сильвер газ* М
Скат газ* М
Циклон газ* М
Черный газ* М
Наутилус507 темно-зеленый с синевой
Гольфстрим508 фиолетово-голубой
Темно-бежевая509 темно-бежевый
Кипарис564 светло-зеленый
Тайга565 зеленый
Черная601 неметаллики черного цвета, едва различающиеся оттенками
Авантюрин602 Мчерный металлик
Нарва605 бледно-золотистая, латунь
Млечный путь606 Мчерный
Brighton gold daewoo60U Мбледно-золотистый
Динго610 зелено-светлоголубой-сложный цвет)
Полюс мира615 Мсеребристо-серый металлик
Albastra egee renault61G Мсветло-синий
Мускат620 М
Мокрый асфальт626 Мсерый металлик отдаленно похожего цвета
Нептун628 Мтемно-серый металлик синего оттенка
Khaki beige daewoo62U Мтемно-бежевый металлик
Кварц630 Мтемно-серый металлик
Gris boreal renault632 Мбежевый
Черный шоколад635 Мчерный с неким глубоким оттенком металлик
Серебристый640 Мсеребро
Совиньон650 Мбледно золотисто оливковый
Черный трюфель651 Мчерный с неким глубоким отенком
Викинг655 М
Альтаир660 Мсеребристый светло-серый металлик.
Космос665 Мчерный металлик
Сандал670 Мрозовый металлик
Светло-серая 02 / серая 671671 
Серая671 серая
Noir nachre renault676 Мчерный
Снежная королева / серебристый690 Мсеребристый металлик без какого-либо оттенка
Sea grey ford6dye Мсеро-синий
Туманное утро gm708 М
Mexico red daewoo71L красно-розовый
Spinel red daewoo74U Мбледновато-красный
Темно-коричневая793 темно-коричневый
Пирано795 Мкрасно-коричневый металлик
Frozen white ford7vta белый белый
Pearl black daewoo87U Мчерный
Greenish blue daewoo88K Мсеро-сине-зеленый
Morello ford8rte Мтемно-сиреневый, черешня
Золотая звезда gm901 М
Посейдон gm902 М
Дельфин gm903 М
Silver stone daewoo91L Мсеребристо-серый металлик
Cashmere beige daewoo92L Мсеребристо-бежевый
Poly silver daewoo92U Мсеребристый
Dove silver daewoo95U Мсеребристо-золотистый
Зеленый963 Мпросто зеленый
Blue daewoo97K Мсветло-синий
Gris eclipse nachre renaultB66 М
Черная hyundaiD01 М
Casablanca white chevroletDF13-OEOB белая
Blanc neige renaultF30 белая
Vert opaline renaultF98 М
Marsala red chevroletFD13-31V4 темновато-красный
King blue chevroletFD13-51RP сине-фиолетовый
Pannacota chevroletFE87-1167 М
Rubens chevroletFE87-3594 М
Prestige blue chevroletFe87-520Q М
Classic green chevroletFE87-60FF М
Green bamboo chevroletFe87-6393 М
Silver chevroletFE87-7052 М
Moonland chevroletFe87-7155 М
Light silver chevroletFE87-7163 М
Night black chevroletFE87-9423 М
Летний песок hyundaiH01 М
Blue oleron renaultJ48 синий
Gris comete renaultKNA М
Gris basalt renaultKNM М
Oyster silver fordpc2 Мсеребристо-желтовато-серый
Малина hyundaiR01 М
Blue minerale renaultRNF М
Blue electrique renaultRNZ М
Dove silver daewoou182 Мсеребристо-золотой

Что получила и чего лишилась «Лада Гранта» после обновления?

«Лада Гранта» — один из самых продаваемых автомобилей на отечественном рынке, но дизайн модели выбивается из новой корпоративной стилистики. А ещё у АвтоВАЗа есть более дорогое семейство «Лада Калина», автомобили которого продаются неважно. Что делать в такой ситуации? Как ни странно, нашёлся способ убить сразу двух зайцев: отправить имя с двадцатилетней историей на покой, причесать все четыре кузова (седан, лифтбек, хэтчбек и универсал) под одну гребёнку в актуальном дизайне и назвать все версии «Грантами». В общем, рестайлинг не стал пустой формальностью и принёс немало изменений.

Внешний вид

Естественно, первый и самый заметный пункт в списке новшеств — дизайн. Общая для всех вариантов кузова черта — новая передняя часть в «икс-стиле», причём под списание пошли многие старые кузовные элементы: крылья, бампер, решётка радиатора, фары, капот. Указатели поворота, как и раньше, у машин в младших комплектациях находятся в крыльях, а в «люксовых» версиях — в зеркалах заднего вида.

Бампер обзавёлся хромированными элементами, проходящими, как у «Икс-рея», над противотуманными фарами. На решётке красуется огромная обновлённая ладья эмблемы. Основным блок-фарам досталась модная чёрная подложка, которая раньше была характерна только для «Калины». Секций три: габаритный огонь, указатель поворота и объединённый отражатель под лампу Н4 для ближнего и дальнего света.

Капот по-прежнему размещается между крыльями, а не лежит на них, как у «Весты», но изменилась общая геометрия передней части. Если раньше для «Гранты» был характерен короткий капот и покатая решётка радиатора, то теперь последняя стоит более вертикально, а капот, соответственно, стал длиннее, заодно сделав более стремительным облик машины в целом. К тому же там больше нет форсунок стеклоомывателя, которые переехали на «жабо», поближе к «дворникам». Двери, крыша и задние крылья остались нетронутыми, ибо менять их дорого.

А вот перемены в задней части неравные. Бывшие «калиновские» кузова явно обделили. У них лишь исчезла выштамповка под фирменный значок на двери багажника, на месте которой теперь красуется размашистая надпись «LADA». Лифтбеку повезло чуть больше: он кроме этого разжился другим бампером с изменившейся формой чёрной вставки в нижней части, видимо, призванной немного визуально облегчить вид сзади. На фоне этого реформа кормы седана выглядит пиром на весь мир — здесь кроме бампера ещё и полностью новая крышка багажника довольно затейливого дизайна, на которую переселили и номерной знак. Все версии кузова получили электрическую кнопку на крышке или двери багажника.

В салоне

Первое, на что обращаешь внимание в салоне — это сиденья. Сперва замечаешь тканевую обивку с рисунком в стиле «Весты Кросс», когда усядешься, понимаешь, что изменились и профиль самого сиденья, и форма подголовника. Пока трудно сказать, насколько удобнее стало водителю, и стало ли: нужно поездить по разным дорогам и в разных режимах, чтобы сделать окончательные выводы.

А вот вернувшаяся из небытия регулировка сиденья по высоте — однозначное благо. К тому же сделана она по-человечески, достаточно покачать рычагом. Подпрыгивать, как в «Логане» первого поколения, не нужно. Жаль было, что её в своё время отобрали у «Калины,» но спасибо, что вернули. Ещё бы боковые подушки безопасности получить. Эх, мечты, мечты... Но, увы, их забрали Datsun on-DO и mi-DO и делиться не хотят.

Перед глазами знакомый по ушедшим «Калине» и «Приоре» руль с новой эмблемой, за ним — комбинация приборов с прежней компоновкой (спидометр и тахометр с дисплеем между ними), но новая в деталях. Шкалы — с оранжевым ободком, белой подсветкой и радиальной оцифровкой. Дисплей в тон, к тому же, наконец-то, с инверсией (светятся только цифры). Компоновка данных также поменялась.

Передняя панель взята у «Калины» (причём ещё до рестайлинга она уже успела занять своё место в топовых комплектациях «Гранты») и изменена в деталях: у панели управления климатом новое обрамление в исполнении с климатической системой (которой также поделилась бывшая «Калина»), щеголяющее серебристой вставкой в тон рулю, облицовка центральных дефлекторов обзавелась рельефным «иксом», а у накладок над «бардачком» и монтажным блоком слева от руля новый рисунок. Ручки управления «автоматом» и роботизированной коробкой остались прежними, а вот рычагом для «механики» поделилась «Веста». И на сладкое самое главное: новый «ручник»! Да, теперь у трамвайно-диванных экспертов отобрали повод для дискуссий, ведь именно из-за этого «Гранта» и «Калина» не могли считаться автомобилями!

Техническая «начинка»

По технике изменений не так много, но это не умаляет их значимости. Например, исчез страшный ночной кошмар владельцев, пугающий сильнее, чем Фредди Крюгер, Джейсон Вурхиз и логотип телекомпании «ВИД» — история под названием «при обрыве ремня ГРМ, заклинивании роликов или помпы клапаны встретятся с поршнями». Не встретятся. Отныне и восьмиклапанные, и шестнадцатиклапанные двигатели объёмом 1,6 литра комплектуются новыми поршнями со специальными выемками, которые не дадут случиться крупным неприятностям.

В механической трансмиссии — главная пара с передаточным отношением 3,9 вместо 3,7, вторую передачу также сделали немного «короче», приблизив её к первой, облегчив жизнь синхронизаторам и обеспечив более плавный разгон. Автомат обошёлся без перемен, а вот «робота», похоже, довольно успешно учат ездить. Теперь он умеет «ползти» при отпущенной педали тормоза на манер классической гидромеханики, имеет спортивный и зимний режимы. Первый, как несложно догадаться, предусматривает улучшенное быстродействие, возможно, немного в ущерб комфорту, а второй даёт возможность тронуться со второй передачи, чтобы избежать пробуксовок на скользком покрытии.

Что в минусе?

Всё вроде замечательно. Думаете, где-то есть подвох? Не бывает ничего идеального? Правильно думаете. Серьёзных потерь нет, но всё же кое-что при обновлении исчезло вместе с именем «Калина». Не зря она стоила немного дороже...

Во-первых, это фары. Хороший свет является залогом комфорта и безопасности передвижения в ночное время и в условиях недостаточной видимости, и у «Калины» он был, без преувеличения, великолепным, одним из лучших в классе (где большинство машин раза в полтора дороже), не в последнюю очередь благодаря раздельным отражателям для ближнего и дальнего света под лампы Н7 и Н1. «Гранта» всегда уступала по этому показателю, и обновлённая модель тоже не дотянется до «Калины».

Во-вторых, наполнение комплектаций. Каким именем семейство назвали, от той машины комплектации и взяли. А это значит, что теперь только в «люксе» можно получить климат-контроль, центральный замок с дистанционным управлением, регулировку передних ремней безопасности по высоте, уплотнители по низу дверей, пластиковую облицовку порогов. Более того, если захочется управлять замками дистанционно и поставить стороннюю охранную систему, просто так вы этого не сделаете, потому что полный набор концевиков дверей тоже есть где? Правильно, только в топовой версии. Для остальных извольте докупить все, кроме водительского. Иначе говоря, формату «сел-поехал» теперь соответствует только самая дорогая модификация.

В-третьих, дизайн. Конечно, обновлённое семейство весьма симпатично, да и к освежённой корме седана меньше претензий. Но многих расстраивает то, что ВАЗ лишается самобытности моделей.

В целом, рестайлинг семейства «Лада Гранта», определённо, удался. Машины приятны на вид, соответствуют корпоративному дизайну, приобрели полезные доработки. Отмеченные минусы особо не мешали продажам «Гранты», а теперь, с подмогой в виде ещё двух типов кузова, она наверняка надолго захватит первое место на российском рынке. Тем более цены на автомобили выросли несильно, а на некоторые версии даже снизились.

орденов и наград Среднего царства

ордена и награды Среднего царства Из статьи, первоначально опубликованной в Tournament Illuminated # 110, Spring 1994.
последнее обновление: 23 июня 2009 г.

от госпожи Джессы д'Авондейл

Среднее царство, третье царство Общества творческого анахронизма, была основана в A.S. IV. +

Герб королевства - Argent, бледно-красный, в целом проход дракона. Верт, в первую очередь древняя корона Или в собственно лавровом венке. Драконы (или их части) включены во многие имена и жетоны наград королевства.


Патенты на оружие

Уходящие короли и королевы не получают патентов на оружие. Однако в середине Королевский Орден Первенства, Герцоги / Герцогини и Графы / Графини указаны перед обладатели патентов на оружие (рыцари, лавры и пеликаны).

Гранты вооружений

По усмотрению Короны любому лицу может быть предоставлено оружие. благодаря выдающимся достижениям в любой области.Великие офицеры королевства, получившим Грант, разрешено использовать герб дракона при отображении их руки. Другие держатели Грантов могут использовать Герб в соответствии с требованиями Короны.

Следующие награды несут с собой Грант оружия, если получатели еще не есть они:


Орден Сердца Дракона: вручается тем, кто выполнил услуги от имени королевства сверх того, что обычно ожидается.Соратники ордена могут поставить инициалы CDH после своих имен, и может носить медальон со знаком ордена: Argent, a heart vert чешуйчатый серебристый.

Орден Золотой Булавы: вручается соратникам Ордена Красного. Компания, показавшая мастерство и лидерство в рукопашном бою и / или турнирах. бой, и кто обучил других этим навыкам. Соратники ордена могут ставьте инициалы CGM после их имен.Те, кто не принадлежит к рыцарству может быть назван «лейтенантами Красной роты».


Орден компании Greenwood: награжден за превосходство в двух из трех области стрельбы из лука: искусство, обслуживание, искусство и наука. Спутники заказ может помещать инициалы CGC после их имен и может стилизовать себя как Лесники Зеленолесья. Значок заказа: (Без поля). На ветке сосен феон перевернул Or.

Компания Бронзового кольца: вручается тем, кто проявил превосходство и лидерство в рапирном бою, и кто обучил других этим навыкам. Соратники по приказу могут поставить инициалы ЦБ РФ после своих имен и могут называют себя Хранителями Бронзового Кольца.

Рота Белого Копья: вручается тем, кто проявил превосходство в два из трех направлений конной деятельности; мастерство, сервис, искусство и наука.Соратники отряда могут размещать инициалы CWL после своих имен.

Орден Вечнозеленых растений: вручается тем, кто учил и проявлял превосходство в одном или нескольких из искусств, наук или в исследованиях. Соратники заказа могут разместить инициалы CE после их имен. Знак заказа: (Бесполе) Сосна бледно-пурпурного цвета и Ор.

Оружейные награды

Звания придворного барона и баронессы присвоены усмотрение Короны признать благородство тех, кто был отличная услуга короне или королевству.Придворные бароны также обычно присуждается территориальным баронам и баронессам, когда они уходят. Согласно Корпорация, титул сопровождается Оружейной наградой, однако в середине Королевский Орден старшинства, придворные бароны и баронессы указаны перед обладатели грантов вооружений.

Награда за оружие может быть вручена по усмотрению Короны как отдельная награда или в сочетании со следующими наградами и орденами:


Орден Ивы: вручается тем, кто демонстрирует мастерство, но еще не мастерство в одном или нескольких искусствах.Соратники заказа могут разместить инициалы CW после их имен и могут носить медальон с изображением ордена знак: Purpure, ива уничтоженная Ор.


Орден Серебряного Дуба: вручается тем, кто проявляет мастерство, но не все же мастерство в одной или нескольких науках или исследованиях. Спутники орден может размещать инициалы CSO после их имен и может носить медальон со знаком ордена: Purpure, дуб вырублен и уничтожен серебристый фруктовый Or.


Награда Purple Fret: вручается физическим лицам за долгое и долгое время. преданное служение своей группе, офису или царству. Получатели награды может размещать инициалы APF после своих имен и может носить медальон с нагрудным знаком заказа: Или пурпурный лад. Эту награду можно получить более одного раза.

Награда Милости Лани (ранее - Благосклонность Королевы): вручается тем, кто продемонстрировали вежливость и благородство на поле и за его пределами, а также доброта к окружающим.Человек может получить эту награду более одного раза, и получатели могут носить медальон со значком ордена: Azure, a меч собственно enfiled венка цветов серебра, скольжения и листьев Or. Оригинальная награда была учреждена во времена первого правления герцогини Эйслинн. Пациент (на геральдическом гербе которого изображена лань), имя изменено на честь ее как памятник.

Награда Королевской чаши: вручаются тем, кто которые в глазах Государя проявили превосходство и подлинность в выбранное ими поле.Получатели могут поставить инициалы RKC после своих имен. An человек может получить эту награду более одного раза, Жетон представляет собой медальон со знаком ордена.

Орден Зуба Дракона: вручается тем, кто выполнил драматические подвиги в боевых искусствах от имени королевства, сверх того и за его пределами что обычно ожидается. Часто вручается поле в то время, когда дело было засвидетельствовано. Соратники ордена могут поместите инициалы CDT после их имен и можете носить клык, подвешенный на цепь или медальон со знаком ордена: Argent, на бледной вершине три клыка Или.


Орден Зуба Дракона: вручается тем, кто демонстрирует мастерство поле для стрельбы из лука, или образцовая служба в продвижении стрельбы из лука. Спутники орден может размещать инициалы CDB после их имен и может носить медальон со знаком ордена: Хвост дракона, бледный, зазубренный перед вождем, внутри и исходящий из кольцевой верт, чешуйчатый серебристый.


Орден Кавендишского узла: вручается тем, кто демонстрирует мастерство область боя на рапирах или образцовая служба в продвижении боя на рапирах.Соратники ордена могут размещать инициалы CCK после своих имен. и может носить медальон со знаком ордена: четыре кавендишских узла соединены крестом, верт.

Орден Белого Шамфрона: вручается тем, кто проявил мастерство в сфере конного спорта или образцовой службы в продвижении в этой сфере. Соратники ордена могут размещать инициалы CWC ​​после своих имен. и может носить медальон со знаком ордена: (Бесполевой) Chamfron argent.


Орден Красной роты: за лидерство в бою. Члены Орден, известный как Сержанты Красной Роты, должен быть опытными бойцами в ближнем бою, разбирается во многих стилях оружия, и лидеры своим примером как на, так и на вне поля битвы, работая, чтобы служить военным усилиям королевства и обучая и обучение других. Их поведение должно быть примером вежливости и чести. Знак ордена: Gules, две булавы с отбортовкой из серебра.

Орден открытой раны: вручается тем, кто на поле боя дрался, получил травму, потребовавшую хирургического вмешательства или другого госпитального ухода Соратники отряда могут ставить инициалы CGW после своих имен. Этот заказ был закрыт, чтобы подчеркнуть безопасное поведение в списках.

Награды без оружия

Следующие награды не означают оружия или превосходства:


Награда «Сокровище Дракона»: вручается молодежи, имеющей оказал образцовую службу королевству.Эту награду можно получить еще более одного раза, и получатели могут носить гербовую накидку или медальон с наградой знак: Драконья игра, стоящая в вертикальном положении, поддерживающая заряженный серебряный медальон. с бледно-красным цветом.

Награда Бантона: вручается молодежи, имеющей проявил рыцарство и энтузиазм в боевых искусствах. Эту награду можно получить еще чем однажды.

Награда Серебряного желудя: вручается молодежи, имеющей проявил энтузиазм и усилия в области искусства и науки.Эту награду можно получить еще чем однажды.


Награда Purple Fretty: аналогична Purple Fret, за службу филиалы, гильдии или другие организованные группы. Те группы, которых так почитают, могут нести знамя: Или пушисто-пурпурное, рядом с их знаменем.


Награда Зуба Дракона: , подобная Зубу Дракона, для групп кто преуспел в бою. Группы, удостоенные такой чести, могут нести знамя: Argent, на танце между двумя сломанными зубами дракона вертится еще один серебристый.


Награда Полета Дракона: , похожая на Зубец Дракона, для групп кто преуспел в стрельбе из лука. Группы, удостоенные такой чести, могут нести знамя: Argent, a бледный vert чешуйчатый серебристый между четырьмя феонами vert.


Награда Рощи: вручается филиалам, гильдиям или другим организованным группы, продемонстрировавшие мастерство в искусстве и / или науках, или образцовые услуги в продвижении таких полей.Эти прославленные группы могут нести знамя: Per pale Or и серебристый, быстро пурпурный.

Награда Сапфира: вручается тем, кто проявляет вежливость, грацию и честь людям всех рангов, которые являются примером «воплощения мечты». Получатели могут поставить инициалы RSL (Получатель сапфирового света) после своего имени, и может носить медальон со значком: (без поля) Драгоценный камень лазурный . Личность может получить эту награду более одного раза.

Орден Королевского авангарда: вручается тем, кто служил короне как чемпион короля или королевы. Соратники по заказу могут размещать инициалы CRV. после их имен.

Орден Розы: вручается тем, кто служил Консортом в хотя бы одно полное правление. Членство автоматически после схождения на престол. Посередине Орден существует с целью поощрения рыцарских и вежливое поведение среди всех членов Общества.

Увеличений оружия вручаются Короной тем лицам, которые дали так много и такого качества, что награды и награды Царство не выражают в достаточной степени того уважения, которым они пользуются. Каждый аугментация - это особый заряд, добавляемый к геральдическим оружие. Эта честь предоставляется редко.


> Вернуться к списку наградных статей

Сайт Поднебесной


Эта колонка была составлена ​​на основе закона Среднего царства (апрель 2000 г.) и "The Почести Среднего Царства ", баронесса Грейдни ни Руайд, Помощь оказали лорд Торвальд Рэдхейр (главный вестник драконов), лорд Гвилим. ap Alun (Trillium Herald), лорд Алан Fairfax Aluricson (Fenris Herald), Графиня Женевьев дю Вент Арджент, мастер Гарет Танкред Уилфрет, лорд Бервин Этельбрихт из Экли, Гриммунд Чернокрыл, леди Гвендолинн ферч Элидир и госпожа Кейтлин Дэвис.Иллюстрации наградных значков были предоставил Михаил Любельский.

Хозяйка Джесса д'Авондейл (Марла Лесин) проживает в Восточном Королевстве. Она приглашает всех, у кого есть обновления или исправления к этой статье, в свяжитесь с ней.

Датчик с генетическим кодированием на основе

FRET для мониторинга серебра Ионы

Абстракция

Серебро обычно используется в перевязке ран, фотографии, здоровье средства ухода, лаборатории, аптека, биомедицинские устройства и несколько промышленные цели.Ионы серебра (Ag + ) являются более токсичными загрязнителями широко разбросаны в открытой среде естественными процессами и рассредоточены в почве, воздухе и водоемах. Ag + связывается с металлотионеин, макроглобулины и альбумины, которые могут изменение различных ферментативных метаболических путей. Чтобы проанализировать поглощение и метаболизм ионов серебра in vitro, а также в клетках, создан ряд высокоаффинных наносенсоров на основе флуоресценции. с использованием периплазматического белка CusF , входящего в состав CusCFBA комплекс оттока, который участвует в обеспечении устойчивости к ионы меди и серебра в Escherichia coli .Этот наносенсор был построен путем объединения двух флуоресцентных белки (донор и акцептор) на N- и C-концах связывающего серебро белка ( CusF ) соответственно. SenSil (WT) с константа связывания ( K d ) 5,171 мкМ оказался более эффективным, чем его мутантные варианты (h46D и F71W). Этот наносенсор позволяет контролировать уровень ионов серебра в режиме реального времени у прокариот и эукариот без нарушения работы клеток или тканей.

1. Введение

Разное металлы оказывают прямое или косвенное воздействие на живые организмы.Они необходимы как важное питательное вещество в очень низких концентрациях. для различных физиологических и биохимических функций в организме. Высокая доза этих тяжелых металлов может быть вредной и вызывать побочные эффекты на здоровье человека. Токсичность металлов - серьезная угроза для окружающей среды а также для живых организмов. Различные металлы, такие как свинец, мышьяк, никель, серебро и медь вызывают бред и могут вызывать хронические заболевания. токсичность для человека. 1 Благодаря универсальности использование серебра в биомедицинских приложениях, токсичность серебра стала серьезная проблема.Серебро - белый блестящий переходный металл, имеющий незначительная токсичность для человека. 2 За счет нескольких антропогенной деятельности, свободные ионы серебра присутствуют в организме человека тело в незначительных концентрациях из-за вдыхания загрязнителей окружающей среды но не имеют следов металлов в организме человека. Преднамеренное использование серебра в изделиях медицинского назначения, стоматологических, антибактериальных и противогрибковых средства, косметика, средства по уходу за ранами и ожогами увеличивают потенциальное воздействие ионов серебра. 3 В последнее время использование серебра вызвало опасения по поводу аспектов безопасности и потенциала риски воздействия биологически активных ионов Ag + в окружающая среда и человеческое тело. 4 В настоящее время, серебро в сочетании с сульфадиазином обеспечивает более широкий спектр противомикробных агенты. 10 Серебро металлик и неорганические соединения соединения серебра ионизируются в водной среде и высвобождаются биологически. активные ионы Ag + . Эти активные ионы Ag + конкурируют с кинетикой гидратов воды и легко связываются и осаждаются с органическими и неорганическими катионами, которые увеличивают острую токсичность серебра. Текущие исследования показывают, что менее 10% токсичности серебра происходит при проглатывании человеком, 5 , но это сильно варьируется в зависимости от возраста, состояния здоровья, состояния питания и диетический состав.Лица, подверженные длительному воздействию серебра подвержены аллергическим реакциям, раздражению дыхательных путей тракта и сине-серого окрашивания кожи (аргирия). Проведенные исследования у пациентов с тяжелым аргирием указывают на то, что количество поглощенного серебра человеческим телом низка, но 18% ее остается в теле, что вызывает изменение цвета тканей. 6

В настоящее время токсические риски при приеме серебра с пищей и питьем вода низкая. Но прямое вдыхание паров / пыли серебра, лекарственного использование и профессиональное воздействие вызывают абсорбцию ионов Ag + через желудочно-кишечный тракт и эти частицы серебра накапливаются в костях, почках, печени и тканях кожи. 7 Благодаря антимикробным свойствам серебро также используется в качестве серебряно-медных фильтров в процессе очистки воды вместо хлора в больницах и ожоговых поликлиниках. Промышленные рабочие у которых длительное воздействие свободных ионов серебра показали повышенное концентрации в волосах, крови, моче и кале. 8,9 Вследствие их взаимодействия с различными биологическими молекулами, межклеточные белки и инактивация сульфгидрильной группы ферментов, Ионы Ag + могут оказывать цитопатогенное действие на клетки и ткани, такие как фибробласты десен человека, кератиноциты и эндотелиальные клетки. 10,11 Клинические и экспериментальные исследования указывают на что длительное воздействие ионов металлического серебра или ионизируемого серебра соединения могут вызывать токсичность для костей, почек, канцерогенность, бесплодие и нарушение роста плода. 12 Традиционные методы количественного определения ионов Ag + включают атомно-абсорбционная спектрометрия, 13 индуктивно масс-спектрометрия со связанной плазмой, 14 и ионоселективный электрод. 15 Однако дорогое оборудование, инвазивный характер, меньшая избирательность и чувствительность ограничивает применение этих традиционных методов. 16,17 Таким образом, создавая быстрый и простой альтернативный метод обнаружения ионов Ag + в реальном времени очень желательно. Диапазон биосенсоры на основе флуоресценции были разработаны для мониторинга серебра ионы в реальных образцах. A C – Ag + –C на основе структуры флуоресцентный биосенсор был разработан Li et al. (2019) 18 для обнаружения ионов Ag + в реальные образцы озерной воды и сыворотки крови человека. Они использовали структуру C – Ag + –C с усилением сигнала с помощью Exo III-ассистируемый процесс двойной рециркуляции для синтеза биосенсора.Устимова и др. (2018) 19 разработал Förster хемосенсор на основе резонансного переноса энергии (FRET) для логометрических обнаружение ионов металлов, включая ионы серебра. Этот датчик имеет корону с бисстириловым красителем, в котором оксокраун-эфир (донор) переносит энергия азадитиакраун эфира (акцептор). Хотя такие датчики для измерения ионов серебра есть на практике, но аналитические проблемы стандартизации, воспроизводимости, пробоподготовки и анализа сделать их более громоздкими в использовании.Органические красители, используемые в биосенсорах уязвимы для метаболической деградации. Из-за этих деградаций у них наименьшая фотостабильность. Эти красители снизили квантовую доходность и показал небольшой сдвиг Стокса. 20 Вкл. напротив, мы использовали различные мутантные варианты зеленого флуоресцентного белок в качестве замены этих токсичных красителей, чтобы ограничить их недостатки. Генетически кодируемый наносенсор на основе флуоресценции является эффективным устройство для количественного определения уровня метаболитов у прокариот и эукариоты неинвазивно.Однако генетически закодированный FRET датчик не был разработан для мониторинга ионов серебра в клетке. уровень в реальном времени. Поэтому мы создали линейку флуоресцентных ламп. генетически кодируемые биосенсоры для количественного определения ионов Ag + в клетках. Наше исследование показывает, что этот аналитический метод имеет большой потенциал и способен контролировать поток ионов Ag + в настоящее время.

2. Результаты и обсуждение

2.1. Генерация Наносенсора

CusF была используется для создания генетически закодированного FRET на основе наносенсор для контроля ионов серебра.Для разработки наносенсоров FRET, Были использованы флуорофоры ECFP (донор) и Венеры (акцептор), которые являются самая многообещающая флуоресцентная пара среди различных вариантов флуоресцентные белки. 21 Сигнальные пептиды были удалены, нуклеотидная последовательность гена Cus F была введена между ECFP (донор) и Венерой (акцептор) последовательности генов для конструирования SenSil, и эта последовательность была далее перемещаются в различные векторы экспрессии. Линейная диаграмма показывает положение сайтов рестрикции в конструкции наносенсора (А, Б).В близкие изменения в спектрах излучения обоих флуорофорных белков в связанном и несвязанном состояниях лиганда показаны на C. Эффективность FRET во многом зависит от ориентация диполя, расстояние близости между донором и акцептором флуорофоры (10–100 Å) и интенсивности излучения перекрываются между донорными и акцепторными флуорофорными белками.

(A) Строительство Генетически кодируемый датчик на основе FRET для ионы серебра. (B) Кристаллическая структура CusF. (C) Энергия иллюстрация передачи при отсутствии (слева) и наличии (справа) лиганд Ag + .

2.2. Экспрессия и очистка сенсора Белок

Сенсорную плазмиду трансформировали и экспрессировали. в Escherichia coli ( E. coli ) BL21 (штамм Codon Plus). Химерный белок (SenSil) был успешно очищен Ni-NTA агарозой на основе His-tag. смоляной аффинной хроматографии и подтверждено SDS-PAGE. Это очищенное белок был использован для исследования белка наносенсора in vitro.

2.3. Спектры излучения SenSil

спектральный анализ показал сдвиг в спектре излучения флуоресцентных белки в отсутствие и в присутствии ионов серебра.В отсутствие серебра не происходит изменений в спектре излучения. Сдвиг в спектр наблюдали при добавлении различных концентраций (1 и 5 мкМ) ионов серебра (). Спектральный профиль излучения ECFP (донор) и Венера (акцептор) показывает соответствующее изменение интенсивности излучения с добавлением ионов серебра. При увеличении концентрации ионов серебра основные конформационные изменения происходят в белке CusF что приближает два флуорофора достаточно близко, чтобы передать максимум энергия от ECFP до Венеры.Таким образом, интенсивность излучения ЭКФП снижается. и впоследствии интенсивность излучения Венеры увеличивается. 22 Связывание ионов серебра с периплазматическим связывающий белок (PBP) вносит конформационные изменения, которые привели к чтобы пары флуорофоров находились в непосредственной близости <10 нм, и в конечном итоге выполняет требования FRET.

Спектральный анализ наносенсора на основе FRET. Спектр излучения регистрировали после возбуждения сенсорного белка при 420 нм и регистрация излучения в диапазоне от 450 до 600 нм как в отсутствие и наличие ионов серебра.

2.4. Проверка стабильности pH SenSil

Очищенный наносенсорный белок был охарактеризован in vitro в различных буферные системы при различных значениях pH от 5,0 до 8,0. Среди использование различных буферных систем, построенный наносенсор показал максимальная стабильность в 3- N -морфолинопропане буфер сульфоновой кислоты (MOPS), поскольку наблюдались наименьшие изменения в соотношении с этим буфером (A). Для дальнейшего анализа сенсорный белок разводили в буфер MOPS.Чтобы оценить pH-стабильность SenSil, FRET соотношение регистрировали в физиологическом диапазоне pH (5,0–8,0). Добавление 1 мкМ иона Ag + к очищенному белку привело к существенным изменениям в соотношении FRET вплоть до pH 6,0, что позволяет предположить чувствительность сенсорного белка в кислотном диапазоне, при этом нет значительное изменение произошло в соотношении FRET выше pH 7,0, подтверждая стабильность наносенсора в щелочном диапазоне pH (B). Стабильность генетически кодируемого наносенсора в цитозольной и внутриклеточной pH делает его более совместимым для мониторинга ионов серебра в живых системы.

Анализ стабильности буфера SenSil. (A) Коэффициент интенсивности выбросов регистрировали в MOPS, фосфатно-солевом буфере (PBS) и Tris – Cl буфер с различными диапазонами значений pH. Датчик оказался стабильна в 20 мМ буфере MOPS, так как было отмечено наименьшее изменение соотношения FRET. наблюдается с этим буфером. (B) Стабильность наносенсора была проанализирована. в буфере MOPS в физиологическом диапазоне pH (от 5,0 до 8,0) в отсутствие и наличие 1 мкМ ионов серебра. Данные - это средства трех независимых повторяется ( n = 3).Вертикальные полосы обозначают стандарт ошибка.

2.5. Специфичность и влияние ионов металлов

Анализ специфичности in vitro SenSil проводился с использованием микропланшета. читатель, взяв серебро, марганец, железо, медь и никель в разные концентрации 100, 200 и 500 нМ, а также 1, 5 и 10 мкМ каждая. Значительное изменение соотношения FRET наблюдалось при добавлении концентрации ионов серебра 10 мкМ по сравнению с контролем (без серебра) (A). Влияние биологических ионов металлов (Na + , K + , Ca 2+ и Mg 2+ ) на специфичность белок наносенсора также наблюдали путем регистрации соотношения FRET (540/485 нм) после смешивания 180 мкл разбавленного белка с 20 мкл физиологической концентрации этих биологических ионов металлов.Нет значительные изменения наблюдались в соотношении FRET с этими металлами. ионы, что показывает эффективность SenSil по отношению к ионам серебра (B). Наносенсоры на основе FRET откройте окно для PBP. Эти наносенсоры являются наиболее подходящими кандидаты на домен, чувствительный к лиганду, которые связываются со специфическими подложки. 23 Петли-изгиб движения эти белки ответственны за основные конформационные изменения. Эти шарнирные движения трансформируются в ратиометрические изменения излучения интенсивности двух флуорофоров.Другие молекулы не показали любое значительное изменение отношения FRET, предполагающее, что датчик специфичен для ионов серебра.

Анализ специфичности SenSil in vitro. (А) Специфика сенсорный белок был подтвержден путем измерения отношения FRET в присутствии ионов различных металлов (Ag + , Mn 2+ , Fe 3+ , Cu 2+ и Ni 2+ ). (B) Эффект существенного ионы металлов, такие как NaCl, KCl, CaCl 2 и MgCl 2 , на эффективность наносенсора, который не влияет на специфика SenSil.Данные представляют собой средства трех независимых реплик. ( п = 3). Вертикальные полосы указывают стандартную ошибку.

2.6. Кривая насыщенности и близость Варианты SenSil

Кривая насыщения SenSil была рассчитана путем проведения измерения FRET с концентрациями ионов серебра в диапазоне 0,1–9 мкМ. В ответ на ион Ag + a была получена сигмовидная кривая насыщения, которая первоначально представляет максимальное изменение отношения интенсивностей эмиссии с 0,678 до 1.068 до концентрации ионов Ag + 7 мкМ и далее насыщать при 7–9 мкМ (). Определен диапазон сродства вариантов наносенсора. путем вычисления константы связывания ( K d ). Все показания были сняты в трех экземплярах с использованием считывающего устройства для микропланшетов. и SenSil связывается с ионом Ag + с аффинностью 5,171 мкМ. Для расширения физиологического диапазона SenSil, a набор вариантов сенсора был создан путем введения точечных мутаций с использованием сайт-направленного мутагенеза в связывающем мотиве белка.Два аффинных мутанта (h46D и F71W) были сформированы путем замены аминокислотные остатки. 24 Родство очищенный химерный сенсорный белок к различным концентрациям серебро определяли с помощью микропланшетного ридера. Данные показывают, что мутанты h46D и F71W имеют низкое сродство к серебру по сравнению с к сенсору дикого типа (WT) (Таблица 1). Рассчитанные значения K d вариантов h46D и F71W оказались 5,799 и 5,914 мкМ, соответственно. На основании значений константы сродства SenSil (WT) имеет наименьшее значение K d ; Таким образом, наносенсор WT был выбран и признан наиболее эффективным инструментом для исследования динамического потока ионов Ag + на клеточном уровне в как прокариоты, так и эукариоты.

In vitro лиганд-зависимая эмиссия FRET изменение WT и мутанта сенсоры в присутствии различных концентраций ионов серебра. Близость мутанты h46D и F71W были созданы и сравнены с сенсором WT. белок. Данные представляют собой средние значения трех независимых повторов ( n = 3). Вертикальные полосы указывают стандартную ошибку.

Таблица 1

Константы сродства привязки и динамические Диапазон SenSil-WT и его вариантов сродства a

904 динамический диапазон
Название сенсора b последовательностей K d (мкМ) (± SD d ) c (мкМ)
Sensil дикий тип 5.171 (± 0,003) 1,679–7,198
Sensil-36 h46D 5,799 (± 0,001) 2,039–6,879
Sensil-71 F71W 5,914 (± 0,001) 2,232–7,249

2.7. Мониторинг SenSil в бактериях и дрожжах

Для определения функции SenSil в клеточной системе, сенсор экспрессировался в цитозоле бактериальных клеток. Подвеска из выраженных E.coli BL21 (DE3) бактериальные клетки тестировали на наличие и отсутствие ионов серебра. Накопление и измерение метаболитов также проводились ранее. с использованием генетически кодируемого сенсора на основе FRET у прокариот. 25 При добавлении 5 мкМ серебра изменяется в соотношении FRET происходят значительно. Никаких существенных изменений в Отношение FRET наблюдалось в отсутствие ионов серебра. Коэффициент FRET суспензии клеток отчетливо увеличивалось с серебром через 5 мин. и насыщение при 55 мин ().Бактериальные клетки, содержащие pRSET-ECFP_ CusF _Venus, выращивали для экспрессии сенсорного белка и получали изображения. это показало успешное применение наносенсора.

На основе ячеек анализ наносенсора. Изменения соотношения FRET в бактериальной клетки, содержащие SenSil, регистрировали в ответ на 5 мкМ серебра в зависимости от времени. Данные представляют собой средства трех независимых реплик. ( п = 3). Вертикальные полосы указывают стандартную ошибку.

Для визуализации живых клеток SenSil в реальном времени в дрожжевая клетка, конструкция трансформировался в Saccharomyces cerevisiae (S.cerevisiae) BY4742. Для экспрессии сенсорного белка в дрожжах клетки выращивали в синтетической питательной среде определенного (SD) в течение 3–5 дней в присутствии 2% сахарозы и 3% галактозы в качестве источника углерода и индуктор соответственно. Визуализация живых клеток штамма BY4742 S. cerevisiae / URA3 показала экспрессию SenSil в цитозоле клетки и большей части клетки оставшаяся неокрашенной указывает на большую площадь вакуолей. Дрожжевые клетки затем инкубировали с 5 мкМ Ag + и изменение соотношение интенсивностей излучения контролировали в течение 10 мин с помощью LAS-AF. программное обеспечение конфокального микроскопа.Экспрессирующие дрожжевые клетки показали изменение интенсивности флуоресценции ECFP и Венеры (А). Ратиометрические изображения дрожжевых клеток также были получены при записи графика, указывает изменения в ячейке (B). Флуоресцентный наносенсор ответил к изменяющемуся уровню серебра, что позволяет характеризовать поглощения серебра с субклеточным разрешением. Ранее Fehr et al. 26 успешно охарактеризовали живые визуализация клеток с использованием наносенсоров на основе FRET для отслеживания потока мальтозы дрожжевые клетки (FLIPmal).

Количественная оценка динамического изменения скорости потока в реальном времени поглощения Ag + дрожжевыми клетками. (A) График показывает изменение в соотношение FRET в цитозоле дрожжевых клеток в присутствии 5 мкМ Ag + вместе с ратиометрическими изменениями в одном клетка. Изменение соотношения FRET указывает на импорт и привязку Ионы Ag + с SenSil. (B) Конфокальные изображения, показывающие цитозольный экспрессия SenSil в присутствии ионов Ag + в дрожжах ( с.cerevisiae ).

2.8. Мониторинг SenSil в клетках млекопитающих

Клетки эмбриональной почки человека (HEK-293T) использовали в качестве экспериментальной эукариотическая система для характеристики серебряного наносенсора. SenSil временно трансфицировали в клетки млекопитающих HEK-293T и конфокальная визуализация клеток проводилась через 2–3 дня. трансфекции для лучшей экспрессии сенсора с помощью Leica микроскоп, полученный в разных каналах (B). За потоком ионов серебра следили. неинвазивно в эукариотической системе.С добавлением серебра ионов, изменение отношения FRET не наблюдалось. Интенсивность излучения Венеры увеличился, а ECFP уменьшился в зависимости от времени. манера. Изменение отношения интенсивностей излучения регистрировалось в интервал 0–10 мин, который постоянно увеличивался с увеличением добавление 5 мкМ ионов серебра (А). Этот датчик имеет отличный потенциал для применяться для мониторинга ионов серебра в эукариотических организмах в режиме реального времени. клетки, не разрушая клетки. Ранее сообщалось что генетически закодированные наносенсоры на основе FRET обладают большой пропускной способностью для обнаружения и мониторинга метаболитов, таких как ионы металлов, в клетках и субклеточные компоненты клетки млекопитающего, как показано в случае внутриклеточные колебания вторичного мессенджера цАМФ. 27

Визуализация SenSil в клеточной линии HEK-293T в реальном времени. (А) НЕК-293Т клетки также трансфицировали SenSil и интенсивность эмиссии изменения коэффициентов зафиксированы за определенный период. График указывает изменение соотношения Венера / ECFP за 10 мин. (B) Конфокальные изображения, показывающие экспрессия SenSil в присутствии Ag + в HEK-293T клеточная линия. (C) Исследования жизнеспособности клеток ионов серебра на HEK-293T. Жизнеспособность клеток HEK-293T, обработанных увеличивающимися концентрациями ионов Ag + (0.01–20 мкМ) с использованием 3- [4,5-диметилтиазол-2-ил] -2,5-дифенилтетразолия бромид (МТТ) анализ. Процент жизнеспособности клеток рассчитывали относительно к необработанным контрольным клеткам.

2.9. Цитотоксические исследования

Токсичность ионы серебра плохо документированы, но несколько недавних случаев цитотоксичности in vitro исследования показывают, что ионы Ag + обладают способностью реагировать с сульфгидрильными группами, другими белковыми остатками и ферментами, которые связаны с клеточными мембранами, что приводит к денатурации, структурным повреждение и дисфункция митохондрий. 28 Культивированные клетки, подвергшиеся воздействию ионов серебра, показали измененную форму клеток и показали признаки окислительного стресса и повышенного перекисного окисления липидов. 29 Таким образом, цитотоксичность ионов серебра не может игнорировать. Чтобы определить цитотоксичность ионов серебра in vivo, исследования жизнеспособности клеток. Исследования клеточной токсичности были проводится в диапазоне концентраций серебра 0–20 мкМ ионы. Было обнаружено, что обработка Ag + не показывает значительная токсичность для клеток HEK-293T в исследуемой концентрации диапазон для 24-часовой выдержки (C).Результат определения жизнеспособности клеток показал, что лечение серебра становится токсичным при более высоких концентрациях (> 10 мкМ), но в диапазоне обнаружения наносенсора нетоксичен для клеток.

4. Методы и методология

4.1. Конструирование кассеты Construct

A был подготовлен присоединением донорного флуорофора (ECFP) и акцептора флуорофор (Венера) в векторе pRSET-B (Invitrogen, США). Грунтовки содержащие сайты рестрикции Bam HI на 5 ' end и Kpn I на 3 'конце вместе с фланкирующие основания распознавающих последовательностей использовали для усиление ECFP.Аналогичная стратегия использовалась для амплификации Венеры с использованием Kpn I и Hind III сайты ферментов на 5'- и 3'-концах соответственно. Последовательность и кристаллическая структура белка CusF (связывающая серебро домен) были получены из Национального центра биотехнологии Информационная база данных (NCBI) и банк данных по белкам. Сигнальные пептиды из 23 аминокислот от N-конца белка, связывающего серебро были идентифицированы с помощью сервера Signal P4.1 (CBS, Дания).Последовательности гена CusF амплифицировали из геномной ДНК E. coli Dh20β с рестрикцией участков кпн я на обоих концах. Конструкция наносенсора был разработан путем вставки амплифицированного гена CusF между ECFP и Венерой и верность конструкции pRSET-B-ECFP_ CusF _Venus была подтверждена полноразмерным секвенированием (рисунок S1). Затем эти последовательности были перенесены к вектору pYES-DEST52 (Invitrogen, США) через шлюз клонирования технологии с использованием фермента LR клоназы II в соответствии с рекомендациями производителя инструкции. Штамм S. cerevisiae / URA3 BY4742 был выбран в качестве эукариотического хозяина и трансформирован с помощью pYES-DEST-ECFP_ CusF _ Последовательность венуса. Штамм S. cerevisiae поддерживали на дрожжевом экстракте. пептон-декстроза (YEPD) агаровой среды и выращивание в жидкой среде YEPD при 30 ° C с аэрацией в шейкере. Конструкция была дальше клонировано в Bam HI и Hind III ограничение сайтов в эукариотическом векторе экспрессии pcDNA3.1 (-) (Invitrogen, USA) для экспрессии сенсорного белка в клетках HEK-293T.

4.2. Экспрессия и очистка сенсора Белок

Плазмида pRSET-B-ECFP_ CusF _Venus трансформирован в E. coli BL21 Codon Плюс компетентные клетки методом теплового шока. Для выражения наносенсора, белковые клетки выращивали в Luria – Bertani (LB) среда при 20 ° C и 150 об / мин путем добавления 100 мкг / мл ампициллина. в течение 22 ч, пока ОП не достигнет 0,4–0,6. Клетки были дополнительно индуцированы на 0,5 мМ IPTG и позволяли расти еще 20 ч в темноте.После 20 ч клетки собирали с помощью охлаждаемой центрифуги (Thermo Scientific, США) при 4500 об / мин в течение 30 мин и осадок клеток ресуспендировали. в 20 мМ Трис-Cl (pH 7,8). Лизис клеток проводился с помощью ультразвука. (Sonics, США) 5–6 мин с паузами 15 с. Бесклеточный лизат был получен центрифугированием при 4500 об / мин в течение 20 мин. Супернатант переносили на смолу Ni-NTA (Qiagen, Германия) и выдерживали при 4 ° C на качалке в течение 1 ч для связывания His-tagged сенсорный белок к смоле.Сенсорный белок очищали с помощью His-связывания. аффинная хроматография (Qiagen, Германия). Промывка колонки была выполняется с использованием ледяного промывочного буфера (20 мМ Tris – Cl, pH 8,0, 10 мМ имидазол), и сенсорный белок элюировали элюцией. буфер (20 мМ Tris – Cl, pH 7,8, 300 мМ имидазол). Очищенный белок был назван Sensor for Silver (SenSil) и хранился при 4 ° C. на ночь, чтобы обеспечить необходимое время для правильного складывания после очистки процесс.

4.3. Характеристика SenSil

in vitro 4.3.1. Спектральный анализ излучения SenSil

Флуоресценция анализ спектра излучения очищенного сенсора белка проводили с использованием считывающего устройства для микропланшетов-монохроматора (Synergy h2, BioTek, США) с добавлением и без добавления ионов серебра. Возбуждение проводился при 420 нм, а интенсивность эмиссии флуоресценции был зарегистрирован между 460 и 600 нм.

4.3.2. Тестирование Стабильность pH SenSil

Кинетика наносенсора изначально проводился в различных буферные системы, то есть 20 мМ PBS, забуференный трис физиологический раствор (TBS) и MOPS с изменяющимся значением pH.Чувствительность сенсорного белка был протестирован с этими буферами в широком диапазоне значений pH. В выделенный сенсорный белок разводили в 20 раз, используя соответствующие буферы. В другом исследовании стабильность сенсорного белка была протестировано с буфером MOPS в диапазоне pH 5,0–8,0 с добавление серебра и отсутствие серебра. Логометрический изменение отслеживали с помощью считывающего устройства для микропланшетов с использованием возбуждения фильтр 420/20 нм и комплект эмиссионных фильтров для ECFP и Venus было отрегулировано до 485/20 и 540/20 нм соответственно.

4.3.3. Специфичность и действие других биологических Ионы металлов

Для определения специфичности SenSil, различные ионы металлов. Коэффициент FRET был записан после добавления 20 мкл металлов Cu 2+ , Ag + , Ni + , Mn 2+ и Fe 2+ в шести различных концентрациях, то есть 100, 200 и 500 нМ и 1, 5 и 10 мкМ. Потенциал влияние биологически значимых ионов металлов, таких как Ca 2+ , Mg 2+ , Na + и K + , на обнаружение также была исследована специфичность наносенсора.Изменение в Соотношение интенсивностей флуоресценции контролировали после добавления 1 мкМ ионы серебра.

4.3.4. Кривая насыщенности и Мутанты сродства

Проверяли сродство наносенсора измеряя FRET ответы на возрастающие концентрации Ag + , и константа сродства ( K d ) была рассчитана аппроксимируя кривую на изотерме привязки

, где S - насыщение, [ L ] - концентрация лиганда, r - концентрация лиганда. коэффициент, r апо - коэффициент при отсутствии лиганда, а r sat - соотношение при насыщение лигандом определяли с помощью программного обеспечения GraphPad Prism 7.Чтобы увеличить физиологическое обнаружение, диапазон датчика серебра, точечные мутации были введены для развития аффинных мутантов датчик с помощью набора для сайт-направленного мутагенеза QuikChange. С использованием Получены данные из кристаллической структуры CusF , 2 двух аффинных мутантов. Мутанты были созданы путем замены аминокислотных остатков в связывающем карман связывающего белка CusF и гистидин был заменен аспарагиновой кислотой (h46D) в положении 36 и фенилаланином 71 был заменен на триптофан (F71W) (Рисунок S2).Для дальнейшего анализа эти мутанты по аффинности были экспрессированы и очищен как датчик WT.

4.4. В реальном времени Мониторинг серебра в бактериях и дрожжи

Эксперименты на клетках были выполнены на основе работы Soleja et al. 30 и Капер и другие. 31 Монохромный считыватель микропланшетов был использован для количественной оценки изменений соотношения FRET от E. coli BL21 Codon Plus (DE3), экспрессирующие SenSil. Клетки выращивали на среде LB в течение 3 суток при 20 ° С. ° C в темноте.Суспензия бактериальных клеток (180 мкл) был объединен с 20 мкл 5 мкМ ионов Ag + и распределено в трех экземплярах в каждую лунку микропланшета. Датчик ответ на излучение флуоресценции в виде сигнала FRET был сообщается с регулярными интервалами в 5 минут, всего 65 минут. Конфокальный микроскоп (Leica, Wetzlar, Германия) с конфокальной головкой TCS-SPE, объектив 63 × с числовой апертурой 1,53 и сопряженная камера использовался для проверки выражения и получения изображений SenSil после фиксации экспрессированных бактериальных клеток медицинским клеем на предметном стекле.

Сенсорный белок был экспрессирован в дрожжи, и конструкция была перенесена в дрожжевую экспрессию вектор pYES-DEST52, содержащий промотор GAL1, с использованием шлюза технология. S. cerevisiae / URA3 штамм BY4247 использовали и поддерживали на среде SD с добавлением с 2% сахарозы и 3% галактозы при 30 ° C в условиях аэрации на роторный шейкер-инкубатор на 3–5 дней. Визуализация выраженных дрожжевых клеток выполняли с помощью конфокального микроскопа (Leica DMRE) оснащен конфокальной головкой TCS-SPE (Leica, Wetzlar, Германия).В дрожжевые клетки фиксировали на предметных стеклах с помощью медицинского клея. и покрыт покровным стеклом, покрытым поли-L-лизином. Измерять поток ионов серебра в дрожжевые клетки, соотношение интенсивностей эмиссии изменение регистрировали с помощью программного обеспечения LAS-AF (Leica, Wetzlar, Германия) с возбуждением 420/20 нм и двумя фильтрами излучения, то есть 485/20 нм для донорского ECFP и 540/20 нм для акцепторной Венеры. Изменение в соотношение интенсивностей флуоресценции контролировали в течение 10 мин после добавления 5 мкМ ионов Ag + .Выбран интересующий регион для расчета изменения коэффициента интенсивности в реальном времени.

4.5. Мониторинг SenSil в ячейках HEK-293T

Для мониторинга поток ионов серебра в клетки млекопитающих, конструкция был перемещен в вектор экспрессии млекопитающих pcDNA3.1 (-). Клетки HEK-293T культивировали при 37 ° C на Dulbecco’s модифицированная среда Орла (DMEM, Sigma, США) с 10% плода теленка сыворотка, 50 мкг / мл ампициллина и 5% CO 2 . Эти клетки помещали в 6-луночные культуральные планшеты и трансфицировали pcDNA-ECFP_ CusF _Venus с использованием реагента для трансфекции липофектамина.Для экспрессия наносенсора, клетки выращивали в течение 2 дней. FRET отношение изображений клеток HEK-293T было выполнено через 2 дня трансфекции. с помощью конфокального микроскопа (TCS-SPE, Leica, Германия) с числовой апертурой 1,53, 63-кратный масляный иммерсионный объектив и охлаждаемая камера с зарядовой связью.

4.6. Исследования клеточных культур и цитотоксичности

Культуру клеток HEK-293T поддерживали в среде DMEM с добавлением 10% инактивированного нагреванием FBS и 1% коктейль антибиотик-антимикотик (пенициллин, стрептомицин и амфотерицин-B) в увлажненной камере CO 2 (5% CO 2 , 37 ° C).Стандартный МТТ Анализ был использован для оценки уровня токсичности ионов серебра. Вкратце, клетки (9000–10 000 клеток / лунку) высевали в 96-луночный культурная пластина. Клетки инкубировали в инкубаторе CO 2 . в течение 24 часов при 37 ° C. После 80% слияния старые медиа были удаляли, и клетки обрабатывали увеличивающимися концентрациями ионов серебра (0–10 мкМ) в течение 12 ч. Эксперимент был повторяется в трех экземплярах. После инкубации клетки промывали и далее инкубировали в течение 4–5 ч со 100 мкл неполного Среда DMEM и 10 мкл раствора МТТ (взятого из исходного раствора 5 мг / мл) при 37 ° C в инкубаторе CO 2 .Надосадочные среды клеток заменяли 150–200 мкл диметилсульфоксида. для растворения оставшихся черных нечетких кристаллов (формазана) на рокер-шейкер. Формазан растворяется и приобретает пурпурно-синий цвет. После 30 мин. Оптическую плотность полученного раствора измеряли при длиной волны 570 нм с использованием микропланшетного ридера ELISA (Bio-Rad). Ну наконец то, была определена жизнеспособность клеток и построен график. против концентраций ионов серебра.

Лады Бадди Холли не исчезнут: творить музыкальную историю с Винсом Гиллом и Эми Грант

«Любовь по-настоящему, не угаснет.”

Чарльз Хардин Холли и Норман Петти

Что ж, этот лад может и не исчезнуть, но я собираюсь отрезать его, чтобы разделить его пополам. Видите ли, я нахожусь в середине одного из самых исторических, пугающих и романтических моментов в моей жизни. Я являюсь одним из основателей правления Guitar Foundation Бадди Холли. Как я уже писал в блоге, у нас есть оригинальные лады от Gibson J-45 1942 года, на которые Бадди написал многие из своих самых запоминающихся мелодий. Я устанавливаю эти лады на пластинки, похожие на лейблы, которые входят в 19 гитар, которые мы одалживаем таким людям, как Пит Тауншенд, Брайан Мэй, Джексон Браун, Грэм Нэш, Фил Эверли, Джеймс Бертон, Альберт Ли и Уодди Вахтель. .Мы назвали гитару в честь любимой мелодии Бадди исполнителя и выгравировали название песни на грифе и на кожаном переплете ручной работы. Каждый артист получает свою гитару сроком на два года, который может быть продлен с согласия артиста и правления Фонда. Когда пришло время передать гитару другому исполнителю, текущий исполнитель назначит преемника. Гитары никогда не будут проданы, никогда не уйдут в музей, никогда не перестанут заниматься музыкой. На вечность гитары и эти 18 (да, один лад был потерян из-за разрушительного воздействия времени, и, да, я устанавливаю 18 ладов на 19 гитар), блестящие кусочки никелевого серебра распространят радость песни, осветят наследие Бадди, и собирать деньги на школьные музыкальные программы по всему миру.

Для меня это особенно знаменательный случай. Винс и Эми собираются поделиться «Not Fade Away Fret». Итак, я сейчас раскалываю ее и приклеиваю на деревянную доску, изготовленную Gurian Instruments, которую я спроектировал. Когда я достал резак, я решил сфотографировать этот повод для потомков. Ранее я измерил каждый лад до 1/64 дюйма и попросил Гуриана вырезать идеально подходящие отверстия на пластинах. Слоты на had today составляют половину точной длины лада Not Fade Away.

Как документально фото документально, несмотря на историческую нагрузку, я не промахнулся. Я должен был сделать это правильно. Бадди - это наследие, которое не исчезнет, ​​а Винс и Эми - это любовь, которая не исчезнет.

The Not Fade Away Fret, готовый к сокращению вдвое

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Спектральная фокусировка широкополосной электролюминесценции серебра в наноскопических FRET-светодиодах

  • 1

    Непийко, С.A. et al. Излучение света кластерными пленками Ag при возбуждении током проводимости. Ann. Phys . 9 , 125–131 (2000).

    CAS Статья Google Scholar

  • 2

    Borzjak, P.G. et al. Neue Erscheinungen in sehr dünnen Metallschichten. Phys. Стат. Sol . 8 , 55–58 (1965).

    Артикул Google Scholar

  • 3

    Ламбе, Дж.и другие. Излучение света при неупругом электронном туннелировании. Phys. Rev. Lett . 37, , 923 (1976).

    CAS Статья Google Scholar

  • 4

    Gonzalez, J. I. et al. Квантово-механический электролюминесцентный источник света на основе одного нанокластера золота при комнатной температуре. Phys. Rev. Lett . 93 , 147402 (2004).

    Артикул Google Scholar

  • 5

    Ли Т.H. et al. Одномолекулярная оптоэлектроника. В соотв. Chem. Res . 38 , 534–541 (2005).

    CAS Статья Google Scholar

  • 6

    Kern, J. et al. Оптические антенны с электрическим приводом. Nat. Фотон . 9 , 582–586 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 7

    Nilius, N. et al. Фотонная эмиссионная спектроскопия отдельных кластеров серебра на оксидной основе в сканирующем туннельном микроскопе. Phys. Rev. Lett . 84 , 3994 (2000).

    CAS Статья Google Scholar

  • 8

    Berndt, R. et al. Неупругое туннельное возбуждение индуцированных иглой плазмонных мод на поверхности благородных металлов. Phys. Rev. Lett . 67 , 3796–3799 (1991).

    CAS Статья Google Scholar

  • 9

    Chen, C. et al. Визуализация золотого правила Ферми посредством визуализации светового излучения цепочек атомов серебра. Наука 325 , 981–985 (2009).

    CAS Статья Google Scholar

  • 10

    Mak, K. F. et al. Атомно тонкий MoS2: новый прямозонный полупроводник. Phys. Rev. Lett . 105 , 136805 (2010).

    Артикул Google Scholar

  • 11

    Mueller, T. et al. Эффективное узкополосное излучение света от одиночного p – n-диода из углеродных нанотрубок. Nat. Нанотехнологии. 5 , 27–31 (2010).

    CAS Статья Google Scholar

  • 12

    Klein, D. L. et al. Одноэлектронный транзистор из нанокристалла селенида кадмия. Nature 389 , 699–701 (1997).

    CAS Статья Google Scholar

  • 13

    Schneider, N. L. et al. Оптический зонд уменьшения квантового дробового шума при одноатомном контакте. Phys. Rev. Lett . 105 , 026601 (2010).

    Артикул Google Scholar

  • 14

    Coe, S. et al. Электролюминесценция одиночных монослоев нанокристаллов в молекулярно-органических устройствах. Nature 420 , 800–803 (2002).

    CAS Статья Google Scholar

  • 15

    Achermann, M. et al. Накачка с переносом энергии полупроводниковых нанокристаллов с использованием эпитаксиальной квантовой ямы. Nature 429 , 642–646 (2004).

    CAS Статья Google Scholar

  • 16

    Castellanos-Gomez, A. et al. Детерминированный перенос двухмерных материалов методом сухой вязкоупругой штамповки. 2D Материал . 1 , 011002 (2014).

    Артикул Google Scholar

  • 17

    Baugher, B. W. H. et al. Оптоэлектронные устройства на основе электрически перестраиваемых p − n-диодов в однослойном дихалькогениде. Nat. Нанотех . 9 , 262–267 (2014).

    CAS Статья Google Scholar

  • 18

    Ross, J. S. et al. Электроперестраиваемые экситонные светодиоды на основе однослойных p − n-переходов WSe2. Nat. Нанотех . 9 , 268–272 (2014).

    CAS Статья Google Scholar

  • 19

    Sundaram, R. S. et al. Электролюминесценция в однослойном MoS2. Нано Летт . 13 , 1416–1421 (2013).

    CAS Статья Google Scholar

  • 20

    Silly, F. et al. Автокорреляция по времени в излучении фотонов с металлической поверхности, индуцированном сканирующим туннельным микроскопом. Заявл. Phys. Lett . 77 , 3648 (2000).

    CAS Статья Google Scholar

  • 21

    Барнс, В. Л. Флуоресценция вблизи границ раздела: роль плотности фотонных мод. J. Mod. Опция . 45 , 661–699 (1998).

    CAS Статья Google Scholar

  • 22

    Чижик А.И. и др. Передача энергии под действием металлов для наноскопии живых клеток. Nat. Фотон . 8 , 124–127 (2014).

    CAS Статья Google Scholar

  • 23

    Дрексхаге, К. Х. Влияние диэлектрической границы раздела на время затухания флуоресценции. Дж. Люмин . 1 , 693–701 (1970).

    Артикул Google Scholar

  • 24

    Swathi, R. S. et al. Дальнодействующий резонансный перенос энергии от молекулы красителя к графену имеет зависимость (расстояние) (- 4). J. Chem. Phys . 130 , 086101 (2009).

    CAS Статья Google Scholar

  • 25

    Prins, F. et al. Уменьшение диэлектрического экранирования и улучшенная передача энергии в однослойном и малослойном MoS2. Нано Летт . 14 , 6087–6091 (2014).

    CAS Статья Google Scholar

  • 26

    Raja, A. et al. Передача энергии от квантовых точек к графену и MoS2: роль поглощения и экранирования в двумерных материалах. Нано Летт . 16 , 2328–2333 (2016).

    CAS Статья Google Scholar

  • 27

    Poellmann, C.и другие. Резонансные внутренние квантовые переходы и фемтосекундный радиационный распад экситонов в монослое WSe2. Nat. Mater . 14 , 889–893 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 28

    Черников А.А. и др. Энергия связи экситона и неводородный ряд Ридберга в монослое WS2. Phys. Rev. Lett . 113 , 076802 (2014).

    Артикул Google Scholar

  • 29

    Li, Y.и другие. Измерение оптической диэлектрической функции однослойных дихалькогенидов переходных металлов: MoS2, MoSe2, WS2 и WSe2. Phys. Ред. B 90 , 205422 (2014).

    Артикул Google Scholar

  • 30

    Plechinger, G. et al. Контроль двухосной деформации однослойного молибденита с помощью локального теплового расширения подложки. 2D Материал . 2 , 015006 (2015).

    Артикул Google Scholar

  • 31

    Чаудхури, Д.и другие. К субдифракционной просвечивающей микроскопии диффузных материалов с использованием маяков белого света с наночастицами серебра. Нано Летт . 9 , 952–956 (2009).

    CAS Статья Google Scholar

  • 32

    Bao, W. et al. Визуализация наноразмерных свойств экситонной релаксации неупорядоченных краев и границ зерен в монослое дисульфида молибдена. Nat. Коммуна . 6 , 7993 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • Высокочувствительные гомогенные иммуноанализы на основе построения серебряных треугольных нанопластин-квантовых точек Система FRET

    Усовершенствованный синтез STNP представлял собой метод роста, опосредованного семенами, в соответствии с нашим предыдущим методом 19 .Во-первых, соли серебра восстанавливали сильным восстановителем для получения затравочных частиц. После этого частицы затравки серебра немедленно облучали натриевой лампой (70 Вт) в течение 2 часов. Вкратце, треугольные нанопластинки с пиком поглощения плазмона при 613 нм были синтезированы с использованием цитратной кислоты в качестве поверхностного лиганда 19,21 . На рисунке S1 в вспомогательной информации схематически показан процесс роста очень однородных и неоднородных STNP. Высокооднородные STNP (см. FESEM на рис.2) были приготовлены дополнительным контролем ОН - . Как показано на рисунке S2 в вспомогательной информации, малое увеличение FESEM и узкое распределение размеров STNP хорошо подтверждают высокое качество и высокую однородность подготовленных STNP. Без добавления OH - полученные STNP имеют неоднородную морфологию, размер и широкое распределение по размерам (см. FESEM на рисунке S3), что подтверждается расширением полной ширины на полувысоте (fwhm) спектра поглощения плазмонного резонанса. (Рисунок S3 во вспомогательной информации).Очевидно, что значение fwhm может быть уменьшено со 117 нм до 83 нм после введения OH - . Это связано с тем, что введение OH - может равномерно подавить скорость генерации ионов серебра в сумме 19 . Мы действительно наблюдали, что окисление наночастиц серебра, очевидно, сдерживалось введением OH - . Хотя световое облучение ускоряет процесс окисления небольших наночастиц серебра из-за повышения температуры, ионы OH - , по-видимому, эффективно подавляют побочный эффект.Следовательно, введение OH - может ингибировать окисление наночастиц серебра и замедлить скорость генерации ионов серебра, что благоприятно для кинетического контроля роста 19,21 . Как показано на рис. 2, длина стороны треугольных нанопластин составляет около 70 нм. В нашем случае настроенные по размеру красные КТ (λ em = 612 нм) были выбраны в качестве донора для HIA, потому что они хорошо совпадают с полосой поглощения локализованного плазмонного резонанса STNP.

    Рис. 2: FE-SEM изображение STNP, полученное с помощью нашего метода, а также нормализованный спектр поглощения STNP и спектр PL квантовых точек.

    Масштабная линейка составляет 200 нм.

    Поскольку QD и STNP были закрыты отрицательно заряженными лигандами 3-меркаптопропионовой кислоты и лимонной кислоты, соответственно, таким образом, когда QD и STNP были смешаны вместе в одном сосуде, они не могли объединиться друг с другом из-за электростатического отталкивания. сила. Следовательно, ФЛ квантовых точек будет оставаться постоянной. Как показано на рис. 3 и 4а, когда объем СТНЧ, добавленных в раствор КТ, был увеличен с 5 до 10, 20, 40 мкл и выше, интенсивность ФЛ КТ почти осталась постоянной.Однако, когда модифицированные этилендиамином STNP были добавлены в раствор QD, QD могли легко объединиться с STNP через мостиковую связь этилендиамина из-за электростатического взаимодействия. Следовательно, фотолюминесценция квантовых точек будет эффективно подавляться STNP из-за безызлучательного процесса FRET. Цифровые фотографии раствора КТ до и после добавления STNP, модифицированных этилендиамином, при возбуждении ультрафиолетовой лампой показаны на Рисунке S4 во вспомогательной информации.Невооруженным глазом можно наблюдать, что флуоресценция КТ резко гасится после введения модифицированных этилендиамином СТНЧ. Как показано на рис. 3 и 4b, когда объем модифицированных этилендиамином СТНЧ, добавленных в раствор КТ, был увеличен с 5 до 10, 20, 40 мкл и выше, интенсивность ФЛ КТ резко снизилась, и тушение приблизилось к насыщению до достижения насыщения. объем СТНП достигал около 160 мкл.

    Рис. 3

    Схема механизма гашения на основе FRET от КТ до модифицированных этилендиамином СТНЧ.

    Рисунок 4

    Изменение интенсивности ФЛ на пике эмиссии КТ после добавления различных объемов STNP ( a ) и STNP, модифицированных этилендиамином ( b ). Объем STNP увеличен с 5 до 10, 20, 40, 80 и 160 мкл. Концентрация квантовых точек была зафиксирована на уровне 14 нМ. На вставке - соответствующая эволюция спектров ФЛ квантовых точек.

    Эффективность FRET можно оценить как Ф FRET = 1 - I DA / I D , предполагая, что другие механизмы гашения, такие как реабсорбция, незначительны, где I DA и I D представляют собой интенсивность флуоресценции донора FRET с и без присутствия акцептора FRET, соответственно 1,3 .Согласно спектрам ФЛ, показанным на рис. 4б, эффективность FRET могла достигать 98% для КТ в точке насыщения тушения. Такая высокая эффективность FRET демонстрирует синергетический эффект благодаря свойствам настоящей конструкции 3 . Во-первых, STNP имеют большую площадь поверхности и отсутствие кривизны, что может усилить участки тушения и повысить эффективность тушения. Во-вторых, СТНП имеют большой коэффициент экстинкции. Коэффициент экстинкции STNP составляет около 10 12 M -1 см -1 (подробности см. Во вспомогательной информации), что примерно на 2–3 порядка величины выше, чем у наночастиц золота, и даже на 7–8 на порядки выше, чем у флуоресцентных красителей.В-третьих, спектры STNP и QD идеально перекрываются благодаря рациональной перестройке спектров наших специально разработанных доноров QD и акцепторов STNP. Очевидно, что чем больше перекрываются спектры между донором и акцептором, тем выше будет эффективность FRET. Наконец, поглощение СТНЧ при возбуждении донора, например, 400 нм для квантовых точек, невелико, что максимально устранит неблагоприятное влияние эффекта FRET. Поскольку тушение PL QD коррелирует с дозировкой STNP, мы могли бы выполнить HIA на основе тушения флуоресценции QD, когда высокоэффективные и надежные QD функционировали как индикаторный агент обнаружения.

    В этой работе был выбран вирус гепатита В для проведения ОВЗ на основе наноплатформы QDs-STNPs FRET. Схематический путь HIA HBsAg представлен на рис. 1. STNP, иммобилизованные с HBsAb1 на поверхности, используются в качестве акцепторов FRET. С другой стороны, излучающие красный цвет КТ (λ em = 612 нм), иммобилизованные HBsAb2 посредством ковалентного связывания (рисунок S5 в вспомогательной информации), используются в качестве доноров FRET. Добавление аналита HBsAg к раствору HIA запускало иммунные реакции, индуцированные сэндвич-конструкцией, что приводило к коррелированным с концентрацией Ag процессам FRET.Перед тестом на обнаружение сначала смешивали STNP-Ab1 и QD-Ab2 в гомогенном растворе. Когда аналит Ag был добавлен в раствор, сэндвич-структура STNPs-Ab1 / Ag / QDs-Ab2 будет формироваться из-за иммунных реакций, и FRET от QD до STNP будет происходить спонтанно.

    Как показано на вставке к фиг. 5 и цифровой фотографии набора КТ на фиг. 6, тушение ФЛ демонстрирует развивающийся процесс FRET по сравнению с увеличением концентрации HBsAg.Кривые обнаружения были получены путем вычитания интенсивности ФЛ контрольного образца QDs-Ab2 без Ag и сэндвич-структур STNPs-Ab1 / Ag / QDs-Ab2 с Ag. На рис. 5а, б показаны спектры ФЛ системы HIA с различными концентрациями антигенов, когда дозовая концентрация QDs-Ab2 составляла 7 нМ и 0,35 нМ соответственно. Было замечено, что интенсивность флуоресценции монотонно увеличивалась с постепенным увеличением концентрации Ag до 160 нг / мл -1 для более высокой концентрации QD и 8.1 нг мл -1 для более низкой концентрации КТ, соответственно. Следовательно, диапазон обнаружения HBsAg может достигать 160 нг / мл -1 для этого HIA. После линейной аппроксимации линейная калибровочная кривая может быть получена как Y = 86,0671X - 148,2 (5 ≤ X ≤ 40 нг мл -1 , R = 0,997) для более высоких доз HBsAg и Y = 1088,7X - 93,96 (0,3 ≤ X ≤ 2,7 нг / мл -1 , R = 0,999) для обнаружения HBsAg с более низкой дозировкой соответственно. Предел обнаружения (LOD) был определен как самая низкая концентрация обнаруженного образца, которая дает положительное значение вычитания интенсивности PL между контрольным и обнаруженным образцом 1,22 .Из фиг. 5b отчетливо видно, что вычтенная интенсивность PL все еще оставалась положительной, даже когда концентрации HBsAg были такими низкими, как около 300 пг / мл -1 для HIA, когда применялась более низкая дозированная концентрация. Таким образом, LOD этого HIA может достигать всего 300 пг / мл -1 . В результате мы можем выполнять чрезвычайно точное обнаружение в относительно широком диапазоне концентраций и требования к высокочувствительному обнаружению (например, 300 пг / мл -1 ~ 160 нг / мл -1 ).Здесь LOD в 27,7 раз ниже, чем предыдущий результат при использовании золотых наностержней (GNR) в качестве акцептора FRET (8,3 нг / мл -1 ) 1 , что связано с более высокой эффективностью FRET, как обсуждалось выше. Соответствующие параметры STNP и GNR показаны в таблице S1; сравнение объясняет причину более высокой эффективности FRET и более низкого LOD обнаружения антигена при использовании STNP. Одним словом, нельзя игнорировать две причины: во-первых, STNP имеют большую площадь поверхности и отсутствие кривизны, что может усиливать участки тушения и повышать эффективность FRET.Во-вторых, СТНЧ имеют больший коэффициент экстинкции по сравнению с наночастицами золота. Теоретически, когда концентрация аналита Ag превышает насыщенную концентрацию меченого Ab, например, 320 нг мл -1 для HBsAg в иммуноанализе с более высокой концентрацией Ag и 24,3 нг мл -1 для HBsAg в иммуноанализе с более низкой концентрацией Ag , ответа на иммуноферментный анализ быть не должно. Фактически, кривая обнаружения немного снизилась. Это связано с тем, что добавление детектированного HBsAg к набору заменило сэндвич-Ag ​​и привело к восстановлению флуоресценции квантовых точек (рис.7).

    Рис. 5

    Обнаружение антигена на основе FRET с предоставленной концентрацией QDs-Ab 7 нМ ( a ) и 0,35 нМ ( b ). Связь между вычтенной интенсивностью PL (I 0 -I) QDs-HBsAb в присутствии STNPs-Ab1 и обнаруженным HBsAg с различными концентрациями. На вставке - соответствующее изменение спектров ФЛ квантовых точек.

    Рисунок 6

    Цифровая фотография набора КТ до ( a ) и после ( b ) обнаружения антигена на основе FRET при возбуждении ультрафиолетовой лампой.Слева направо концентрация обнаруженного антигена увеличивается от 0 до 2,5, 5, 10, 20, 40, 80, 160 и 320 нг / мл. Каждая концентрация антигена определяется статистикой пяти параллельных образцов.

    Рис. 7

    Схема механизма восстановления флуоресценции, вызванного перенасыщенным детектируемым Ag.

    Специфичность иммунного обнаружения в основном зависит от иммунореактивности меченых моноклональных антител. Чтобы доказать высокую обнаруженную специфичность нашей ОВЗ на основе FRET, мы также выполнили некоторую неспецифическую диагностику.Для подтверждения специфичности был проведен контрольный тест с применением 1% раствора BSA в качестве образца аналита. Поскольку как структура, так и морфологические свойства HBeAg и HBsAg подобны друг другу, необходимо обнаруживать HBeAg для дальнейшего подтверждения специфичности HIA. Результаты показаны на фиг. 8, на которой интенсивность флуоресценции нормализована к значению обнаружения HBsAg с учетом специфичности HBsAg за 100%. Когда конъюгаты QDs-HBsAb используются для обнаружения неспецифического связывания HBeAg, может наблюдаться низкая интенсивность флуоресценции.Этот феномен означает, что имелось 8,6% неспецифического связывания HBeAg. Аналогичным образом, когда конъюгаты QDs-HBsAb используются для обнаружения неспецифического связывания образца BSA, при тех же условиях обнаружения наблюдается только небольшой сигнал PL. Это явление означает, что неспецифичность в отношении молекул BSA составляет лишь 5,6%. Очевидно, что HIA с использованием конъюгатов QDs-HBsAb очень специфичен для обнаружения HBsAg, поскольку специфичность превышает 90%. В результате наша HIA, основанная на наноплатформе FRET QDs to STNPs, заслуживает доверия и осуществима.

    Фигура 8

    Специфичность экспериментов по неспецифическому связыванию BSA (1%) и HBeAg с использованием гомогенного иммунного детектирования на основе FRET с учетом специфичности HBsAg за 100%.

    Грантополучатели CHIF 2019

    Получатели гранта CHIF Пожилые люди Снейк-Ривер благодарны за поддержку Святого Луки.

    Многие некоммерческие организации часто беспокоятся о сборе средств, пытаясь найти баланс между выполнением своей миссии и сбором денег.

    ул.У Люка недавно была возможность помочь облегчить некоторые из этих опасений, инвестировав 650 000 долларов в гранты Фонда улучшения общественного здоровья некоммерческим организациям в Большой Долине Сокровищ, Горном доме, Вуд-Ривер и Макколле. (В этом году St. Luke’s вложит дополнительно 290 000 долларов в Magic Valley.)

    Сотрудники и волонтер Сент-Люка помогли доставить несколько чеков на гранты, что принесло улыбки и радость многим некоммерческим командам, включая девочек-скаутов Silver Sage.

    «Мы благодарны за поддержку Санкт-Петербурга.Люка для двух очень важных программ - Outdoor Adventure и Visions - и для нашего мероприятия Scouting Stars! » - сказала Джоан Тейлор, директор по развитию девочек-скаутов, после того, как получила личную доставку. «Какие отличные новости для местных девочек-скаутов.

    Получатель гранта CHIF Camp Rainbow Gold в Вуд-Ривер проводит развлекательные и расширяющие возможности лагеря для детей с диагнозом рака и их семей.

    Эмбер Грин, главный операционный директор / CNO St. Luke's McCall, и Марк Робинсон, член совета сообщества McCall, в феврале предоставили гранты CHIF различным местным организациям, включая Cascade Food Pantry, Horizon's Lifestyle and Education Team и Salmon River Senior. Граждане.

    «Доставка чеков на гранты CHIF вручную некоторым нашим партнерам по сообществу была действительно полезным событием, - сказал Грин. «Многие некоммерческие организации в наших сообществах находят инновационные способы улучшения здоровья, и мы очень рады их поддержать».

    Грант, предоставленный пожилым людям в Салмон-Ривер, поможет компенсировать расходы, связанные с Connecting U Salmon River Transit, который обеспечивает бесплатный проезд для пожилых людей между Риггинсом и Макколлом, обеспечивая доступ к медицинским приемам, покупкам продуктов и общественной деятельности.

    «Мне очень понравилось встречаться с получателями грантов и узнавать об их инновационных программах сообщества», - сказал Робинсон.

    St. Luke’s имеет честь поддерживать многие некоммерческие организации по всему Айдахо, которые выполняют миссию по улучшению здоровья сообществ, которые она обслуживает, сказала Тереза ​​МакЛеод, старший директор по взаимодействию с общественностью в St.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *